Методические указания МУК 4.1.3608-20 "Многокомпонентное определение остаточных количеств пестицидов различных химических классов при совместном присутствии в зерне хлебных злаков хроматографическими методами" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 29 июля 2020 г.)

Методические указания МУК 4.1.3608-20
"Многокомпонентное определение остаточных количеств пестицидов различных химических классов при совместном присутствии в зерне хлебных злаков хроматографическими методами"
(утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 29 июля 2020 г.)

Введены впервые

I. Общие положения и область применения

1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают порядок применения методов высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с тройным квадрупольным масс-детектором (далее - ВЭЖХ-МС/МС) для определения в зерне хлебных злаков массовых концентраций пенконазола в диапазоне 0,005-0,050 мг/кг; ацетамиприда, диметоата, имидаклоприда, ипконазола, карбендазима, карбоксина, клотианидина, крезоксим-метила, ометоата, пираклостробина, прохлораза, спироксамина, тиабендазола, тиаклоприда, тиаметоксама, трифлоксистробина, флорасулама, флуксапироксада, флуметсулама, флуопирама, эпоксиконазола в диапазоне 0,01-0,10 мг/кг; ипродиона в диапазоне 0,1-1,0 мг/кг, а также газожидкостной хроматографии с масс-селективным детектором (далее - ГЖХ-МС) для определения массовых концентраций фипронила, фипронил-сульфона в диапазоне 0,005-0,050 мг/кг; бифентрина, диазинона, лямбда-цигалотрина, мефеноксама (металаксил, металаксил М), малатиона, протиоконазола-дестио, пропиконазола, ципродинила в диапазоне 0,01-0,10 мг/кг; флудиоксонила, флутриафола, ципроконазола в диапазоне 0,02-0,20 мг/кг; хлороталонила, эсфенвалерата в диапазоне 0,05-0,50 мг/кг; тебуконазола, альфа-циперметрина, эпоксиконазола в диапазоне 0,1-1,0 мг/кг.

1.2. МУК предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы организациями, осуществляющими исследования в области безопасности и качества пищевой продукции и продовольственного сырья.

1.3. МУК носят рекомендательный характер.

II. Физико-химические свойства

2.1. Характеристика веществ и основные физико-химические свойства представлены в табл. 1.1 и 1.2.

Таблица 1.1

Характеристика веществ, основные физико-химические свойства (определение методом ВЭЖХ-МС-МС)

Вещество, химическое наименование*	Брутто-формула, молекулярная масса	Температура плавления, °C	Растворимость в воде, (20-25°С)	Коэффициент распределения н-октанол-вода
1	2	3	4	5
Ацетамиприд (E)--[(6-хлор-3-пиридил)метил]--циано--метилацетамиприд	222,7	98,9	4,25	0,80 (рН 7)
Диметоат O,O-диметил S-метилкарбомоилметил фосфородитиоат	229,3	49	23,3 (рН 5); 23,8 (рН 7); 25,0 (рН 9)	0,704
Имидаклоприд (Е)-1-(6-хлор-3-пиридил-метил)-N-нитроимидазолидин-2-илиденамин	255,7	144	0,61	0,57 (20°С)
Ипконазол 2-(4-хлорофенил)-5-изопропил-1-(1H-1,2,3-триазол-1-илметил)циклопентанол	333,2	88-90	6,93	4,21 (25°С)
Ипродион 3-(3,5-дихлорофенил)-N-изопропил-2,4-диоксоимидазолидин-1-карбоксамид	329,0	134	0,013	3,0 (рН 3 и 5)
Карбендазим метил бензимидазол-2-илкарбамат	191,2	302-307	29 (pH 4); 8 (pH 7); 7 (pH 8)	1,38 (pH 5); 1,51 (pH 7); 1,49 (pH 9)
Карбоксин 5,6-дигидро-2-метил-1,4-оксати-ин-3-карбоксанилид	235,1	91,5-92,5	0,199	2,2 (25°C)
Клотианидин (E)-1-(2-хлор-1,3-тиазол-5-илметил)-3-метил-2-нитрогуанидин	249,7	176,8	0,33	0,9
Крезоксим-метил (Е)-метил-2-метоксиимино [-(о-толилокси)-метил-фенил]ацетат	313,4	97,2-101,7	0,002	3,4 (pH 7; 20°C)
Ометоат O,O-диметил S-метил-карбомоилметил фосфоротиоат (метаболит диметоата)	213,2	-28	10	-0,74 (20°C)
Пенконазол (RS)-1-(2,4-дихло--пропилфенилэтил)-1H-1,2,4-триазол	284,2	60,3	0,073	3,72 (pH 5,7; 25°C)
Пираклостробин Метил N-{2-[1-(4-хлорфенил)-1H-пиразол-3-илоксиметил] фенил} (N-метокси) карбамат	387,8	63,7-65,2	0,0019	3,99 (22°C)
Прохлораз Метил N-{2-[1-(4-хлорфенил)-1H-пиразол-3-илоксиметил] фенил} (N-метокси) карбамат	375	46,5-49,3	0,0344	4,12
Спироксамин 8-трет-бутил-1,4-диоксаспиро[4,5]декан-2-илметил(этил)(пропил)амин	297,5	темп. кипения 120°C при 6,7 Pa	>200 (pH 3); 0,340-0,470 (pH 7); 0,010-0,014 (pН 9)	2,79
Тиабендазол 2-(1,3-тиазол-4-ил)бензимидазол	201,3	197-198	10,0 (pH 2), 0,16 (pH 4), 0,03 (pH 7-10)	2,39 (pH 7)
Тиаклоприд (Z)-3-(6-хлор-3-пиридил-метил)-1,3-тиазолидин-2-илидeнциaнaмид	252,7	136	0,185	1,25 (pH 7)
Тиаметоксам 3-[(2-хлор-5-тиазолил)метил]тетрагидро-5-метил-N-нитро-4H-1,3,5-оксадиазин-4-имин	291,7	139,1	4,1	0,13 (25°C)
Трифлоксистробин (E)-метоксиимино-{(E)--[1--трифторо-м-толил)этилиденеамино-окси]-о-толил}ацетат	408,1	72,9	0,00061	4,5 (25°C)
Флорасулам 2',6',8-трифтор-5-метокси[1,2,4]триазоло [1,5-с]-пиримидин-2-сульфонанилид	359	193,5-230,5	6,36 (pH 7)	1,22 (pH 7)
Флуксопироксад 3-дифторметил-1-метил-N-(3,4,5-трифтор [1,1-бифенил]-2-ил)-1Н-пиразол-4-карбоксамид	381,1	156,8	3,78	-
Флуметсулам 2',6'-дифторо-5-метил[1,2,4]триазоло[1,5-а]-пиримидин-2-сульфонанилид	325	251-253	0,049 (pH 2,5)	0,68 (25°C)
Флуопирам N-{2-[3-хлоро-5-(трифторометил)пиридин-2-ил]этил}-2-(трифторометил)бензамид	396,7	117,5	16,0	3,3 (40°C)
Эпоксиконазол (2RS,3SR)-1-[3-(2-хлорфенил)-2,3-эпокси-2-(4-фторфенил)пропил]-1Н-1,2,4-триазол	329,8	136,7		3,44 (pH 7)

______________________________

* В соответствии с Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК, англ. International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC).

