Письмо Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 7 июня 2011 г. N 01/6970-1-32 "Об организации лабораторных исследований на ОКИ, вызванной Escherichiacoli О104:Н4"

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека в дополнение к письму Роспотребнадзора от 03.06.2011 N 01/6833-1-32 "О направлении справочных материалов по лабораторной диагностике энтерогеморрагической группы эшерихий" и к письму Роспотребнадзора от 06.06.2011 N 01/6870-1-32 "О направлении рекомендаций по лабораторной диагностике энтерогеморрагической группы эшерихий" направляет для использования в работе "Временные рекомендации по организации лабораторных исследований на энтерогеморрагические эшерихии (ЕНЕС) в лаборатории субъектов Российской Федерации".

Руководитель

Г.Г. Онищенко

Организация лабораторных исследований при диагностике заболеваний, вызванных энтерогеморрагическими эшерихиями (ЕНЕС) у людей, и детекции EHEC в пищевых продуктах в лабораториях субъектов Российской Федерации

Временные методические рекомендации

1.Область применения

1.1 В настоящих методических рекомендациях определены порядок сбора, упаковки, хранения, транспортирования и выполнения лабораторных исследований биологического материала от больных (и умерших) пациентов при лабораторной диагностики острых кишечных заболеваний, вызванных энтерогеморрагическими эшерихиями (ЕНЕС) и детекции данных возбудителей в пищевых продуктах.

1.2 Методические рекомендации предназначены для специалистов лечебно-профилактическими органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы и другими организациями, независимо от организационно-правовой формы.

2. Общие требования

Все работы по сбору, транспортированию и подготовке проб клинического и секционного материала осуществляют в соответствии с требованиями СП 1.3.2322-08 "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней", СП 1.3.2518-09 "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней. Дополнения и изменения 1 к СП 1.3.2322-08", СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности", методических указаний МУ 1.3.2569 - 09 "Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности".

3. Координация деятельности учреждений, осуществляющих диагностику острых кишечных заболеваний, вызванных энтерогеморрагическими эшерихиями (ЕНЕС) E.coli O104:H4

3.1. Показания к проведению исследований.

Исследования клинического материала проводятся в случае:

- Наличия у пациента гемолитико-уремического синдрома после (на фоне) перенесенного диарейного заболевания.

- Наличия у пациента гемолитической анемии после (на фоне) перенесенного диарейного заболевания.

- Наличия у пациента любого (по тяжести и синдромальному диагнозу) диарейного заболевания при наличии эпидемиологических данных о возможной связи заболевания с EHEC.

Исследования образцов продуктов питания проводятся по эпидемиологическим показаниям в соответствии с действующими нормативно-методическими документами.

3.1.1. Для выявления EHEC в клиническом (аутопсийном) материале и пищевых продуктах применяются диагностические тест-системы, разрешенные к применению на территории Российской Федерации в установленном порядке. Методы детекции EHEC должны базироваться на детекции специфических для данной группы факторов вирулентности или их генов (шигоподобные токсины 1 и 2 типов). Серотипирование штаммов E coli и их биохимическая характеристика не может обеспечить гарантированное выявление всех типов EHEC. Оптимальным алгоритмом лабораторной диагностики является первичное исследование клинического материала тестами на основе ПЦР с последующим выделением чистой культуры EHEC и подтверждением ее принадлежности к данной группе с применением иммунохроматографических экспресс-тестов или ПЦР. Тестирование пищевых продуктов с применением ПЦР тест-систем без предварительного культурального обогащения их образцов не допускается.

3.1.2 Забор материала от пациентов (или умерших) с подозрением на инфекционное заболевание, вызванное ЕНЕС, проводят в лечебно-профилактических учреждениях (ЛПУ). В максимально ранние сроки, до назначения антибактериальной терапии. В качестве клинического материала для исследований используют образцы фекалий. Для постмортальной диагностики используют содержимое кишечника, аутоптаты желудка, тонкого и толстого кишечника, почек. Сбор материала производят в пробирки с транспортной средой, предоставляемой (или рекомендуемой) фирмой-производителем тест-систем.

