Протокол N 1/87-2003 г. заседания Постоянного комитета по контролю наркотиков от 16 января 2003 г. О Методических рекомендациях "Установление общности источника происхождения героина"

Протокол N 1/87-2003 г. заседания Постоянного комитета по контролю наркотиков от 16 января 2003 г.

Слушали 1: Утверждение методических рекомендаций:

- Установление общности источника происхождения героина;

- Экспертное исследование наркотических средств, получаемых из фенилпропаноламина.

Докладчик: Сорокин В.И.

На утверждение Постоянного комитета по контролю наркотиков представлены две методические рекомендации: "Установление общности источника происхождения Героина" и "Экспертное исследование наркотических средств, получаемых из фенилпропаноламина".

Эти рекомендации были одобрены методическим советом ЭКЦ МВД РФ, обсуждены с Гаевским А.В. (соавтором предлагаемых методик является Симонов Е.А.).

По методическим рекомендациям "Установление общности источника происхождения героина" проведено фактически более 200 экспертиз. Часто суды запрашивают ПККН: утверждены ли используемые экспертами методики Постоянным комитетом по контролю наркотиков.

При обсуждении специально огласили формулировку из постановления N 9 Пленума Верховного Суда РФ от 27 мая 1998 г., поручающую ПККН утверждать методики.

По данному вопросу выступили А.Г.Гофман, Э.А.Бабаян.

Постановили:

1. Утвердить методические рекомендации: Установление общности источника происхождения героина и Экспертное исследование наркотических средств, получаемых из фенилпропаноламина.

2. Представить Воронкову Ю.М. вышеуказанные методические рекомендации и поручить рабочей группе в составе Гаевского А.В., Сорокина В.И., Симонова Е.А. учесть замечания (если они будут) и представить для публикации в журнале "Новые лекарственные препараты".

Установление общности источника происхождения героина*

Методические рекомендации
(Одобрены и рекомендованы к опубликованию Методическим и Редакционно-издательским советами ГУ ЭКЦ МВД РФ)

Введение

В последние годы в незаконном обороте наркотиков все большую часть составляют синтетические наркотические средства, в частности героин, который производится в подпольных лабораториях.

При расследовании уголовных дел, связанных со сбытом наркотиков, важным является выявление всей организованной группы. При этом актуальной становится задача сравнительного исследования нескольких образцов героина с целью установления общности источника их происхождения или принадлежности исследуемых объектов к единой массе.

Предлагаемая работа представляет методику сравнительного исследования образцов героина по ряду качественных и количественных параметров, которая, позволяет объединять или дифференцировать объекты по источнику их происхождения. В качестве критериев сравнения рассмотрены: внешние признаки; содержание героина**, ацетилкодеина, 6-моноацетилморфина в объектах; наличие сопутствующих и фармакологически активных добавок; профиль микропримесей; качественный состав наполнителей.

Полное исследование предполагает использование комплекса методов: тонкослойной хроматографии, газовой и жидкостной хроматографии, хроматомасс-спектрометрии, инфракрасной спектроскопии.

Данные об объекте исследования

Героин (синонимы: диацетилморфин, диаморфин, ацетоморфин; другие названия: "гера", China White; смесь героина с кокаином называют Speed ball, а смесь героина с кокаином и ЛСД - Frisco speed ball) является наркотическим средством аналгезирующего действия.

Впервые этот наркотик был синтезирован в 1874 г., а его коммерческое производство было освоено в 1898 г. Сначала героин использовался как фармацевтический препарат в качестве заменителя морфина при лечении наркомании. Однако вскоре выяснилось, что героин является самым опасным из известных наркотиков.

Героин - основание (брутто-формула C_21H_23NO_5; M. м. = 369,4). Получаемые перекристаллизацией из этилацетата кристаллы имеют белый цвет, растворимы в хлороформе, бензоле, горячем этаноле, практически нерастворимы в воде. Героин быстро гидролизуется в щелочах и кислотах. Гидрохлорид героина растворим в воде, этаноле, хлороформе и практически нерастворим в эфире. Структурная формула героина представлена ниже:

Героин употребляют посредством внутривенных инъекций, вдыханием через нос и курением. Наркотическое действие длится 4 - 6 ч; эффективная доза составляет 5 мг. Изымаемые из незаконного оборота образцы, содержащие героин, называют "уличным героином".

