Методические указания по лабораторной диагностике классической чумы свиней (утв. Минсельхозпродом Российской Федерации 30 декабря 1996 г. N 13-4-2/809)

1. Общие положения.

1.1. Лабораторная диагностика классической чумы свиней (КЧС) основана на:

- обнаружении антигена вируса КЧС реакцией прямой иммунофлуоресценции в клетках мазков-отпечатков проб органов;

- выделении эпизоотического вируса КЧС из патологического материала инокуляцией перевиваемой культуры клеток почки поросенка (РК-15) и его идентификации реакцией прямой иммунофлуоресценции;

- обнаружении специфических антител в сыворотках крови переболевших классической чумой свиней реакцией нейтрализации флуоресцирующих микробляшек или реакцией непрямой иммунофлуоресценции;

- выделении и идентификации вируса КЧС биопробой на животных.

Для постановки иммунофлуоресцентных реакций используют "Набор препаратов для иммунофлуоресцентной диагностики классической чумы свиней".

1.2. При проведении лабораторной диагностики руководствуются "Правилами работы и охраны труда в ветеринарных лабораториях", утвержденными Министерством сельского хозяйства СССР 14 января 1975 г.

2. Схема проведения лабораторных исследований.

2.1. Отбор проб органов и подготовка патологического материала для исследования.

2.2. Приготовление мазков-отпечатков для постановки реакции прямой иммунофлуоресценции и экстрактов проб исследуемых органов для инокуляции культуры клеток (проводится одновременно).

2.3. Постановка реакции прямой иммунофлуоресценции (РПИФ) с целью обнаружения специфического антигена вируса КЧС в мазках-отпечатках из проб органов. По положительным или отрицательным результатам реакции ставят предварительный диагноз.

2.4. Инокуляция культуры клеток РК-15 экстрактами суспензий проб исследуемых органов с последующей постановкой РПИФ для обнаружения и идентификации эпизоотического вируса КЧС.

2.5. Исследование сывороток крови свиней в реакции нейтрализации флуоресцирующих микробляшек (РНФМ) или реакции непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ). Серологические исследования проводят в тех случаях, когда пробы крови получены от свиней, подозреваемых в переболевании классической чумой (ретроспективные исследования из хозяйств, не применяющих вакцинацию против КЧС в течение последних 2 лет.

2.6. Постановку биопробы проводят только по указанию Департамента ветеринарии, когда при подозрении на КЧС на основании эпизоотологического обследования получены отрицательные результаты лабораторных исследований.

3. Отбор и подготовка проб к исследованию.

3.1. Для исследования берут лимфатические узлы (подчелюстные и мезентериальные), части миндалин, селезенки, легкого, почки, кровь и костный мозг (из грудной или трубчатой кости) от 3...5 животных, убитых в стадии агонии, или не позже чем через 2...3 ч после гибели.

3.2. Пробы отбирают в стерильные флаконы массой 5...10 г каждый, герметически укупоривают резиновыми пробками.

Флаконы снаружи обрабатывают 5%-ным раствором едкого натра или осветленным 20%-ным раствором хлорной извести, обертывают марлей, смоченной тем же раствором, укладывают в полиэтиленовый пакет и помещают в термос со льдом. В случае длительной транспортировки (более 2 сут) пробы органов замораживают. Термос помещают в металлический контейнер, опечатывают и доставляют с нарочным в лабораторию с сопроводительным документом.

3.3. При ретроспективной диагностике направляют 5...10 проб крови (по 5...8 см ³) от свиней, подозреваемых в переболевании классической чумой. Кровь берут не ранее чем через 15...20 сут после установления признаков болезни.