Таблица 1.2

Характеристика веществ, основные физико-химические свойства (определение методом ГЖХ-МС)

Вещество, химическое наименование*	Брутто-формула, молекулярная масса	Температура плавления, °С	Растворимость в воде, (20-25°С)	Коэффициент распределения н-октанол-вода
1	2	3	4	5
Бифентрин 2-метил-3-фенилбензил (1RS)-цис-3-(2-хлор-3,3,3-трифторпроп-1-енил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат	422,88	69,3		1,26 (рН 7)
Диазинон O,O-диэтил-O-2-изопропил-6-метилпиримидил-4-ил фосфоротиоат	304,3	-	0,06	3,3
Лямбда-цигалотрин (R)-а-циано-3-феноксибензил (1S)-цис-3-[(Z)-2-хлор-3,3,3-трифторпропенил]-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат и (S)-а-циано-3-феноксибензил (1R)-цис-3-[(Z)-2-хлор-3,3,3-трифторпропенил]-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат	449,9	49,2		7,0 (20°С)
Мефеноксам (металаксил, металаксил М) Метиловый эфир N-(метоксиацетил)-N-(2,6-ксилил)-D-аланиновой кислоты (метиловый эфир N-(метоксиацетил)-N-(2,6-ксилил)-DL-аланиновой кислоты)	279,3	67,9	26,0	1,71 (20°С)
Малатион O,O-Диметил-S-(1,2-дикар-бэтоксиэтил)дитиофосфат	330,3	-20	0,145	2,75
Протиоконазол 2-[(RS)-2-гидрокси-2-(1-хлорциклопропил)-3-(2-хлорфенил)пропил]-2Н-1,2,4-триазол-3(4Н)-тион	342,3	141,8	300	3,82 (рН 7, 20°С)
Протиоконазол-дестио -(1-хлорциклопропил)--(2-хлорфенил)метил-1Н-1,2,4-триазол-1-этанол (метаболит протиоконазола)	312,2	108,5	-	3,04
Пропиконазол [(+/-)-1-[2-(2,4-дихлорфенил)-4-пропил-1,3-диоксолан-2-илметил]-1Н-1,2,4-триазол]	342,3	-23	0,15	3,72
Тебуконазол (RS)-1-п-Хлорфенилы-4,4-диметил-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-илметил) пентан-3-ол	307,8	105	0,036	3,7
Фипронил -5-амино-1-(2,6-дихлор--трифтор-п-толил)-4-трифторметилсульфинил-пиразол-3-карбонитрил	437,2	203		3,75 (pH 7, 20°C)
Фипронил-сульфон -5-амино-1-(2,6-дихлор--трифтор-п-толил)-4-трифторметилсульфинил-пиразол-3-карбонитрил (метаболит фипронила)	453,2	-	-	-
Флудиоксонил 4-(2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-4-ил)-1Н-пиррол-3-карбонитрил	199,8	199,8		4,12 (25°C)
Флутриафол 3,6-дихлор-2-метоксибензойная кислота	301,29	130	0,95	2,3 (pH 7)
Хлороталонил тетрахлоризофталонитрил	265,9	252,1		2,92 (25°C)
Альфа-циперметрин ацетат, содержащий (R)--циано-3-феноксибензил (1S)-цис-3-(2,2-дихлорвинил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат и (S)--циано-3-феноксибензил (1R)-цис-3-(2,2-дихлорвинил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат	416,3	81,5	0,004	5,5 (20°C)
Ципродинил 4-циклопропил-6-метил-N-фенилпиримидин-2-амин	225,29	75,9	0,020 (pH 5,0), 0,013 (pH 7,0), 0,015 (pH 9,0)	4 (pH 7, 20°С)
Ципроконазол (2RS,3RS;2RS,3SR)-2-(4-хлорфенил)-3-циклопропил-1-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол	291,78	106,5	0,93	3,09 (рН 7)
Эпоксиконазол (2RS,3SR)-1-[3-(2-xлоpфенил)-2,3-эпокси-2-(4-фторфенил)пропил]-1Н-1,2,4-триазол	329,8	136,7		3,44 (рН 7)
Эсфенвалерат (S)--циано-3-феноксибензил (S)-2-(4-хлорфенилы)-3-метилбутират	419,9	60		6,22 (25°С)

III. Погрешность измерений

3.1. При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и её составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 3.1 и 3.2 для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 3.1

Метрологические параметры (метод ВЭЖХ-МС-МС)

Определяемое вещество	Диапазон определяемых концентраций, мг/кг	Показатель точности (граница относительной погрешности, P = 0,95), , %	Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), , %	Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), , %	Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, %	Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, %
1	2	3	4	5	6	7
Пенконазол	от 0,005 до 0,05 вкл.	50	9,1	12,8	26	36
Ацетамиприд	от 0,01 до 0,10 вкл.	53	7,0	9,7	19	27
Диметоат	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	8,6	12	24	34
Имидаклоприд	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	5,0	6,9	14	19
Ипконазол	от 0,01 до 0,10 вкл.	53	11,8	16,5	33	46
Карбендазим	от 0,01 до 0,1 вкл.	50	5,2	7,3	15	20
Карбоксин	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	5,3	7,5	15	21
Клотианидин	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	6,4	8,9	18	25
Крезоксим-метил	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	7,5	10,5	21	29
Ометоат	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	8,2	11,5	23	32
Пираклостробин	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	8,5	11,8	24	33
Прохлораз	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	11,3	15,9	32	44
Спироксамин	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	5,7	7,9	16	22
Тиабендазол	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	7,3	10,2	20	29
Тиаклоприд	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	7,4	10,3	21	29
Тиаметоксам	от 0,01 до 0,10 вкл.	53	9,2	12,9	26	36
Трифлоксистробин	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	10,8	15,2	30	42
Флорасулам	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	7,6	10,6	21	30
Флуксапироксад	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	7,8	11,0	22	31
Флуметсулам	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	6,5	9,0	18	25
Флуопирам	от 0,01 до 0,10 вкл.	58	3,1	4,3	9	12
Эпоксиконазол	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	9,0	12,6	25	35
Ипродион	от 0,1 до 1,0 вкл.	50	8,1	11,3	23	32

Таблица 3.2

Метрологические параметры (метод ГЖХ-МС)