Героин вызывает ярко выраженную эйфорию и быстрое привыкание. Большую опасность при употреблении "уличного героина" представляют наличие в нем различных ядовитых добавок (например, стрихнина), а также непостоянство содержания активного компонента и, следовательно, возможность передозировки.

Источником получения героина является опий - свернувшийся млечный сок снотворного мака (Papaver Somniferum L.)***. Основную массу опия составляют алкалоиды, которые представляют собой органические азотосодержащие основания, которые содержатся в виде солей и частично в виде свободных оснований (папаверин, наркотин и другие слабоосновные компоненты). Кроме того, в его состав входят сахара, протеины, липиды, стерины, жирные кислоты, пектин, воск, каучук, красящие вещества, меконовая кислота, меконин, меконозин и опионин. В натуральном опие из мака снотворного содержание алкалоидов практически никогда не достигает 50 - 60%. Примерный алкалоидный состав опия и зрелых коробочек мака приведен в табл.1.

Таблица 1

Алкалоидный состав опия и коробочек мака

---------------------------------------------------------------------------------------------------

   Наименование и тип  |                       Содержание, % на сухую массу

       алкалоида       |

                       |---------------------------------------------------------------------------

                       |                  Опий                   |        Зрелые коробочки

---------------------------------------------------------------------------------------------------

                                     Алкалоиды типа морфинана

 Морфин                |3,0 - 20,0                               |0,04 - 1.48

 Кодеин                |0,2 - 6,0                                |0,006 - 0,30

 Тебаин                |0,2 - 3,5                                |0,003 - 0,15

                       |                                         |

                                 Алкалоиды типа бензилизохинолина

 Папаверин             |0,5 - 3,2                                |До 0,08

 Лауданин              |0,010                                    |7,0

 Лауданидин            |0,015                                    |0,12 - 0,053

 Кодамин               |0,002                                    |-

 Ретикулин             |0,025                                    |От следов до 0,20

                       |                                         |

                                 Алкалоиды типа фталидиизохинолина

 Наркотин              |0,75 - 12,3                              |От следов до 0,06

 Наркотолин            |От следов до 56% содержания морфина      |От следов до 0,094

 Нарцеин               |0,1 - 0,7                                |От следов до 0,038

                       |                                         |

Всего в маке снотворном найдено около 50 алкалоидов, относящихся к 12 структурным типам. Кроме указанных в таблице, также наиболее часто встречаются следующие алкалоиды: лауданозин (метиловый эфир лауданина), соединения типа протопина (протопин, криптопин, альфа-аллокриптопин), неопин, оксидиморфин, алкалоиды типа папаверрубина. В маке найдены также алкалоиды типа апорфина протоберберина, тетрагидропротоберберина, бензофенантридина.

На качественный и количественный состав опия оказывают влияние такие факторы, как географический район произрастания мака, состав почвы, продолжительность светового дня, фаза вегетации растения и др.

Перед синтезом героина опий подвергают экстракции с целью извлечения морфина. Полученный морфин ацетилируют (как правило, уксусным ангидридом), в результате чего получается героин.

Изымаемый из незаконного оборота "уличный героин" в зависимости от способа производства и региона произрастания сырья может содержать от 1 - 2 до 95 - 98% диацетилморфина. Кроме того, обычным является также присутствие в нем продуктов ацетилирования основных и минорных компонентов опия, а также веществ, образовавшихся в процессе выделения действующего начала из растительного сырья: изомеров моноацетилморфина, ацетилкодеина и т.д.

На состав получаемого наркотического средства существенное влияние оказывает способ его синтеза: продолжительность и интенсивность нагревания; степень обработки сырья кислотами, щелочами и прочими агрессивными веществами; глубина очистки конечного продукта, условия его сушки и т.п. Веществами, присутствие которых в конечном продукте может определяться способом получения, являются ацетилированные норморфин и норкодеин, меконин, гидрокотарнин, оксидиморфин, а также частично или полностью ацетилированные сахара.