3.4. В лаборатории пробы селезенки, лимфатических узлов, легкого, почки каждого животного очищают от жировой и соединительной тканей и готовят по 2 мазка-отпечатка каждого органа для РПИФ. Для этого обезжиренные спирт-эфиром (1:1) покровные стекла укрепляют в расщепах деревянных палочек с условными номерами и делают мазок-отпечаток, прикладывая стекло к поверхности среза исследуемого органа (каждый отпечаток делается новым срезом органа). Мазки-отпечатки высушивают на воздухе при комнатной температуре (30...60 мин) и помещают в химический стакан с холодным (2...4°C) ацетоном. Фиксацию проводят в камере бытового холодильника при (42)°C в течение 10...15 мин. Затем мазки-отпечатки извлекают из ацетона, высушивают и используют для постановки РПИФ. Хранят мазки-отпечатки при (42)°C не более 3 сут.

Контрольные отрицательные мазки-отпечатки готовят заранее, используя пробы органов от здоровых животных.

3.5. Навески каждого органа (примерно по 2 г) отдельно растирают в ступке со стерильным порошком из стекла или песком и готовят 20%-ную суспензию на стерильном 0,85%-ном растворе хлористого натрия. Приготовленные суспензии дважды замораживают при -10...-12°C, оттаивают при 30...37°C и центрифугируют в рефрижераторной центрифуге при 2500...3000 об/мин в течение 10...15 мин. Надосадочную жидкость (экстракт) отсасывают, вносят 100 ЕД/см ³ пенициллина и 100 мг/см ³ стрептомицина (конечная концентрация), выдерживают 1 ч при (370,5)°C и готовят разведения 1:5 и 1:10 на стерильном 0,85%-ном растворе хлористого натрия. Для инокуляции культуры клеток используют как исходные (неразведенные) экстракты, так и разведенные.

3.6. Для получения сыворотки пробы крови выдерживают 1 ч в термостате при (370,5)°C или при комнатной температуре до образования сгустка. Сгусток обводят и пробы переносят в камеру бытового холодильника на 10...14 ч. Сыворотку отсасывают и используют для исследования.

4. Обнаружение антигена вируса КЧС реакцией прямой иммунофлуоресценции в мазках-отпечатках.

4.1. Содержимое ампулы ФИТЦ-иммуноглобулинов КЧС растворяют 0,5 см ³ дистиллированной воды и готовят рабочее разведение препарата на 0,01 М фосфатно-солевом буферном растворе - ФСБ (приготовление буферного раствора в Приложении, п. 1), указанное на ампуле.

4.2. Препараты мазков-отпечатков, приготовленные по п. 3.4, помещают на капли ФИТЦ-иммуноглобулинов КЧС, нанесенные в рабочем разведении на края предметных стекол, находящихся во влажной камере, и выдерживают при (370,5)°C в течение 30 мин.

4.3. Препараты снимают с предметных стекол, ополаскивают ФСБ и свободными концами спичек укрепляют в гнездах отмывочного штатива. Штатив помещают в цилиндрическую банку с раствором ФСБ, установленную на магнитную мешалку. Отмывание мазков-отпечатков от несвязавшихся или неспецифически связавшихся ФИТЦ-иммуноглобулинов ведут в течение 20 мин в темном месте, сменяя буферный раствор через 10 мин.

4.4. После отмывания препараты ополаскивают дистиллированной водой, подсушивают на воздухе и помещают на капли нефлуоресцирующего глицерина, разведенного раствором ФСБ в соотношении 9:1, нанесенные на прозрачные обезжиренные предметные стекла. Края препаратов заливают расплавленным парафином.

4.5. Люминесцентную микроскопию препаратов проводят в сине-фиолетовом свете при освещении их сверху, через объектив на микроскопах типа "ЛЮМАМ". Возбуждающий светофильтр ФС-1-2 или СС-15-2; запирающий ЖС-18 + ЖЗС-19. Препараты последовательно просматривают при увеличении 7x10, 7x40 ("сухая" микроскопия), затем при необходимости в иммерсионной системе при увеличении 7x90, используя неразведенный нефлуоресцирующий глицерин.

4.6. Специфическую флуоресценцию учитывают в лимфоидных клетках паренхимы селезенки, лимфатических узлов, легкого, расположенных группами, а также в эпителиальных клетках миндалин и клетках эпителия почечных канальцев, расположенных группами. Флуоресценцию обнаруживают в виде яркого, зеленого, диффузного свечения цитоплазмы антигенсодержащих клеток.