Определяемое вещество	Диапазон определяемых концентраций, мг/кг	Показатель точности (граница относительной погрешности, Р = 0,95), , %	Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), , %	Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости), , %	Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r, %	Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), R, %
1	2	3	4	5	6	7
Фипронил	от 0,005 до 0,05 вкл.	50	7,4	10,3	21	29
Фипронил-сульфон	от 0,005 до 0,050 вкл.	50	7,0	9,9	20	28
Бифентрин	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	7,6	10,7	21	30
Диазинон	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	5,4	7,6	15	21
Лямбда-цигалотрин	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	6,8	9,6	19	27
Мефеноксам	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	5,8	8,1	16	23
Малатион	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	5,1	7,1	14	20
Протиоконазол-дестио	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	4,9	6,8	14	19
Пропиконазол	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	8,1	11,3	23	32
Ципродинил	от 0,01 до 0,10 вкл.	50	4,6	6,4	13	18
Флудиоксонил	от 0,02 до 0,20 вкл.	50	3,0	4,2	8	12
Флутриафол	от 0,02 до 0,20 вкл.	50	5,2	7,3	15	20
Ципроконазол	от 0,02 до 0,20 вкл.	50	5,9	8,2	16	23
Хлороталонил	от 0,05 до 0,50 вкл.	50	3,4	4,7	9	13
Эсфенвалерат	от 0,05 до 0,50 вкл.	50	6,2	8,6	17	24
Тебуконазол	от 0,1 до 1,0 вкл.	50	4,6	6,5	13	18
Альфа-циперметрин	от 0,1 до 1,0 вкл.	52	5,9	8,3	17	23
Эпоксиконазол	от 0,1 до 1,0 вкл.	50	5,7	7,9	16	22

3.2. Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (n = 20) приведены в табл. 3.3 и 3.4.

Таблица 3.3

Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата (метод ВЭЖХ-МС/МС)

Определяемое вещество	Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20
	предел обнаружения, мг/кг	диапазон определяемых концентраций, мг/кг	средняя полнота извлечения, %	стандартное отклонение, %	доверительный интервал среднего результата,
1	2	3	4	5	6
Пенконазол	0,005	0,005-0,050	90	8,28	4,32
Ацетамиприд	0,01	0,01-0,10	82	5,79	3,02
Диметоат	0,01	0,01-0,10	86	7,19	3,75
Имидаклоприд	0,01	0,01-0,10	87	11,29	5,89
Ипконазол	0,01	0,01-0,10	83	10,29	5,36
Карбендазим	0,01	0,01-0,10	87	8,18	4,26
Карбоксин	0,01	0,01-0,10	88	5,67	2,96
Клотианидин	0,01	0,01-0,10	83	6,14	3,2
Крезоксим-метил	0,01	0,01-0,10	90	7,1	3,7
Ометоат	0,01	0,01-0,10	85	7,03	3,67
Пираклостробин	0,01	0,01-0,10	86	6,74	3,51
Прохлораз	0,01	0,01-0,10	90	9,62	5,02
Спироксамин	0,01	0,01-0,10	92	6,82	3,56
Тиабендазол	0,01	0,01-0,10	93	8,02	4,18
Тиаклоприд	0,01	0,01-0,10	94	6,62	3,45
Тиаметоксам	0,01	0,01-0,10	85	8,45	4,41
Трифлоксистробин	0,01	0,01-0,10	93	9,55	4,98
Флорасулам	0,01	0,01-0,10	91	6,95	3,63
Флуксапироксад	0,01	0,01-0,10	88	8,05	4,2
Флуметсулам	0,01	0,01-0,10	94	6,56	3,42
Флуопирам	0,01	0,01-0,10	75	2,17	1,13
Эпоксиконазол	0,01	0,01-0,10	99	10,2	5,32
Ипродион	0,1	0,1-1,0	98	7,45	3,88

Таблица 3.4

Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата (метод ГЖХ-МС)

Определяемое вещество	Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20
	предел обнаружения, мг/кг	диапазон определяемых концентраций, мг/кг	средняя полнота извлечения, %	стандартное отклонение, %	доверительный интервал среднего результата,
Фипронил	0,005	0,005-0,050	100	12,1	6,31
Фипронил-сульфон	0,005	0,005-0,050	98	10,2	5,32
Бифентрин	0,01	0,01-0,10	86	9,43	4,92
Диазинон	0,01	0,01-0,10	89	8,64	4,50
Лямбда-цигалотрин	0,01	0,01-0,10	86	7,19	3,75
Мефеноксам	0,01	0,01-0,10	94	11,06	5,77
Малатион	0,01	0,01-0,10	92	12,66	6,60
Протиоконазол-дестио	0,01	0,01-0,10	108	5,19	2,70
Пропиконазол	0,01	0,01-0,10	104	10,44	5,44
Ципродинил	0,01	0,01-0,10	91	11,93	6,22
Флудиоксонил	0,02	0,02-0,20	101	8,1	4,23
Флутриафол	0,02	0,02-0,20	102	8,57	4,47
Ципроконазол	0,02	0,02-0,20	91	11,88	6,19
Хлороталонил	0,05	0,05-0,50	93	5,55	2,90
Эсфенвалерат	0,05	0,05-0,50	90	12,41	6,47
Тебуконазол	0,1	0,1-1,0	109	4,65	2,42
Альфа-циперметрин	0,1	0,1-1,0	88	10,54	5,50
Эпоксиконазол	0,1	0,1-1,0	87	13,04	6,80

IV. Метод измерений

4.1. Методы основаны на определении ацетамиприда, диметоата, имидаклоприда, ипконазола, ипродиона, карбендазима, карбоксина, клотианидина, крезоксим-метила, ометоата, пенконазола, пираклостробина, прохлораза, спироксамина, тиабендазола, тиаклоприда, тиаметоксама, трифлоксистробина, флорасулама, флуксапироксада, флуметсулама, флуопирама, эпоксиконазола при совместном присутствии с помощью ВЭЖХ на обращенной фазе с тройным квадрупольным масс-детектором в режиме динамического мультиреакционного мониторинга; а также бифентрина, диазинона, лямбда-цигалотрина, мефеноксама (металаксил, металаксил М), малатиона, протиоконазола-дестио, пропиконазола, тебуконазола, фипронила, фипронил-сульфона, флудиоксонила, флутриафола, хлороталонила, альфа-циперметрина, ципродинила, ципроконазола, эпоксиконазола и эсфенвалерата при совместном присутствии методом капиллярной ГЖХ с масс-селективным детектором.

4.2. Экстракцию веществ из анализируемых проб выполняют ацетонитрилом с использованием смеси солей для экстракции (смесь сульфата магния, хлорида натрия, цитрата натрия и натрия лимоннокислого двузамещенного 1,5-водного); очистку экстрактов проводят методом дисперсионной твердофазной экстракции с применением смеси сорбентов на основе аминов, октадецилсилана.