Способ производства определяет такие характеристики объекта, как цвет и запах, соотношение в нем химических форм героина (соль и основание), тип самой соли (гидрохлорид, сульфат и др.). Сложившиеся на протяжении длительного времени в основных регионах - производителях опия и героина технологии (Юго-Восточная Азия, Юго-Западная Азия, Южная Америка, Мексика), а также особенности способов производства позволяют проводить не только дифференциацию по источнику происхождения, но иногда и первичную оценку вероятного пути транспортировки наркотика от места изготовления до места его изъятия.

"Уличный героин", как правило, содержит и специально вносимые добавки Это могут быть фармакологически активные вещества (фенобарбитал, кофеин, дифенгидрамин (димедрол), фенацетин анальгин, новокаин, лидокаин, аспирин, антипирин, амидопирин, диазепам, анестезин, никотинамид, фенолфталеин, стрихнин, хинин, аскорбиновая, салициловая, бензойная, фталевая и борная кислоты); наркотические средства (метаквалон; оксикодон, кокаин - до 10 - 16 наименований одновременно), наполнители (глюкоза, лактоза, фруктоза, сахароза, маннитол, крахмал, мука, хлорид натрия, карбонат кальция, сульфат бария, аморфная окись кремния и др.).

Кроме того, в составе образца можно обнаружить вещества попавшие в него из окружающей среды (например, различные пластификаторы, пестициды и пр.). С недавних пор в экспертных объектах встречаются такие добавки, как хлорохин и ферменты (например, гиалуронидаза).

Внешний вид героина сильно зависит от региона в котором он был произведен.

Героин из Юго-Восточной Азии почти всегда представляет собой порошок белого цвета (China White) Этот объект в неизмельченном виде напоминает стиральный порошок, в котором действующее начало может встречаться в виде соли или основания, чаще - в виде гидрохлорида с содержанием 80% и более основного компонента. Такой героин редко содержит наркотин и почти не содержит папаверина.

Образцы героина из Юго-Западной Азии более разнообразны:

- одну из разновидностей за соответствующие цвет и консистенцию называют "коричневый сахар". Обычно он встречается в виде свободного основания и содержит 40 - 60% диацетилморфина, но иногда бывает в виде гидрохлорида, может содержать 20 - 30% наркотина, 2 - 6% папаверина, 5 - 9% ацетилкодеина и следовые количества других алкалоидов;

- другая разновидность героина - от рыже-коричневого до светло-коричневого цвета. Этот героин встречается в виде основания, гидрохлорида, цитрата и тартрата. Содержание диацетилморфина достигает 60 - 85%; остальные компоненты: наркотин - 2 - 20%, папаверин до 4% ацетилкодеин - 4 - 7%;

- третья разновидность - белесый порошок, содержащий героин в форме гидрохлорида; в нем - до 90% основного компонента и 2 - 5% ацетилкодеина.

Мексиканский героин бывает двух типов:

- "черный деготь" (встречается, как правило, в США) имеет коричневый или черно-коричневый цвет, часто обладает запахом уксуса, содержит нехарактерные для опия примеси дегтя. Концентрация основного компонента 30 - 60%, ацетилкодеина - 1 - 6%, папаверина 0,5 - 3% наркотина - 1 - 4%;

- "мексиканский коричневый" имеет темно-коричневый цвет; степень его очистки меньше; содержание в нем остальных алкалоидов приблизительно такое же как и в "черном дегте".

Южно-Американский героин встречается довольно редко и почти всегда отличается высоким качеством очистки (более 90%); представляет собой белый порошок, содержащий менее 3,5% ацетилкодеина; концентрация 3-моноацетилморфина в нем иногда больше, чем концентрация 6-моноацетилморфина.

Различия свойств образцов героина в зависимости от региона производства представлены в табл.2.