4.7. Учет и оценка результатов.

Проводят по условной четырехкрестовой шкале при увеличении 5x40: (++++, +++, ++, +) обнаружение во всех полях зрения множества групп клеток с яркой зеленой цитоплазматической флуоресценцией - результат положительный; () обнаружение в 5...10 полях зрения единичных групп, состоящих из 3...5 клеток с зеленой цитоплазматической флуоресценцией - результат сомнительный; отсутствие в мазках-отпечатках клеток с цитоплазматической флуоресценцией. Свечение клеток тускло-зеленое - результат отрицательный.

Отдельно расположенные клетки с флуоресценцией цитоплазмы или ядра не учитывают.

5. Выделение эпизоотического вируса КЧС из патологического материала инокуляцией перевиваемой культуры клеток почки поросенка (РК-15) и идентификация его реакцией прямой иммунофлуоресценции.

5.1. Подготовленные для исследования экстракты 20%-ных суспензий проб органов (п. 3.5) вносят по 0,5...0,6 см ³ в пробирки с культурой клеток РК-15, выращенной на стеклянных пластинках из покровных стекол (выращивание культуры клеток РК-15 в Приложении, п. 2), предварительно удалив ростовую среду. Для инокуляции суспензии каждого органа берут не менее 8 пробирок.

Пробирки помещают в термостат (370,5)°C на 2 ч. По истечении указанного времени инокулюм удаляют, монослой клеток однократно промывают средой Игла (МЕМ) без сыворотки. Затем в пробирки вносят по 2,0 см ³ питательной среды, содержащей 2% фетальной сыворотки крупного рогатого скота (поддерживающая среда), и инкубируют 24...96 ч. Через 24 ч после инокуляции поддерживающую среду меняют на свежую. В качестве контроля культуры клеток (отрицательные препараты) 8 пробирок оставляют интактными, предварительно сменив ростовую среду на поддерживающую.

5.2. Каждые 24 ч по 2 пластинки с культурой клеток, инокулированной исследуемым экстрактом суспензии каждого органа, извлекают из пробирок, вставляют в расщепы спичек с номерами, обсушивают на воздухе до полного удаления влаги и фиксируют холодным ацетоном в течение 10 мин (п. 3.4).

5.3. С препаратами, приготовленными по п. 5.2, ставят РПИФ и проводят люминесцентную микроскопию (пп. 4.2...4.5).

5.4. Оценка результатов.

5.4.1. При обнаружении специфической желто-зеленой или зеленой диффузной флуоресценции в цитоплазме клеток, расположенных группами ("флуоресцирующие микробляшки"), и отсутствии ее в отрицательных препаратах вирус КЧС считают выделенным и идентифицированным, а результат положительным.

5.4.2. В случае обнаружений тусклой, диффузной зеленой флуоресценции в клетках препаратов и при отсутствии "флуоресцирующих микробляшек" после 96-часовой инкубации проводят 2 дополнительных пассажа.

Для этого пробирки с инокулированной культурой 1-го пассажа, взятые через 96 ч культивирования (п. 5.1), дважды замораживают при -10...-12°C, оттаивают при 30...37°C и культуральную жидкость используют в качестве инокулюма для проведения 2-го пассажа (пп. 5.1...5.4). 3-й пассаж проводят аналогично.

В случае отсутствия "флуоресцирующих микробляшек" в третьем пассаже результат считают отрицательным.

6. Обнаружение специфических антител в сыворотках крови переболевших классической чумой свиней реакцией нейтрализации флуоресцирующих микробляшек и реакцией непрямой иммунофлуоресценции.

6.1. Постановка реакции нейтрализации флуоресцирующих микробляшек (РНФМ).

6.1.1. Исследуемые сыворотки и контрольные (специфическую и нормальную сыворотки, взятые из "Набора препаратов", перед постановкой реакции растворяют 0,5 см ³ дистиллированной воды), прогревают при 56°C 50 мин и разводят в пенициллиновых флаконах средой Игла (МЕМ) 1:8 (к 0,2 см ³ сыворотки добавляют 1,4 см ³ среды).