4.3. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

V. Средства измерений, реактивы, вспомогательное оборудование, устройства и материалы

Таблица 5.1

Средства измерений

Наименование средств измерения	Обозначение и наименование документов, технические характеристики
1	2
Жидкостный хроматограф с тандемным масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь, снабженный автоматическим пробоотборником и термостатом колонки	Внесено в реестр "Утверждённые типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений
Газовый хроматограф, снабженный масс-селективным детектором, автоматическим пробоотборником, предназначенный для работы с капиллярной колонкой	Внесено в реестр "Утверждённые типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений
Прибор/приборы для измерения атмосферного давления, температуры и относительной влажности воздуха	Внесено в реестр "Утверждённые типы средств измерений" Федерального информационного фонда по обеспечению единства измерений
Весы аналитические с пределом допустимой погрешности г	ГОСТ Р 53228
Весы лабораторные общего назначения с пределом допустимой погрешности г	ГОСТ Р 53228
Колбы мерные вместимостью 2-10-2, 2-50-2, 2-100-2, 2-1000-2	ГОСТ 1770
Микрошприц вместимостью 10	-
Меры массы	ГОСТ OIML R 111-1
Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10	ГОСТ 29227

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

Таблица 5.2

Реактивы

Наименование реактивов	Обозначение и наименование документов, технические характеристики
1	2
Аналитический стандартный образец ацетамиприда	CAS N 135410-20-7, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец диметоата	CAS N 60-51-5, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец имидаклоприда	CAS N 138261-41-3, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец ипконазола	CAS N 125225-28-7, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец ипродиона	CAS N 36734-19-7, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец карбендазима	CAS N 10605-21-7, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец карбоксина	CAS N 5234-68-4, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец клотианидина	CAS N 210880-92-5, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец крезоксим-метила	СAS N 143390-89-0, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец ометоата	CAS N 1113-02-6, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец пенконазола	CAS N 66246-88-6, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец пираклостробина	CAS N 175013-18-0, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец прохлораза	CAS N 67747-09-5, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец спироксамина	СAS N 118134-30-8, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец тиабендазола	СAS N 148-79-8, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец тиаклоприда	CAS N 111988-49-9, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец тиаметоксама	CAS N 153719-23-4, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец трифлоксистробина	CAS N 141517-21-7, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец флорасулама	CAS N 145701-23-1, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец флуксапироксада	CAS N 907204-31-3, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец флуметсулама	CAS N 98967-40-9, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец флуопирама	CAS N 658066-35-4, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец эпоксиконазола	CAS N 133855-98-8, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец бифентрина	CAS N 79538-32-2, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец диазинона	ГСО 7405-97
Аналитический стандартный образец лямбда-цигалотрина	CAS N 91465-08-6, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец мефеноксама (металоксил)	СAS N 57837-19-1, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец малатиона	CAS N 121-75-5, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец протиоконазол-дестио	CAS N 120983-64-4, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец пропиконазола	CAS N 60207-90-1, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец тебуконазола	CAS N 107534-96-3, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец фипронила	CAS N 120068-37-3, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец фипронил-сульфона	CAS No 120068-36-2, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец флудиоксонила	СAS No 131341-86-1, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец флутриафола	СОП 41-06
Аналитический стандартный образец хлороталонила	CAS N 1897-45-6, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец альфа-циперметрина	CAS N 67375-30-8, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец ципродинила	CAS N 121552-61-2, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец ципроконазола	CAS N 94361-06-5, с содержанием основного компонента не менее 95%
Аналитический стандартный образец эсфенвалерата	CAS N 66230-04-4, с содержанием основного компонента не менее 95%
Азот особой чистоты, в баллонах	ГОСТ 9293 (ИСО 2435)
Ацетон особо чистый	ГОСТ 2603-79
Ацетонитрил для ВЭЖХ	Чистота не менее 99,9%
Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная)	ГОСТ Р 52501
Гелий газообразный высокой чистоты, в баллонах	Высокой чистоты, с содержанием гелия не менее 99,999%
Калий марганцовокислый (перманганат калия) химически чистый	ГОСТ 20490
Калий углекислый (карбонат калия, поташ) химически чистый прокаленный	ГОСТ 4221
Магний сернокислый (сульфат магния) безводный химически чистый	Квалификация реактива: химически чистый
Метиловый спирт (метанол) химически чистый	ГОСТ 6995
Муравьиная кислота 99,7%-я, чистая для анализа	ГОСТ 5848
Натрий хлористый (хлорид натрия) химически чистый	ГОСТ 4233
Натрий лимоннокислый двузамещенный 1,5-водный химически чистый	Квалификация реактива: химически чистый
Натрий лимоннокислый трехзамещенный, чистый для анализа	ГОСТ 22280
Сорбент для твердофазной экстракции на основе первичных-вторичных аминов	Площадь поверхности сорбента ~570 , средний размер пор 67 А, средний размер частиц 60 мкм
Сорбент для твердофазной экстракции на основе октадецилсилана С18	Площадь поверхности ~547 , средний размер пор 64 А, средний размер частиц 58 мкм
Уксусная кислота ледяная химически чистая	ГОСТ 61
Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора) химически чистый	Квалификация реактива: химически чистый

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

Таблица 5.3

Вспомогательное оборудование, устройства, материалы

Наименование вспомогательного оборудования, устройств, материалов	Обозначение и наименование документов, технические характеристики
1	2
Виалы вместимостью 2 с фторопластовой прокладкой и навинчивающейся крышкой	-
Воронки химические стеклянные конусные	ГОСТ 25336
Груша резиновая	-
Набор для фильтрации растворителей через мембрану	-
Керамические гомогенизаторы для пробирок на 50	-
Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками, вместимостью 50 и 15	-
Склянка из темного стекла	-
Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 30	-
Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении	-
Холодильник водяной обратный	-
Фильтры мембранные для фильтрации проб с помощью шприца, размер пор 0,22 мкм	-
Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент 5% фенил- и 95% диметилполисилоксана, толщина пленки сорбента 0,25 мкм	-
Хроматографическая колонка стальная длиной 150 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернением 1,8 мкм	-
Центрифуга лабораторная роторная, скорость вращения до 4500 об/мин	-
Шприцы медицинские одноразовые вместимостью 2	ГОСТ ISO 7886-1

Примечание. Допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

VI. Требования безопасности

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовые хроматографы.

6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

6.3. При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 ), необходимо соблюдать нормы и правила*. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив в нем понижающий редуктор.

6.4. Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе с масс-селективным детектором и жидкостном хроматографе с тройным квадрупольным масс-детектором, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

VII. Условия измерений

7.1. При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на газовом и жидкостном хроматографах проводят в условиях, рекомендованных технической документацией на приборы.

VIII. Подготовка к выполнению измерений

8.1. Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, градуировочных растворов, растворов внесения, смеси растворителей для растворения проб, компонентов подвижной фазы (метод ВЭЖХ-МС/МС), смеси солей для экстракции и смеси сорбентов для очистки экстрактов, установление градуировочных характеристик, отбор проб.

8.2. Очистка органических растворителей. Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30. Хранят в емкости из темного стекла не более 3 месяцев.

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют; непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 ацетонитрила 10 г карбоната калия).

8.3. Приготовление раствора уксусной кислоты в ацетонитриле с объемной долей 1% (1%-й раствор). В мерную колбу вместимостью 1000 помещают 300-400 ацетонитрила, вносят 10 ледяной уксусной кислоты, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

8.4. Приготовление компонентов подвижной фазы для ВЭЖХ.

8.4.1. Компонент А: раствор 0,05% (вес/объем) формиата аммония +0,01% муравьиной кислоты (по объему) в воде.