Таблица 2

Свойства образцов героина в зависимости от региона производства

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

   Регион   |  Название   |   Цвет    |Консистен- | Химическая  |  Массовое   |Характерные добавки,|  Примечание

            |             |           |    ция    |форма (соль, | содержание  |  примеси, % мас.   |

            |             |           |           | основание)  | героина, %  |                    |

------------+-------------+-----------+-----------+-------------+-------------+--------------------+---------------

 Юго-Восточ-|China White  |Белый      |Порошок    |Гидрохлорид  |80 и более   |Редко содержит      |Напоминает

 ная Азия   |             |           |           |             |             |наркотин и почти не |стиральный

            |             |           |           |             |             |содержит папаверина |порошок

------------+-------------+-----------+-----------+-------------+-------------+--------------------+---------------

 Юго-Запад- |"Коричневый  |Коричневый |То же      |Основание,   |40 - 60      |Наркотин - 20 - 30, |-

 ная Азия   |сахар"       |           |           |реже         |             |папаверин - 2 - 6,  |

            |             |           |           |гидрохлорид  |             |ацетилкодеин - 5 - 9|

            |-------------+-----------+-----------+-------------+-------------+--------------------+---------------

            |Нет          |От         |То же      |Основание,   |60 - 85      |Папаверин - до 4,   |-

            |             |рыже-корич-|           |гидрохлорид, |             |наркотин - 2 - 20,  |

            |             |невого до  |           |цитрат,      |             |ацетилкодеин - 4 - 7|

            |             |светло-ко- |           |тартрат      |             |                    |

            |             |ричневого  |           |             |             |                    |

            |-------------+-----------+-----------+-------------+-------------+--------------------+---------------

            |Нет          |Белесый    |То же      |Гидрохлорид  |До 90        |Ацетилкодеин - 2 - 5|-

------------+-------------+-----------+-----------+-------------+-------------+--------------------+---------------

 Мексика    |"Черный      |Коричневый |Смоло-обра-|Нет сведений |30 - 60      |Ацетилкодеин - 1 -  |Имеет запах

            |деготь"      |или        |зная масса |             |             |6,                  |уксуса,

            |             |черно-Кори-|           |             |             |папаверин - 0,5 - 3,|содержит

            |             |чневый     |           |             |             |наркотин - 1 - 4    |добавку дегтя

            |-------------+-----------+-----------+-------------+-------------+--------------------+---------------

            |"Мексиканский|Темно-кори-|Нет данных |То же        |30 - 60      |Ацетилкодеин - 1 -  |

            |коричневый"  |чневый     |           |             |             |6,                  |

            |             |           |           |             |             |папаверин - 0,5 - 3,|

            |             |           |           |             |             |наркотин - 1 - 4    |

------------+-------------+-----------+-----------+-------------+-------------+--------------------+---------------

 Южная      |Нет          |Белый      |Порошок    |То же        |Более 90     |Ацетилкодеин - менее|Иногда

 Америка    |             |           |           |             |             |3,5                 |содержание

            |             |           |           |             |             |                    |3-моноацетил-

            |             |           |           |             |             |                    |морфина

            |             |           |           |             |             |                    |больше, чем

            |             |           |           |             |             |                    |содержание

            |             |           |           |             |             |                    |6-моноацетил-

            |             |           |           |             |             |                    |морфина

            |             |           |           |             |             |                    |

Таким образом, в зависимости от исходного сырья и способа изготовления разные партии "уличного героина" различаются:

- по внешним признакам (цвету, запаху, консистенции);

- по содержанию и форме основного активного компонента (соль или основание);

- по составу основных примесей, характерных для сырья (так называемых сопутствующих примесей): морфина, кодеина, папаверина, наркотина, ацетилкодеина, моноацетилморфина и др.;

- по содержанию и соотношению так называемых минорных компонентов (химических микропримесей, определяемых из кислого экстракта и обусловленных технологией изготовления героина и наличием содержащихся в исходном сырье микропримесей) - профилю химических микропримесей;

- по составу фармакологически активных добавок;

- по составу наполнителей.

В отдельных образцах могут присутствовать примеси, попадающие в конечный продукт из реактивов и растворителей.

Типичные хроматограммы образцов героина представлены на рис.1, 2. Для анализа использовали газовый хроматограф фирмы "Хьюлетт-Паккард" (США) модели 5890 серии II с масс-селективным детектором модели 5972.

Условия проведения анализа:

колонка кварцевая капиллярная Ultra-1 (25 м х 0,2 мм), толщина пленки фазы - 0,33 мкм;

температура инжектора - 280°С;

температура интерфейса детектора - 310°С;

начальная и конечная температуры термостата колонки - 50 и 300°С соответственно;

температура колонки меняется со скоростью 10 - 15°С/мин;

газ-носитель - гелий;

объем вводимой пробы - 1 мкл.