6.1.2. Во флаконы с разведенными сыворотками вносят равный объем 1000 ККИД ₅₀/см ³ вируса КЧС, шт. "Ши-Мынь", (титрование вируса и расчет рабочей дозы вируса в Приложении, п. 3), тщательно встряхивают и инкубируют в течение 60 мин в термостате при (375)°C.

6.1.3. После инкубации по 0,5 см ³ смеси вносят в пробирки с выращенной культурой клеток РК-15 на стеклянных пластинках, предварительно удалив ростовую среду. На каждую сыворотку берут по 4 пробирки. В качестве контроля токсичности разведенные сыворотки без вируса в объеме 0,5 см ³ вносят в 4 пробирки и 4 пробирки оставляют интактными, сменив ростовую среду на поддерживающую ("контроль культуры клеток").

6.1.4. Через 2 ч смесь из пробирок удаляют, монослой дважды промывают средой Игла (МЕМ) и заливают поддерживающую среду. Каждые 24 ч культуру клеток просматривают под малым увеличением светового микроскопа для контроля дегенерации клеток.

6.1.5. При отсутствии дегенеративных изменений клеток через 48 ч после внесения смесей пластинки извлекают из пробирок, готовят препараты (п. 5.2), ставят реакцию прямой иммунофлуоресценции (пп. 4.2...4.4) и проводят люминесцентную микроскопию (п. 4.5).

6.1.6. Оценка результатов.

Результаты начинают оценивать в том случае, если в препаратах, обработанных смесью "нормальная сыворотка - вирус", обнаруживают флуоресцирующие микробляшки при их отсутствии в препаратах, обработанных смесью "специфическая сыворотка - вирус".

При отсутствии флуоресцирующих микробляшек в препаратах, обработанных смесью "исследуемая сыворотка - вирус", результат считают положительным, в случае обнаружения - отрицательным.

6.2. Постановка реакции непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ).

6.2.1. Положительные и отрицательные тест-препараты (приготовление в Приложении, п. 4) помещают на капли исследуемых и контрольных (специфической и нормальной) сывороток, разведенных 1:20, нанесенные на края предметных стекол во влажной камере. На каждую сыворотку берут по 2 положительных и отрицательных тест-препарата. Обработку тест-препаратов сыворотками проводят при (370,5)°C в течение 30 мин.

6.2.2. Отмывание тест-препаратов от несвязавшихся антител проводят по п. 4.3.

6.2.3. Тест-препараты слегка подсушивают и помещают на капли раствора ФИТЦ-иммуноглобулинов антисвиных в рабочем разведении, нанесенные на края предметных стекол во влажной камере. Обработку тест-препаратов ФИТЦ-иммуноглобулинами антисвиными проводят при (370,5)°C в течение 30 мин.

6.2.4. Отмывание тест-препаратов от несвязавшихся ФИТЦ-иммуноглобулинов антисвиных, подготовку препаратов для люминесцентной микроскопии и микроскопию проводят по пп. 4.3-4.5.

6.2.5. Оценка результатов.

Проводят по интенсивности свечения антигенсодержащих клеток флуоресцирующих микробляшек положительных и отрицательных тест-препаратов, обработанных исследуемыми и контрольными сыворотками:

- яркое, желто-зеленое или изумрудное свечение вирусспецифических антигенов в зараженных клетках положительных тест-препаратов, обработанных исследуемыми и контрольными сыворотками;

- яркое, желто-зеленое или изумрудное свечение вирусспецифических антигенов в зараженных клетках положительных тест-препаратов, обработанных исследуемыми сыворотками, - результат положительный;

- тусклое зеленое свечение в клетках положительных тест-препаратов - результат отрицательный.

В положительных тест-препаратах, обработанных специфической сывороткой, наблюдают яркое желто-зеленое или изумрудное свечение вирусспецифических антигенов в зараженных клетках и отсутствие подобного свечения в специфических тест-препаратах, обработанных нормальной сывороткой; в отрицательных тест-препаратах, обработанных специфической и нормальной сыворотками, наблюдают тусклое зеленое свечение цитоплазмы клеток.