В мерную колбу вместимостью 1000 помещают г формиата аммония, растворяют в 300-400 бидистиллированной воды, вносят 0,1 муравьиной кислоты, доводят водой до метки, перемешивают.

8.4.2. Компонент В: раствор 0,01% (по объему) муравьиной кислоты в метаноле.

В мерную колбу вместимостью 1000 помещают 300-400 метанола, вносят 0,1 муравьиной кислоты, доводят метанолом до метки, перемешивают.

Растворы хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

8.5. Приготовление градуировочных растворов.

8.5.1. Серия N 1 для реализации метода ВЭЖХ-МС/МС.

8.5.1.1. Исходные растворы ацетамиприда, диметоата, имидаклоприда, ипконазола, ипродиона, карбендазима, карбоксина, клотианидина, крезоксим-метила, ометоата, пенконазола, пираклостробина, прохлораза, спироксамина, тиабендазола, тиаклоприда, тиаметоксама, трифлоксистробина, флорасулама, флуксапироксада, флуметсулама, флуопирама, эпоксиконазола для градуировки (концентрация 100 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают по г каждого вещества (раздельно), растворяют в 50-60 ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Растворы хранят в морозильной камере при температуре -18°С в течение 3 месяцев.

Рабочие растворы готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходных растворов для градуировки.

8.5.1.2. Градуировочный раствор N 1 ипродиона для градуировки и внесения (концентрация 10 ). В мерную колбу вместимостью 100 помещают 10 исходного раствора ипродиона с концентрацией 100 (п. 8.4.1.1), доводят ацетонитрилом до метки.

Градуировочный раствор N 1 хранят в морозильной камере при температуре -18°С в течение месяца.

8.5.1.3. Градуировочные растворы N 1' ацетамиприда, диметоата, имидаклоприда, ипконазола, карбендазима, карбоксина, клотианидина, крезоксим-метила, ометоата, пенконазола, пираклостробина, прохлораза, спироксамина, тиабендазола, тиаклоприда, тиаметоксама, трифлоксистробина, флорасулама, флуксапироксада, флуметсулама, флуопирама, эпоксиконазола для градуировки и внесения (концентрация 1 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают по 1 исходного раствора каждого вещества (раздельно) с концентрацией 100 (п. 8.5.1.1), доводят ацетонитрилом до метки.

Градуировочные растворы хранят в морозильной камере при температуре -18°С в течение месяца.

Растворы используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения веществ методом "внесено-найдено", а также контроле точности измерений методом добавок.

8.5.1.4. Рабочие растворы N 2-6 ипродиона (концентрация 0,05-0,5 ). В 5 мерных колб вместимостью 100 помещают по 0,5; 1,0, 2,0; 3,0 и 5,0 градуировочного раствора N 1 ипродиона с концентрацией 10,0 (п. 8.5.1.3), доводят до метки 1%-м раствором уксусной кислоты в ацетонитриле, приготовленным по п. 8.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 2-6 с концентрацией ипродиона 0,05; 0,1; 0,2; 0,3 и 0,5 соответственно.

Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре 4-6°С в течение недели.

8.5.1.5. Рабочие растворы N 2'-6' ацетамиприда, диметоата, имидаклоприда, ипконазола, карбендазима, карбоксина, клотианидина, крезоксим-метила, ометоата, пираклостробина, прохлораза, спироксамина, тиабендазола, тиаклоприда, тиаметоксама, трифлоксистробина, флорасулама, флуксапироксада, флуметсулама, флуопирама, эпоксиконазола (концентрация 0,005-0,1 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают по 0,5; 1,0, 2,0; 5,0 и 10 градуировочного раствора N 1' каждого вещества (раздельно) с концентрацией 1,0 (п. 8.5.1.3), доводят до метки 1%-м раствором уксусной кислоты в ацетонитриле, приготовленным по п. 8.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 2'-6' с концентрацией каждого вещества 0,005; 0,01; 0,02; 0,05 и 0,1 соответственно.

Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре +2-6°С в течение недели.

8.5.1.6. Рабочие растворы N 2"-6" пенконазола (концентрация 0,0025-0,05 ). В 4 мерные колбы вместимостью 100 помещают по 0,5; 1,0, 2,5 и 5,0 градуировочного раствора N 1' пенконазола с концентрацией 1,0 (п. 8.4.1.3), доводят до метки 1%-м раствором уксусной кислоты в ацетонитриле, приготовленным по п. 8.3, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 2"-5" с концентрацией пенконазола 0,005; 0,01; 0,025; и 0,5 соответственно.

В мерную колбу вместимостью 100 помещают 5,0 рабочего раствора N 5" с концентрацией пенконазола 0,05 (п. 8.4.1.5), доводят до метки 1%-м раствором уксусной кислоты в ацетонитриле, приготовленным по п. 8.3, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор N 6" с концентрацией пенконазола 0,0025 .

Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре +2-6°С в течение недели.

8.5.2. Серия N 2 для реализации метода ГЖХ-МС.

8.5.2.1. Исходные растворы бифентрина, диазинона, лямбда-цигалотрина, мефеноксама, малатиона, протиоконазола-дестио, пропиконазола, тебуконазола, фипронила, фипронил-сульфона, флудиоксонила, флутриафола, хлороталонила, альфа-циперметрина, ципродинила, ципроконазола, эпоксиконазола и эсфенвалерата для градуировки (концентрация 100 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают г каждого вещества (раздельно), растворяют в 50-60 ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно перемешивают.

Растворы хранят в морозильной камере при температуре -18°С в течение 6 месяцев.

Рабочие растворы готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходных растворов для градуировки.

8.5.2.2. Растворы N 1 тебуконазола, альфа-циперметрина, эпоксиконазола для градуировки и внесения (концентрация 10 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают по 10 исходного раствора каждого вещества (раздельно) с концентрацией 100 (п. 8.5.2.1), разбавляют ацетоном до метки.

Градуировочные растворы N 1 хранят в морозильной камере при температуре -18°С в течение месяца.

Растворы используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения веществ методом "внесено-найдено", а также контроле точности измерений методом добавок.

8.5.2.3. Растворы N 1' хлороталонила, эсфенвалерата для градуировки и внесения (концентрация 5,0 ). В 2 мерные колбы вместимостью 100 помещают по 5 исходного раствора каждого вещества (раздельно) с концентрацией 100 (п. 8.5.2.1), разбавляют ацетоном до метки.

Градуировочные растворы N 1' хранят в морозильной камере при температуре -18°С в течение месяца.

Растворы используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения веществ методом "внесено-найдено", а также контроле точности измерений методом добавок.

8.5.2.4. Растворы N 1" бифентрина, диазинона, лямбда-цигалотрина, мефеноксама, малатиона, протиоконазола-дестио, пропиконазола, фипронила, фипронил-сульфона, флудиоксонила, флутриафола, ципродинила и ципроконазола для градуировки и внесения (концентрация 1,0 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают по 1 исходного раствора каждого вещества (раздельно) с концентрацией 100 (п. 8.5.2.1), разбавляют ацетоном до метки.