Пробу вводили в режиме с делением потока 1:40. Масс-селективный детектор работал в режиме электронного удара (70 эВ). Обнаружение наркотических и психотропных средств в экстрактах проводили в режиме регистрации по полному ионному току; полученные масс-спектры сравнивали с библиотечными (библиотеки NBS-75, NIST-98 и Wiley-275).

Перед анализом пробы исследуемых веществ тщательно перетирали в агатовой ступке и гомогенизировали встряхиванием. Затем навески веществ массой 5 мг заливали 1 мл хлороформа каждую, добавляли каплю триэтиламина и после встряхивания пробы (в течение 10 мин) проводили исследование.

В связи с вышеизложенным исследование образцов героина на предмет их однородности должно состоять из следующих этапов:

1. Предварительный осмотр и сравнение по внешним признакам (цвету, запаху, консистенции).

2. Выявление наличия героина, ацетилкодеина, 6-моноацетилморфина и фармакологически активных добавок.

3. Сравнение образцов по количественному содержанию героина, ацетилкодеина и 6-моноацетилморфина.

4. Сравнительное исследование состава микропримесей.

5. Сравнение образцов по качественному составу наполнителей.

6. Формулирование выводов.

Методика исследования
(для проведения исследования необходимо не менее 0,1 г образца!)

Предварительное исследование

На этой стадии проводят внешний осмотр (как невооруженным глазом, так и с помощью средств оптической микроскопии), в ходе которого фиксируют состояние, особенности упаковки и массу веществ, их цвет, запах, консистенцию, гомогенность и наличие механических примесей. Отбор представительных проб для дальнейшего исследования проводят в соответствии с методикой "Отбор проб при исследовании наркотических средств", утвержденной Постоянным комитетом по контролю наркотиков (протокол N 26 от 16 ноября 1993 г.).

Далее изучают растворимость образцов вещества в хлороформе, метаноле, диэтиловом эфире и дистиллированной воде с целью установления возможного наличия в его составе инертных добавок (наполнителей) и определения, в какой форме (соль или основание) присутствуют исследуемые вещества. Однако следует иметь в виду, что установление формы героина в исследуемом объекте (соль или основание) бывает затруднено в случае исследования смесевых композиций или когда химическое основание смешано с солью другого соединения (например, героин в смеси с гидрохлоридом новокаина).

Выявление наличия диацетилморфина, ацетилкодеина, 6-моноацетилморфина и фармакологически активных добавок

Героин, ацетилкодеин, 6-моноацетилморфин и фармакологически активные добавки выявляют методами тонкослойной хроматографии, хроматомасс-спектрометрии, ИК-спектроскопии, жидкостной и газовой хроматографии согласно методикам, принятым в экпертно-криминалистических подразделениях.

Определение содержания героина и относительного содержания ацетилкодеина и 6-моноацетилморфина

Количественное определение героина и сопутствующих примесей методом газовой хроматографии

К пробам вещества сравниваемых объектов массой 2 - 10 мг добавляют по 1 мл раствора метилстеарата (или докозана) в хлороформе с концентрацией 1 мг/мл и по капле триэтиламина, после чего полученные экстракты исследуют методом газовой хроматографии (от каждого объекта отбирают по три пробы).

Анализ вещества объектов проводят на газовом хроматографе.

Условия проведения анализа:

капиллярная кварцевая колонка длиной 12 - 25 м и диаметром 0,2 мм с нанесенной метилсиликоновой фазой (типа OV-101);

температура инжектора - 280°С;

температура детектора - 290°С;

температура колонки меняется от 200 до 280°С со скоростью 10°С/мин;

время выдержки при конечной температуре - 10 мин;

газ-носитель - азот (гелий);

детектор пламенно-ионизационный;

объем вводимой пробы - 1 мкл.

Пробу вводят в режиме с делением потока 1:40. Каждое определение производят не менее трех раз.

В веществах сравниваемых объектов определяют среднее содержание героина (% мас.) и рассчитывают доверительный интервал по результатам параллельных анализов. Содержание ацетилкодеина и 6-моноацетилморфина рассчитывают относительно героина по площадям их пиков, принимая площадь пика героина за 100%.