7. Выделение и идентификация вируса КЧС биопробой на животных.

7.1. Для постановки биопробы используют 4 здоровых поросят 2...4-месячного возраста, полученных от свиноматок, не вакцинированных против КЧС и не содержащих в сыворотке крови специфических антител к вирусу КЧС, и 2 поросят такого же возраста, иммунных против КЧС. Для иммунизации поросятам вводят по 1000 ИмД ₅₀/см ³ вирусвакцины ЛК ВНИИВВиМ против классической чумы свиней и через 10...15 сут после прививки используют для постановки биопробы.

7.2. Животных помещают в разные боксы по два подсвинка в каждый станок.

7.3. Двух неиммунных подсвинков содержат в отдельном помещении в качестве контрольных.

7.4. Содержание и кормление животных должны соответствовать зоотехническим нормам.

7.5. Непосредственно перед введением готовят экстракты 20%-ных суспензий лимфатических узлов и селезенки подозреваемых в заболевании классической чумой свиней (п. 3.5) и фильтруют через фильтр "Миллипор" (или его аналог) с величиной пор 0,22...0,48 мкм.

Равные объемы экстрактов органов смешивают, при этом общий объем смеси должен быть не менее 20 см ³.

7.6. Подготовленный материал вводят двум восприимчивым и двум иммунным животным внутримышечно, соблюдая правила асептики, с внутренней стороны бедра в количестве 3...5 см ³ каждому поросенку. За животными ведут клиническое наблюдение с ежедневным измерением температуры тела в течение 15 сут.

7.7. Оценка результатов.

7.7.1. При повышении температуры тела у невакцинированных поросят до 40,5...42°C, угнетении, отсутствии аппетита через 3...5 сут после введения исследуемого материала, на 5...10-е сутки после повышения температуры тела выше нормы проводят убой поросят и отбор проб органов (п. 3.1), их подготовку (п. 3.5) и исследование (пп. 5.1...5.4) с целью реизоляции и идентификации вируса КЧС. При выделении и идентификации вируса результат биопробы считают положительным.

7.7.2. При установлении заболевания и гибели невакцинированных и вакцинированных против КЧС поросят проводят дифференциальные лабораторные исследования на африканскую чуму свиней.

8. Постановка лабораторного диагноза.

Диагноз на классическую чуму свиней считают установленным в случае:

- выделения и идентификации вируса КЧС в одной из исследуемых проб органов;

- выявления специфических антител в сыворотках крови свиней, полученных из хозяйств, не применяющих вакцинацию против КЧС в течение последних 2 лет;

- получения положительных результатов биопробы на животных, реизоляции и идентификации вируса.

9. Срок исследований: вирусологических - 2...12 сут, серологических - 1...2 сут, биопроба - 12...24 сут.

Краткий словарь использованных ветеринарных терминов

Антигоны (анти + греч. genes - порождающий) - чужеродные для организма высокомолекулярные органические вещества коллоидной структуры (белки, белково-липидные и белково-полисахаридные комплексы), способные при поступлении (введении парентерально) вызывать синтез особых глобулинов-антител и вступать в специфическое взаимодействие с ними.

Антитела (анти + тело) - противотела - специфические белки (иммуноглобулины), образующиеся в организме под воздействием антигенов. Они накапливаются в сыворотке крови и тканях, вступают в специфическую связь с соответствующими антигенами и разрушают или обезвреживают их.

Биологическая проба (биопроба) - один из методов диагностики инфекционных болезней с помощью заражения патологическим материалом подопытных животных (куриных эмбрионов, культур клеток) и их исследования.

Вирион - полноценная внеклеточная вирусная частица.

Вирусовыделение - выделение возбудителей инфекции из организма больного животного или вирусоносителя.

Вирусоносительство - наличие возбудителя инфекции в определенных органах и тканях клинически здорового животного, не сопровождающееся иммунологической перестройкой организма.