Градуировочные растворы N 1" хранят в морозильной камере при температуре -18°С в течение месяца.

Растворы используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения веществ методом "внесено-найдено", а также контроле точности измерений методом добавок.

8.5.2.5. Рабочие растворы N 2а-6а фипронила, фипронил-сульфона для градуировки (диапазон концентраций 0,0025-0,05 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают 0,25; 0,5; 1,0; 2,0 и 5,0 рабочих растворов фипронила, фипронил-сульфона (раздельно) с концентрацией 1,0 (п. 8.5.2.4), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2а-6а с концентрацией каждого вещества 0,0025; 0,005; 0,01, 0,02 и 0,05 .

8.5.2.6. Рабочие растворы N 2б-6б бифентрина, диазинона, мефеноксама, малатиона, пропиконазола, ципродинила для градуировки (диапазон концентраций 0,005-0,05 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают 0,5; 0,8; 1,0; 2,0 и 5,0 рабочих растворов бифентрина, диазинона, мефеноксама, малатиона, пропиконазола, ципродинила (раздельно) с концентрацией 1,0 (п. 8.5.2.4), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2б-6б с концентрацией каждого вещества 0,005; 0,008; 0,01, 0,02 и 0,05 .

8.5.2.7. Рабочие растворы N 2в-6в лямбда-цигалотрина, протиоконазола-дестио для градуировки (диапазон концентраций 0,005-0,05 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 и 5,0 рабочих растворов лямбда-цигалотрина, протиоконазола-дестио (раздельно) с концентрацией 1,0 (п. 8.5.2.4), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 2в-6в с концентрацией каждого вещества 0,005; 0,01, 0,02; 0,04 и 0,05 .

8.5.2.8. Рабочие растворы N 2г-6г флудиоксонила, флутриафола, ципроконазола для градуировки (диапазон концентраций 0,01-0,1 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают 1,0; 2,0; 5,0; 8,0 и 10,0 рабочих растворов флудиоксонила, флутриафола, ципроконазола (раздельно) с концентрацией 1,0 (п. 8.5.2.4), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2г-6г с концентрацией каждого вещества 0,01; 0,02, 0,05; 0,08 и 0,1 .

8.5.2.9. Рабочие растворы N 2д-6д хлороталонила, эсфенвалерата для градуировки (диапазон концентраций 0,025-0,25 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 и 5,0 рабочих растворов хлороталонила, эсфенвалерата (раздельно) с концентрацией 5,0 (п. 8.5.2.3), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 2д-6д с концентрацией каждого вещества 0,025; 0,05, 0,1; 0,2 и 0,25 .

8.5.2.10. Рабочие растворы N 2е-6е тебуконазола, альфа-циперметрина, эпоксиконазола для градуировки (диапазон концентраций 0,05-0,5 ). В мерные колбы вместимостью 100 помещают 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 и 5,0 рабочих растворов тебуконазола, альфа-циперметрина, эпоксиконазола (раздельно) с концентрацией 10,0 (п. 8.5.2.2), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2е-6е с концентрацией каждого вещества 0,05; 0,1, 0,2; 0,4 и 0,5 .

Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре 4-6°С в течение недели.

8.6. Приготовление смеси солей для экстракции. Для приготовления одного набора смеси солей для экстракции смешивают г магния сернокислого, г натрия хлористого, г натрия лимоннокислого трехзамещенного и г натрия лимоннокислого двузамещенного 1,5-водного, до использования хранят в герметичной упаковке (не более 6 месяцев).

Примечание: возможно использование коммерческих наборов солей для экстракции проб фруктов и овощей массой 10 г.

8.7. Приготовление смеси сорбентов для очистки экстрактов. Для приготовления одного набора смеси сорбентов для очистки экстрактов в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 15 помещают мг сорбента для твердофазной экстракции на основе первичного-вторичного амина, мг магния сернокислого и мг твердофазного сорбента на основе октадецилсилана, закрывают герметично крышкой, встряхивают для перемешивания, хранят не более 6 месяцев.

Примечание: возможно использование коммерческих дисперсионных наборов для фруктов и овощей с маслом и воском, помещенных в полипропиленовые пробирки вместимостью 15 .

8.8. Установление градуировочных характеристик. Градуировочные характеристики, выражающие зависимость площадей пиков от концентрации ацетамиприда, диметоата, имидаклоприда, ипконазола, ипродиона, карбендазима, карбоксина, клотианидина, крезоксим-метила, ометоата, пенконазола, пираклостробина, прохлораза, спироксамина, тиабендазола, тиаклоприда, тиаметоксама, трифлоксистробина, флорасулама, флуксапироксада, флуметсулама, флуопирама, эпоксиконазола (метод ВЭЖХ), а также бифентрина, диазинона, лямбда-цигалотрина, мефеноксама, малатиона, протиоконазола-дестио, пропиконазола, тебуконазола, фипронила, фипронил-сульфона, флудиоксонила, флутриафола, хлороталонила, альфа-циперметрина, ципродинила, ципроконазола, эпоксиконазола и эсфенвалерата (метод ГЖХ) устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки NN 2-6, 2'-6', 2"-6" (серия 1 - метод ВЭЖХ) и NN 2а-6а, 2б-6б, 2в-6в, 2г-6г, 2д-6д, 2е-6е (серия 2 - метод ГЖХ) соответственно.

В инжектор жидкостного хроматографа вводят по 2 каждого градуировочного раствора, приготовленного по п.п. 8.5.1.4-8.5.1.6, и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.3.1. В испаритель газового хроматографа - по 1 каждого градуировочного раствора, приготовленного по п.п. 8.5.2.4-8.5.2.9, и анализируют в условиях хроматографирования по п. 10.3.2. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков веществ, на основании которых строят градуировочные зависимости.

8.9. Контроль стабильности градуировочной характеристики. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов концентраций для градуировки, содержание веществ в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,0025 до 0,5 в соответствии с п. 8.5.1 (метод ВЭЖХ-МС/МС), в соответствии с п. 8.5.2 (метод ГЖХ-МС).

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

, где

Х - концентрация веществ в растворе при контрольном измерении, ;

С - известная концентрация градуировочного раствора, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, ;

В - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (В = 20% при Р = 0,95).

IX. Отбор и хранение проб

9.1. Отбор проб осуществляется в соответствии с методическими документами**.

9.2. Отобранные пробы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре при комнатной температуре (в темноте) не более 2 недель. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре не выше -18°С.

9.3. Перед анализом образцы измельчают.

X. Выполнение определения

10.1. Экстракция. Образец измельченной пробы зерна массой 5 г помещают в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 50 , вносят 10 деионизированной воды, 10 ацетонитрила, помещают в пробирку керамический гомогенизатор, закрывают крышку и интенсивно встряхивают вручную 30 с, вносят в пробирку смесь солей для экстракции (приготовленную по п. 8.5), закрывают крышкой и интенсивно встряхивают (вручную) в течение 1 мин. Затем пробу центрифугируют в течение 5 мин при скорости вращения 4500 оборотов/мин и подвергают очистке с применением дисперсионной твердофазной экстракции по п. 10.2.