Содержание того или иного компонента (героина, 6-моноацетилморфина или ацетилкодеина) в пробах вещества сравниваемых объектов считают одинаковым, если перекрываются доверительные интервалы средних значений полученных величин.

Качественное и количественное исследование методом жидкостной хроматографии

Условия проведения анализа:

микроколонка размером 80 х 2 мм, заполненная обращеннофазным сорбентом Separon SGX С-18 с размером частиц 5 мкм (ТОО "Медикант", г.Орел) или любым аналогичным сорбентом с привитой фазой С-18;

подвижная фаза - фосфатный буфер: ацетонитрил (80:20);

скорость элюирования - 120 мкл/мин;

одновременное детектирование спектрофотометра на длинах волн 210, 220, 230, 250, 280 нм;

объем вводимой пробы - 10 мкл.

Для приготовления фосфатного буфера в 1 л дистиллированной воды растворяют 3,0 г КОН, 12,0 г ортофосфорной кислоты и 3,0 г диэтиламина. Приготовленный буфер доводят до рН = 3, добавляя водный раствор щелочи или кислоты. Буфер смешивают с ацетонитрилом в нужном соотношении, фильтруют и в течение 20 мин дегазируют в ультразвуковой ванне или продувают гелием (второй способ более эффективен и дает лучший результат).

Перед проведением анализа экспертных образцов героина готовят и исследуют модельные смеси. В качестве модельных смесей могут быть рекомендованы следующие:

1. Раствор героина и его сопутствующих примесей (морфина, кодеина, 6-моноацетилморфина, ацетилкодеина, папаверина, наркотина) в подвижной фазе (фосфатный буфер : ацетонитрил - 80:20). Концентрации компонентов в указанной модельной смеси должны иметь сопоставимые величины - от 50 до 100 мкг/мл. Для указанных условий хроматографирования удается получить достаточно хорошее разделение компонентов смеси, позволяющее проводить их идентификацию по времени удерживания и УФ-спектрам. Определенную трудность представляет идентификация ацетилкодеина, имеющего значение времени удерживания, близкое со временем удерживания героина, и образующего на хроматограмме пик, частично перекрывающийся пиком героина (рис.3).

2. Раствор героина, его сопутствующих примесей и добавок фармакологически активных веществ: например, аскорбиновой кислоты, анальгина, прокаина, кофеина и фенобарбитала в подвижной фазе. Концентрация героина и добавок фармакологически активных веществ в модельной смеси должна составлять 500 - 600 мкг/мл; концентрация естественных сопутствующих примесей (морфина, кодеина, 6-моноацетилморфина, ацетилкодеина, папаверина, наркотина) - в 6 - 8 раз меньше. Для указанных условий хроматографирования добавки данных фармакологически активных веществ не затрудняют идентификацию и количественное определение героина и ацетилкодеина, однако они имеют значения времени удерживания, близкие со временем удерживания некоторых из сопутствующих примесей героина, и образуют с ними частично или полностью перекрывающиеся пики (рис.4).

Сравнительный анализ экспертных образцов героина по наркотически активным компонентам проводят следующим образом.

Навески исследуемых веществ массой по 5 - 10 мг помещают в герметично укупориваемые склянки, заливают точно отмеренным объемом подвижной фазы с таким расчетом, чтобы количество вещества в единице объема подвижной фазы не превышало 500 - 1000 мкг/мл, и проводят экстракцию в ультразвуковой ванне в течение 30 мин.

Полученные экстракты фильтруют через мембранный фильтр с пористостью не более 0,5 мкм, дегазируют в ультразвуковой ванне или продувают гелием не менее 10 мин и хроматографируют. Общее время пробоподготовки с момента начала экстракции вещества до начала хроматографирования полученного экстракта не должно превышать 40 - 50 мин для исключения возможного гидролиза героина.

Для выявления героина и его основных естественных сопутствующих примесей проводят сравнение времени удерживания компонентов вещества объектов со временем удерживания компонентов модельных смесей, сравнение УФ-спектров, а также применяют метод "добавок".

Концентрацию героина в экстрактах определяют методом абсолютной градуировки. По результатам трех параллельных анализов для каждого сравниваемого образца рассчитывают среднее значение содержания героина (% мас.) и доверительные интервалы полученных величин.