Вирусы (лат. virus - яд) - облигатные внутриклеточные паразиты, отличающиеся от растительных и животных организмов малыми размерами, отсутствием клеточного строения и автономного метаболизма, наличием только одного типа нуклеиновой кислоты и дезъюнктивным способом размножения.

В. безоболочечные - вирусы, в структуре которых отсутствует липопротеидная оболочка.

В. оболочечные - вирусы, в структуре которых присутствует липопротеидная оболочка.

Вирусоскопия (вирусы + skopeo - смотрю, наблюдаю) - метод микроскопического изучения морфологии вирусов.

Гемагглютинация (греч. haima - кровь + agglutinatio - склеивание) - склеивание и выпадение в осадок эритроцитов под воздействием вирусов, бактерий, токсинов и др., способных адсорбироваться на поверхности эритроцитов, а также гемагглютининов.

Гемадсорбция (греч. haima - кровь + adsorbtio - поверхностное поглощение) - способность культур клеток, (зараженных вирусами, адсорбировать эритроциты различных животных, что объясняется включением в плазматическую мембрану синтезирующихся вирусных белков.

Диагностика (греч. diagnostikos - способный распознавать) - раздел клинической ветеринарии о методах исследования животных для распознавания их болезней и состояния организма с целью назначения необходимого лечения и профилактических мероприятий.

Диагностический набор - набор стандартных препаратов, используемых для постановки диагноза (антиген, специфическая и контрольная сыворотки и др.).

ДНК-зондов метод - метод генодиагностики, основанный на способности меченой одноцепочечной молекулы ДНК взаимодействовать с комплементарной ей молекулой нуклеиновой кислоты определенного вируса с образованием двухцепочечной структуры.

ДНК-содержащие вирусы - вирусы, имеющие один тип нуклеиновой кислоты - ДНК, у большинства она представлена двухцепочечной структурой, у некоторых - одной цепью.

Идентификация (лат. identifico - отождествляю) - признание тождественности, опознание-определение видовой (типовой) принадлежности микроорганизма на основании всестороннего изучения его свойств.

Иммуноферментный анализ - группа методов, позволяющих выявлять комплекс антиген - антитело с помощью субстрата, который расщепляется ферментом (пероксидазой, щелочной фосфатазой и др.) с появлением окрашивания.

Инактивация вирусов (лат. inactivus - неактивный) - уничтожение инфекционной активности вирусов путем повреждения генома физическим или химическим воздействием.

Индикация возбудителя инфекции (лат. indicatio - указание) - выявление и идентификация патогенных микроорганизмов в различных объектах.

Инокуляции возбудителя (лат. inoculatto - прививка) - введение возбудителя путем инъекции (искусственное заражение или внесение его в организм животного членистоногими переносчиками при укусах).

Консервирование вирусов (лат. conservare - сохранять) - общее название методов воздействия физическими и (или) химическими факторами на какие-либо объекты с целью длительного сохранения в них вирусов.

Контаминация (лат. contaminatio - смешение) - обсеменение поверхности тела животного, предметов ухода, почвы, воды, кормов, биопрепаратов и других объектов патогенными микроорганизмами.

Культивирование вирусов - выращивание вирусов в искусственных условиях.

Культуры клеток (клеточные культуры) - клетки многоклеточного организма, живущие вне его в искусственно созданных условиях Среды.

Куриный эмбрион - оплодотворенное куриное яйцо, выдержанное в инкубаторе.

Лабораторные животные - животные, используемые в лабораториях при проведении исследований (мыши, крысы, кролики, морские свинки, хомяки, голуби и др.).

Лиофилизация (греч. lyo - растворяю + phileo - люблю) - высушивание предварительно замороженного материала в глубоком вакууме.

Моноклональные антитела - строго специфические антитела, способные выявить минимальные различия в химическом составе и пространственной конфигурации молекул, являются продуктом отдельных клонов антителопродуцирующих клеток.

Парные сыворотки - сыворотки, взятые в самом начале заболевания и 2...3 недели спустя. Повышение титра антител в 4 раза и более считается основой положительной реакции.