10.2. Очистка экстракта. Аликвоту экстракта (верхний слой в пробирке после центрифугирования) объемом 6-8 с помощью пипетки переносят в пропиленовую центрифужную пробирку, содержащую смесь сорбентов, приготовленную по п. 8.6. Закрывают крышку и интенсивно встряхивают (вручную) в течение 30 с. Центрифугируют 5 мин при скорости вращения 4500 оборотов/мин. Отбирают с помощью медицинского шприца раствор, фильтруют через мембранный фильтр (размер пор 0,22 мкм) в виалу вместимостью 2 с фторопластовой прокладкой и навинчивающейся крышкой. Помещают в автосамплер хроматографа для анализа методом ВЭЖХ-МС/МС по п. 10.3.1 или ГЖХ-МС по п. 10.3.2.

Примечание: допускается концентрирование полученных после очистки экстрактов отдуванием в токе инертного газа при температуре не более 35°С.

10.3. Условия хроматографирования.

10.3.1. Метод ВЭЖХ-МС/МС. Измерения выполняют на жидкостном хроматографе с тандемным масс-спектрометрическим детектором: тройной квадруполь с источником ионизации, оснащенным соосной подачей горячего азота для эффективной десольвации ионов при следующих режимных параметрах:

- источник ионизации: электростатическое распыление (положительная ионизация);

- режим работы: регистрация дочерних положительных ионов после разрушения материнских ионов (регистрация "перехода") в режиме динамического мультиреакционного мониторинга. Параметры масс-спектрометрического детектора приведены в табл. 10.1.

Таблица 10.1

Параметры масс-спектрометрического детектора с тройным квадруполем

Вещество	Материнский ион (масса/заряд)	Дочерние ионы (масса/заряд)	Напряжение на фрагментаторе, В	Энергия разрушения (соударения), В	Временной диапазон регистрации перехода, мин
1	2	3	4	5	6
Ацетамиприд	223,1	126,0*	100	15
		56,0	100	15
Диметоат	230	125*	65	17
		198,8	65	5
Имидаклоприд	256,1	175,1*	90	20
		209,0	90	15
Ипконазол	332,4	70,2*	109	25
		125	109	49
Ипродион	330	244,9*	110	10
		287,9	110	5
Карбендазим	192,1	160,1*	100	15
		132,1	100	25
Карбоксин	236,1	143*	86	13
		87,1	86	21
Клотианидин	250,0	169,1*	90	7
		132,1	90	15
Крезоксим-метил	314,2	116,0*	70	10
		222,0	70	10
Ометоат	214	125*	71	17
		154,9	71	13
Пенконазол	284,1	69,9*	85	15
		158,8	85	30
Пираклостробин	388,2	194,1*	100	10
		296,2	100	10
Прохлораз	376	308*	71	13
		265,9	71	13
Спироксамин	298,4	144,2*	100	10
		100,2	100	10
Тиабендазол	202,0	175,0*	120	25
		131,0	120	35
Тиаклоприд	253,1	126,0*	100	20
		186,0	100	10
Тиаметоксам	292,2	211,0*	85	4
		181,0	85	16
Трифлоксистробин	409,1	186*	81	13
		145	81	53
Флорасулам	360	129*	104	21
		82,1	104	89
Флуксапироксад	382,1	362*	94	13
		342	94	21
Флуметсулам	326	129*	118	25
		109	118	65
Флуопирам	397	145*	117	61
		172,9	117	33
Эпоксиконазол	330,1	121*	99	25
		101,1	99	53

______________________________

* Ион, используемый для количественного расчета.

Параметры работы тандемного масс-спектрометрического детектора:

-	скорость сканирования	-	200 мс;
-	давление на распылителе	-	35 psi;
-	скорость осушающего газа 1 (азот)	-	10 ;
-	температура газа 1	-	250°С;
-	скорость газа 2 (азот)	-	11 ;
-	температура газа 2	-	340°С;
-	напряжение на капилляре	-	4500 В;
-	напряжение в сопле (форсунке)	-	500 В;
-	температура квадруполей (1 и 3)	-	100°С.

Условия хроматографирования:

- хроматографическая колонка стальная, длиной 150 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами C18, зернением 1,8 мкм;

-	температура колонки:	-	45°С;
-	скорость потока элюента	-	0,4 ;

- объем вводимой пробы - 2 с промывкой иглы (3 с, метанол);

- режим элюирования (градиентный, табл. 10.2), пробег 13 мин, включая промывку колонки после анализа 3 мин.

Таблица 10.2

Режим элюирования

Время, мин	Содержание растворителя в подвижной фазе, % (по объему)
	Компонент А: раствор 0,05% (вес/объем) формиата аммония + 0,01% муравьиной кислоты (по объему) в воде	Компонент В: 0,01% (по объему) муравьиной кислоты в метаноле
0	90	10
5,0	35	65
6,5	5	95
8,5	5	95
10	90	10

Линейные диапазоны детектирования: пенконазол - 5-100 пг; ацетамиприд, диметоат, имидаклоприд, ипконазол, карбендазим, карбоксин, клотианидин, крезоксим-метил, ометоат, пираклостробин, прохлораз, спироксамин, тиабендазол, тиаклоприд, тиаметоксам, трифлоксистробин, флорасулам, флуксапироксад, флуметсулам, флуопирам, эпоксиконазол - 0,01-0,20 нг; ипродион - 0,1-1,0 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем рабочий градуировочный раствор с максимальной концентрацией каждого вещества, разбавляют 1%-м раствором уксусной кислоты в ацетонитриле (не более чем в 50 раз).

10.3.2. Метод ГЖХ-МС. Измерения выполняют на газовом хроматографе с масс-селективным детектором, автоматическим пробоотборником с использованием капиллярной кварцевой колонки длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащей сорбент 5% фенил- и 95% диметилполисилоксана, с толщиной пленки 0,25 мкм.

Параметры работы масс-спектрометрического детектора:

-	температура детектора: квадруполя	-	150°С;
-	температура источника	-	230°С;
-	температура переходной камеры	-	280°С;

- режим сканирования - мониторинг выбранных ионов (SIM). Характеристические ионы для идентификации индивидуальных веществ приведены в табл. 10.3.

Таблица 10.3

Характеристические ионы, выбранные для идентификации индивидуальных веществ

Вещество	Отношение масса-заряд	Вещество	Отношение масса-заряд
Бифентрин	181*, 165, 141	пропиконазол#	173*, 259, 191
Диазинон	179*, 137, 152	тебуконазол#	125*, 250, 163
Лямбда-цигалотрин	181*, 197, 208	фипронил#	367*, 213, 255
Мефеноксам	206*, 132, 160	пропиконазол#	173*, 259, 191
Малатион	125*, 173, 158	альфа-циперметрин	181*, 127, 163
Протиоконазол-дестио	186*, 83, 125	ципродинил	224*, 210, 225
Пропиконазол	173*, 259, 191	ципроконазол	222*, 125, 139
Тебуконазол	125*, 250, 163	эпоксиконазол	192*, 138, 165
Фипронил	367*, 213, 255	эсфенвалерат	125*, 167, 181

______________________________

* Ион, используемый для количественного расчета.