Как и при газохроматографическом анализе, содержание ацетилкодеина и 6-моноацетилморфина рассчитывают относительно героина по площадям их пиков, принимая при этом площади пика героина за 100%.

Содержание соответствующих компонентов (героина, 6-моноацетилморфина или ацетилкодеина) в пробах сравниваемых объектов считают одинаковым, если перекрываются доверительные интервалы средних значений полученных величин.

Сравнительное исследование содержания микропримесей

Для сравнения объектов по профилю микропримесей применяют метод "отпечатков пальцев". При этом сравниваемые вещества считают однородными по составу микропримесей, если количество пиков на их хроматограммах, время выхода соответствующих пиков и их взаимное соотношение практически совпадают.

Навески образцов массой 50 - 150 мг заливают 4 мл 0,5% серной кислоты, 5 мл хлороформа (метиленхлорида, толуола) и нагревают на водяной бане при 40°С в течение 20 мин, периодически перемешивая смесь. После охлаждения и отстаивания экстракта отбирают слой органического растворителя.

Экстрагирование проводят дважды, после чего экстракты объединяют, упаривают досуха, к сухому остатку добавляют 0,2 мл хлороформа (метиленхлорида, толуола). Для сравнения проб, поступавших на исследование в разное время, целесообразно добавлять к сухому остатку вместо чистых растворителей 0,2 мл раствора тетраконтана в хлороформе (метиленхлориде, толуоле). Это позволит учитывать связанный с изменением условий хроматографического анализа сдвиг времени удерживания компонентов, который может появляться из-за старения хроматографической колонки, изменения давления на входе в колонку и пр.

Анализ объектов проводят на газовом хроматографе.

Условия проведения анализа:

капиллярная кварцевая колонка длиной 12 - 25 м и диаметром 0,2 мм с нанесенной метилсиликоновой фазой (типа OV-101);

температура инжектора - 280°С;

температура детектора - 310°С;

температура колонки меняется от 50 до 300°С со скоростью 10°С/мин;

время выдержки при конечной температуре - 15 мин;

газ-носитель - азот (гелий);

детектор пламенно-ионизационный;

объем вводимой пробы - 1 мкл.

Пробу вводят в хроматограф в режиме с делением потока 1:40.

Типичная хроматограмма "кислых" экстрактов "уличного героина" и состав микропримесей представлены на рис.5 и в табл.3.

На рис.6 - 8 приведены хроматограммы экстрактов трех образцов героина, два из которых имеют одинаковый компонентный состав.