3.1.3 Первичное исследование проб материала от больных (или умерших) проводится в лабораториях лечебно-профилактических учреждений и других организаций, независимо от организационно-правовой формы, имеющих санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с возбудителями III-IV группы патогенности. Выявление в клиническом материале факторов вирулентности EHEC или их генов должно учитываться в комплексной этиологической диагностике заболевания.

3.1.4. Выделенные культуры EHEC, а при невозможности их получения в ЛПУ - образцы клинического материала отправляются в лаборатории Центров гигиены и эпидемиологии в субъектах Российской Федерации. Доставка материала производится транспортом лечебно-профилактических учреждений по согласованию с управлением Роспотребнадзора субъекта Российской Федерации с учётом оптимальной транспортной схемы

3.1.5. Лаборатории Центров гигиены и эпидемиологии в субъектах Российской Федерации обобщают эпидемиологические данные по случаям EHEC-эшерихиозов для выявления групповых случаев заболеваний. Проводят подтверждающее тестирование культур на их принадлежность к EHEC. Дают серологическую характеристику изолятов с сыворотками О157, О26, О55, О111 (при наличии сывороток - также к серогруппам О113, О117, О145). При необходимости проведения оценки идентичности изолятов - направляют культуры EHEC в референс - центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней ФГУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора, референс - центр по мониторингу за возбудителями острых кишечных инфекций (ФГУН "Центральный научно - исследовательский институт эпидемиологии" Роспотребнадзора) и референс - центр по мониторингу за возбудителями природно-очаговых инфекционных болезней ФГУЗ "Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока" Роспотребнадзора) (далее референс-центры) с учётом оптимальной транспортной схемы (Приложение N 1).

3.1.6. Референс-центры осуществляют субвидовое типирование выделенных изолятов EHEC в соответствии с поставленными эпидемиологическими задачами с применением унифицированных протоколов анализа набора продуктов рестрикции тотальной ДНК в пульсирующем электрическом поле - пульс-электрофорез (PFGE - Pulsed Field Gel Electrophoresis). Референс - центр по мониторингу за возбудителями острых кишечных инфекций (ФГУН "Центральный научно - исследовательский институт эпидемиологии" Роспотребнадзора) осуществляет ведение единой общероссийской базы данных по циркулирующим в РФ штаммам EHEC и их депонирование в Национальном центре верификации диагностической деятельности на базе ФГУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора.

3.1.7. Результаты исследований , проводимых на каждом уровне передают в Федеральную службу по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, в управление Роспотребнадзора по субъекту Российской Федерации, в учреждение, направившее материал, в день получения результата.

4 Правила сбора клинического (секционного) материала

4.1 Сбор клинического материала и его упаковку осуществляет медицинский работник лечебно-профилактического учреждения, обученный требованиям и правилам биологической безопасности при работе и сборе материала, подозрительного на зараженность энтерогеморрагическими эшерихиями (ЕНЕС) E.coli O104:H4. Забор производят в стерильные одноразовые флаконы, пробирки, контейнеры, стерильными инструментами. Все виды работ проводят с соблюдением противоэпидемического режима, согласно СП 1.3.2322-08 "Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней"

4.2 Упаковка, маркирование, условия хранения и транспортирования материала для проведения лабораторной диагностики ВГСА должны соответствовать требованиям СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности" и настоящих методических рекомендаций.

4.3. Процедуры по забору клинического материала обученный медицинский персонал осуществляет в резиновых перчатках. После процедуры отбора материала перчатки обрабатываются растворами дезинфицирующих средств, руки после снятия перчаток обрабатываются антисептиками в соответствии с СП 1.3.2322-08 "Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней".

От одного больного должно забираться не менее трех видов клинического материала. Обязательно следует забирать пробы фекалий, промывные воды из желудка. Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную емкость.

Для постмортальной диагностики используют аутоптаты желудка, тонкого и толстого кишечника, печени, селезенки, красного костного мозга.

4.4 Сбор материала производят в пробирки с транспортной средой, предоставляемой (или рекомендуемой) фирмой-производителем тест-систем.

4.5 Отправку материала в лабораторию осуществляют в транспортной таре со стабилизирующей средой.