Условия хроматографирования:

-

температура испарителя

-

270°С;

- температура термостата колонки в режиме программирования: начальная температура - 90°С, выдержка 2 мин, нагрев колонки со скоростью 10 градусов в минуту до температуры 185°С, выдержка 2 мин, нагрев колонки со скоростью 2 градуса в минуту до температуры 200°С, выдержка 4 мин, нагрев колонки со скоростью 5 градусов в минуту до температуры 250°С, выдержка 11 мин, нагрев колонки со скоростью 20 градусов в минуту до температуры 270°С, выдержка 5 мин;

- газ 1 (гелий): поток в колонке: 1,0 - 1-20 мин; 0,8 - 20-30 мин; 1,0 - 30-37 мин; 1,8 - 37-52 мин;

-	давление	-	68,6 кПа;
-	средняя линейная скорость	-	37,192 см/с;
-	хроматографируемый объем	-	1 .

Линейные диапазоны детектирования: фипронил, фипронил-сульфон - 0,0025-0,0250 нг; бифентрин, диазинон, лямбда-цигалотрин, мефеноксам, малатион, протиоконазол-дестио, пропиконазол, ципродинил - 0,005-0,010 нг; флудиоксонил, флутриафол, ципроконазол - 0,01-0,10 нг; хлороталонил, эсфенвалерат - 0,025-0,250 нг; тебуконазол, альфа-циперметрин, эпоксиконазол - 0,05-0,50 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочные растворы с концентрацией 0,025 (фипронил, фипронил-сульфон), 0,05 (бифентрин, диазинон, лямбда-цигалотрин, мефеноксам, малатион, протиоконазол-дестио, пропиконазол, ципродинил), 0,1 (флудиоксонил, флутриафол, ципроконазол), 0,25 (хлороталонил, эсфенвалерат), 0,5 (тебуконазол, альфа-циперметрин, эпоксиконазол), разбавляют ацетоном (не более чем в 50 раз).

XI. Обработка результатов анализа

11.1. Содержание веществ в пробах (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

, где

A - концентрация вещества, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, ;

V - объем экстракта первичный, , равен 10 ;

m - масса анализируемого образца, г;

f - полнота извлечения вещества, % (таблица 3.1, таблица 3.2).

Содержание ометоата в образце выражают в эквиваленте действующего вещества диметоата, вводя в формулу расчета коэффициент, равный соотношению молекулярных масс: 229,3 / 231,2 = 1,06.

Содержание фипронил-сульфона в образце выражают в эквиваленте действующего вещества фипронила, вводя в формулу расчета коэффициент, равный соотношению молекулярных масс: 437,2 / 453,2 = 0,96.

Содержание протиоконазола-дестио в образце выражают в эквиваленте действующего вещества протиоконазола, вводя в формулу расчета коэффициент, равный соотношению молекулярных масс: 342,3 / 312,2 = 1,1.

XII. Оформление результатов

12.1. Результат анализа представляют в виде:

мг/кг при вероятности Р = 0,95, где

- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

, где

- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 3.1 и 3.2), %.

Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: "Содержание вещества в пробе зерна хлебных злаков - менее 0,005 мг/кг; 0,01 мг/кг; 0,02 мг/кг; 0,05 мг/кг; 0,1 мг/кг"***.

XIII. Контроль качества результатов измерений

13.1. Организация контроля качества измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки должна удовлетворять условию:

, где

- характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

, где

- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

, где

- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 3.1 и 3.2), %.

Результат контроля процедуры рассчитывают по формуле:

, где

, , - среднее арифметическое результатов параллельных определений содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контроля процедуры с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

; (1)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (1) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости R:

, где

, - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 3.1 и 3.2), %.

Библиографические ссылки

1. ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

2. ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

3. ГОСТ 29227 "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".

4. ГОСТ 28498 "Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний".

5. ГОСТ 1770 "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".

6. ГОСТ OIML R 111-1 "Государственная система обеспечения единства измерений (ГСИ). Гири классов Е(1), Е(2), F(1), F(2), M(1), М(1-2), М(2), М(2-3) и М(3). Часть 1. Метрологические и технические требования".

7. ГОСТ 9293 (ИСО 2435) "Азот газообразный и жидкий. Технические условия".

8. ГОСТ 2603 "Реактивы. Ацетон. Технические условия".

9. ГОСТ Р 52501 "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".

10. ГОСТ 20490 "Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия".

11. ГОСТ 4221 "Реактивы. Калий углекислый. Технические условия".

12. ГОСТ 6995 "Реактивы. Метанол-яд. Технические условия".

13. ГОСТ 5848 "Реактивы. Кислота муравьиная. Технические условия".

14. ГОСТ 4233 "Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия".

15. ГОСТ 22280 "Реактивы. Натрий лимоннокислый 5,5-водный. Технические условия".

16. ГОСТ 61 "Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия".

17. ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".

18. ГОСТ ISO 7886-1 "Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования".

19. ГОСТ 12.1.007 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

20. ГОСТ 12.1.019 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

21. ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная безопасность. Общие требования".

22. ГОСТ 12.4.009 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание".

23. ГОСТ 12.0.004 "Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Организация обучения безопасности труда. Общие положения".

24. Федеральные нормы и правила в области промышленной безопасности "Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением", утвержденные Приказом Ростехнадзора от 15.12.2020 N 536.

25. "Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" от 21.08.1979 N 2051-79.

26. Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности. М., 2018. 64 с.

______________________________

* Федеральные нормы и правила в области промышленной безопасности "Правила промышленной безопасности при использовании оборудования, работающего под избыточным давлением", утвержденные Приказом Ростехнадзора от 15.12.2020 N 536.

** "Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" от 21.08.1979 N 2051-79. Методические указания по регистрационным испытаниям пестицидов в части биологической эффективности. М., 2018. 64 с.

*** 0,005 мг/кг - нижний предел количественного определения пенконазола, фипронила, фипронил-сульфона;

0,01 мг/кг- нижний предел количественного определения ацетамиприда, диметоата, имидаклоприда, ипконазола, карбендазима, карбоксина, клотианидина, крезоксим-метила, ометоата, пираклостробина, прохлораза, спироксамина, тиабендазола, тиаклоприда, тиаметоксама, трифлоксистробина, флорасулама, флуксапироксада, флуметсулама, флуопирама, эпоксиконазола (метод ВЭЖХ-МС), бифентрина, диазинона, лямбда-цигалотрина, мефеноксама, малатиона, протиоконазола-дестио, пропиконазола, ципродинила;

0,02 мг/кг - нижний предел количественного определения флудиоксонила, флутриафола, ципроконазола;

0,05 мг/кг- нижний предел количественного определения хлороталонила, эсфенвалерата;

0,1 мг/кг - нижний предел количественного определения ипродиона, тебуконазола, альфа-циперметрина, эпоксиконазола (метод ГЖХ-МС).

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А.Ю. Попова