Пассаж (фр. passage - переход) - последовательное заражение восприимчивых объектов (животные, куриные эмбрионы, культуры клеток) микроорганизмами.

Полимеразная цепная реакция (от англ. Polymerase Chain Reaction, ПЦР) - метод генодиагностики, основанный на многократном увеличении копий строго определенных фрагментов молекулы ДНК вируса при помощи фермента термостабильной ДНК-полимеразы.

Реакция гемагглютинации (РГА) - метод обнаружения и идентификации вирусов, основанный на способности многих вирусов, обладающих тканевым тропизмом, агглютинировать эритроциты определенных видов животных.

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ) (лот. fluorescens - светящийся) - серологическая реакция, основанная на взаимодействии антиген - антитело, при этом один из компонентов, участвующий в реакции, связан с флуоресцирующим красителем.

Реакция нейтрализации (РН) - метод идентификации вируса, основанный на феномене потери им инфекционности в результате взаимодействия со специфическими антителами.

Реакция связывания компемента (РСК) - метод серологического исследования, основанный на способности образующегося комплекса антиген - антитело связывать комплемент, что выявляется но отсутствию гемолиза при добавлении гемолизина и эритроцитов.

Реакция торможения гемагтлютинации (РТГА) - метод идентификации вируса или выявления противовирусных антител в сыворотке крови, основанный на феномене отсутствия агглютинации эритроцитов вирусом, в присутствии специфических к нему антител.

РНК-содержащие вирусы - вирусы, имеющие один тип нуклеиновой кислоты - РНК, у большинства она представлена одной цепью, у некоторых - двухцепочечной структурой.

Серовариант - самостоятельная группа внутри определенного вида и серогруппы (серотипа) микроорганизмов, обусловленная наличием антигенов, отличающихся от антигенов других микроорганизмов этого вида и серогруппы (серотипа), что выявляется с помощью серологических реакций.

Серогруппа (серотип) - самостоятельная группа внутри определенного вида микроорганизмов, обусловленная наличием антигенов, отличающихся от антигенов других микроорганизмов этого вида, что выявляется с помощью серологических реакций.

Серологические реакции - реакции, широко используемые при постановке диагноза инфекционных болезней, методы обнаружения антител и антигенов в крови и других тканях.

Сыворотка крови (лат. serum - сыворотка + sanguis - кровь) - составная часть крови, представляющая собой плазму, из которой удалены форменные элементы и фибрин в процессе свертывания крови.

Тельца включения - своеобразные морфологические образования, обнаруживаемые в цитоплазме или ядрах клеток определенных тканей при некоторых вирусных инфекциях и состоящие из скопления цирконов и вирусных белков.

Термолабильностъ (греч. thermos - теплый + лат. labilis - нестойкий) - неустойчивый к тепловому воздействию, изменяющийся при нагревании.

Термостабильность (греч. thermos - теплый + лат. stabilis - неизменный) - сохраняющий свои свойства при нагревонии.

Титр вируса - концентрация инфекционных единиц вируса в определенном объеме материала,

Цитопатогенное действие вирусов (ЦПД, цитопатический эффект) - специфическая морфологическая деструкция (разрушение) и функциональная патология зараженных вирусами клеток в культурах.

Штамм (нем. stamm - род, корень) - культура микроорганизмов одного вида с одинаковыми морфологическими и биологическими свойствами.

Элементарные тельца - см. Вирион (2, 3).

Библиографический список

1. Лабораторные исследования в ветеринарии. Вирусные, риккетсиозные и паразитарные болезни: справочник/под ред. Б.И. Антонова. - М.: Агропромиздат, 1987. - 240 с.

2. Бакулов, И.А. Эпизоотологический словарь-справочник/И.А. Бакулов, Г.Г. Юрков, В.А. Ведерников [и др.]. - М.; Россельхозиздат, 1986.

3. Нымм, Э.М. Словарь ветеринарных микробиологических и вирусологических терминов/Э.М. Нымм, К.А. Петерсон, Э.А. Аавер [и др.]. - М.: Росагропромиздат, 1989.