5. Упаковка и транспортирование образцов

5.1 Все материалы, доставляемые в лабораторию, должны быть герметично упакованы в соответствии с СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности":

1) в транспортную емкость (плотно закрывающиеся пластмассовые пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками); плотно закрытый верхний конец транспортной емкости вместе с крышкой герметизируют различными пластификаторами (парафин, парафильм и др.); емкость маркируют;

2) в полиэтиленовый пакет подходящего размера с ватой (или другим гигроскопичным материалом) в количестве достаточном для адсорбции всего образца в случае его утечки; полиэтиленовый пакет следует герметично заклеить или запаять;

5.1.1 Образцы от одного пациента могут быть упакованы в один полиэтиленовый пакет. Не допускается упаковывание образцов материалов от разных людей в один и тот же пакет.

5.1.2 В полиэтиленовый пакет вкладывают бланк направления с указанием: наименование направляющего учреждения, ФИО больного, возраст, место жительства, предварительный диагноз, эпидемиологический анамнез, вид материала, дата и время взятия материала.

5.2 Герметично закрытые полиэтиленовые пакеты помещают в термоизолирующий плотно закрывающийся контейнер (термос), приспособленный для транспортирования биологических материалов.

5.2.1 В термоконтейнеры и термосы помещают охлаждающие элементы или пакеты со льдом. К наружной стенке термоконтейнера или термоса прикрепляют этикетку с указанием вида материала, условий транспортирования, названия пункта назначения.

5.3 Транспортирование проб клинического материала в референс-лаборатории, лаборатории центров гигиены и эпидемиологии в субъектах Российской Федерации и лаборатории учреждений противочумной системы Роспотребнадзора осуществляется нарочным(и), информированным о правилах доставки материала в соответствии с п.3.4. СП 1.2.036-95.

Приложение 1

Перечень
лабораторий Центров гигиены и эпидемиологии в субъектах Российской Федерации и лабораторий учреждений противочумной системы Роспотребнадзора, проводящих первичный скрининг и подтверждающее тестирование на энтерогеморрагическими эшерихиями (ЕНЕС) E.coli O104:H4

Первичный скрининг	Подтверждающее тестирование
ФГУЗ "ЦГиЭ" в г. Санкт-Петербурге	референс - центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней ФГУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора, референс - лаборатория по мониторингу за возбудителями острых кишечных инфекций (ФГУН "Центральный научно - исследовательский институт эпидемиологии" Роспотребнадзора) с учётом оптимальной транспортной схемы
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Карелия
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Коми
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Архангельской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Вологодской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Калининградской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Ленинградской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Мурманской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Новгородской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Псковской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Воронежской области
ФГУЗ "Федеральный центр гигиены и эпидемиологии"
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Белгородской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Брянской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Владимирской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Ивановской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Калужской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Костромской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Курской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Липецкой области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Московской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Орловской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Рязанской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Смоленской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Тверской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Тульской области
ФГУЗ "Противочумный центр Роспотребнадзора"
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Ярославской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Нижегородской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Самарской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Башкортостан
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Марий-Эл
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Мордовия
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Татарстан
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Удмуртия
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Чувашской Республике
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Кировской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Оренбургской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Пензенской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Пермском крае
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Саратовской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Ульяновской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Ставропольском крае
Ставропольский противочумный НИИ
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Ростовской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Краснодарском крае
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Калмыкия
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Кабардино-Балкарской Республике
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Дагестан
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Северная Осетия
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Астраханской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Волгоградской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Адыгея
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Карачаево-Черкесской Республике
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Свердловской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Курганской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Тюменской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Челябинской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Омской области	Референс - центр по мониторингу за возбудителями природно-очаговых инфекционных болезней ФГУЗ "Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока" Роспотребнадзора)
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Красноярском крае
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Алтайском крае
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Бурятия
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Тыва
ФГУЗ "ЦгиЭ" в Республике Алтай
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Иркутской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Кемеровской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Новосибирской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Томской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Читинской области
Хабаровская противочумная станция
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Хабаровском крае
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Приморском крае
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Амурской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Магаданской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Республике Саха (Якутия)
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Камчатской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Сахалинской области
ФГУЗ "ЦГиЭ" в Еврейской автономной области