Таблица 3

Важнейшие компоненты "кислого" экстракта героина

-------------------------------------------------------------------------

   Время  |  CAS-индекс   |      Название компонентов       |  Площадь

  выхода  |               |                                 |  пика, %

----------+---------------+---------------------------------+------------

 4,091    |3563-49-3      |Пировалерон                      |0,00223

----------+---------------+---------------------------------+------------

 5,352    |57-44-3        |Барбитал                         |0,701

----------+---------------+---------------------------------+------------

 5,860    |96-88-8        |Мепивакаин                       |0,00484

----------+---------------+---------------------------------+------------

 6,293    |125-40-6       |Бутабарбитал                     |0,00408

----------+---------------+---------------------------------+------------

 6,699    |76-74-4        |Пентобарбитал                    |0,00776

----------+---------------+---------------------------------+------------

 6,707    |569-31-3       |Меконин                          |2,08

----------+---------------+---------------------------------+------------

 7,090    |550-10-7       |Гидрокотарнин                    |0,00303

----------+---------------+---------------------------------+------------

 7,198    |58-8-2         |Кофеин                           |0,0318

----------+---------------+---------------------------------+------------

 7,831    |50-06-6        |Фенобарбитал                     |0,0837

----------+---------------+---------------------------------+------------

 10,057   |481-81-2       |Тебаол                           |0,175

----------+---------------+---------------------------------+------------

 10,170   |6703-27-1      |Ацетилкодеин                     |0,0103

----------+---------------+---------------------------------+------------

 10,242   |-              |Ацетилтебаол                     |0,0837

----------+---------------+---------------------------------+------------

 10,624   |561-27-3       |Героин                           |0,0158

----------+---------------+---------------------------------+------------

 11,420   |58-74-2        |Папаверин                        |4,59

----------+---------------+---------------------------------+------------

 11,840   |-              |Диацетилноркодеин                |0,0401

----------+---------------+---------------------------------+------------

 12,120   |126-14-7       |Сахароза октаацетат              |4,75

----------+---------------+---------------------------------+------------

 12,286   |-              |3,6-диметокси-4(2[N-ацетил-N-ме- |0,0606

          |               |тамино]этил-5-ацетоксифенантрен  |

----------+---------------+---------------------------------+------------

 12,533   |-              |Норморфин триацетат              |0,867

----------+---------------+---------------------------------+------------

 13,655   |128-62-1       |Носкапин                         |1,59

          |               |                                 |

Определение наполнителей

Для определения наполнителей в героине используют метод ИК-спектроскопии.

Пробоподготовку проводят с целью удаления из образца наркотически активных компонентов и ацетильных производных, а также добавок фармакологически активных веществ. Для этого к навеске образца массой 5 - 10 мг добавляют 0,3 - 0,5 мл метанола, который после перемешивания и отстаивания декантируют. Такую процедуру повторяют 3 - 4 раза. Не растворившийся в метаноле остаток высушивают в термостате при температуре около 50°С в течение 30 мин и исследуют с помощью оптического микроскопа.

Если остаток представляет собой смесь кристаллов или аморфных частиц разных типов, то с помощью препаровальной иглы его разделяют на фракции, которые исследуют по отдельности. Для этого частицы перетирают в агатовой ступке с бромидом калия, прессуют в таблетки и регистрируют ИК-спектры в диапазоне 4000 - 400 см(-1) с разрешением 4 см(-1). По полученным ИК-спектрам (используя библиотечный или "ручной" поиск) определяют основные наполнители, содержащиеся в объектах исследования. В случае наличия в распоряжении эксперта ИК-микроскопа отпадает необходимость механического разделения смеси перед исследованием, так как сканирование проводится с разных участков отобранной пробы.

Определение наполнителей методом ИК-спектроскопии лучше проводить до перетирания образцов в ступке либо отбирать для этого отдельную пробу неперетертого вещества.

На рис.9 - 10 приведены спектр глюкозы (декстрозы) и сахарозы - наиболее часто встречающиеся в героине наполнители.

Методом ИК-спектроскопии выявляют также некоторые фармакологически активные добавки. Например, в последнее время в качестве добавки в образцах "уличного героина" все чаще встречается хлорохин.

Формулирование выводов

При сравнительном анализе образцов героина возможны следующие выводы.

1. При совпадении всех следующих параметров: качественного состава основных компонентов сравниваемых образцов (включая фармакологически активные добавки и наполнители); абсолютного содержания героина; относительного содержания 6-моноацетилморфина и ацетилкодеина; качественного состава микропримесей - формулируется вывод: "Сравниваемые вещества могли ранее составлять единую массу".

2. При совпадении качественного состава микропримесей сравниваемых образцов и относительного содержания 6-моноацетилморфина и ацетилкодеина, но при различных абсолютном содержании героина, качественном или количественном составе фармакологически активных добавок и/или различном составе наполнителей формулируется вывод: "Сравниваемые вещества могли иметь общий источник происхождения по сырью и технологии изготовления основного наркотически активного компонента" (при этом фармакологически активные добавки не учитываются при исследовании качественного состава микропримесей).

3. При различном качественном составе и/или количественном содержании основных компонентов сравниваемых образцов либо при различии в составе микропримесей, фармакологически активных добавок и/или наполнителей формулируется вывод: "Предоставленные на исследование вещества не составляли ранее единую массу".

___________________

* Разработчики методических рекомендаций: В.И.Сорокин, О.С.Орлова, Г.В.Любецкий, М.А.Макаров, М.А.Дроздов, Е.А.Симонов.

** В настоящей методике во всех случаях, когда речь идет об определениии индивидуально главного действующего вещества, имеется в виду диацетилморфин.

*** Следует уточнить, что источником получения героина может быть не только опий, но и экстракт маковой соломы. В настоящее время мировое производство концентрата маковой соломы для медицинских целей (минуя стадию получения опия) в несколько раз превышает производство опия-сырца.