Государственный стандарт СССР ГОСТ 23231-90 "Колбасы и продукты мясные вареные. Метод определения остаточной активности кислой фосфатазы" (утв. постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продуктов и стандартам от 27 июня 1990 г. N 1935) (утратил силу)

Государственный стандарт СССР ГОСТ 23231-90
"Колбасы и продукты мясные вареные. Метод определения остаточной активности кислой фосфатазы"
(утв. постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продуктов и стандартам от 27 июня 1990 г. N 1935)

Sausages and cooked meat products. Method for determination of residual activity of acid phosphatase

Срок действия - с 1 июля 1991 г.
до 1 июля 1996 г.

Взамен ГОСТ 23231-78

ГАРАНТ:

Приказом Росстандарта от 12 октября 2016 г. N 1383-ст взамен настоящего ГОСТа с 1 января 2018 г. введен в действие ГОСТ 23231-2016 для добровольного применения в РФ

Ограничение срока действия снято Протоколом N 5-94 МГС от 17.05.94 (ИУС N 11-94)

Информационные данные

1. Разработан и внесен Государственным агропромышленным комитетом СССР

Разработчики

В.И. Ивашов, д-р техн. наук; И.А. Шумкова, канд. техн. наук; В.3. Кракова (руководитель темы); Г.И. Мосина

2. Утвержден и введен в действие постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продукции и стандартам от 27.06.90 N 1935

3. Срок первой проверки - 1994 г.

Периодичность проверки - 5 лет

4. Взамен ГОСТ 23231-78

5. Ссылочные нормативно-технические документы

Обозначение НТД, на который дана ссылка	Номер раздела, пункта
ГОСТ 1770-74	2
ГОСТ 3118-77	2
ГОСТ 3652-69	2
ГОСТ 4025-83	2
ГОСТ 4109-79	2
ГОСТ 4328-77	2
ГОСТ 5789-78	2
ГОСТ 6552-80	2
ГОСТ 6709-72	2
ГОСТ 9792-73	1.1
ГОСТ 10931-74	2
ГОСТ 12026-76	2
ГОСТ 12083-78	2
ГОСТ 18289-78	2
ГОСТ 20292-74	2
ГOСT 20469-81	2
ГОСТ 22280-76	2
ГОСТ 24104-88	2
ГОСТ 25336-82	2
ТУ 6-09-1926-77	2
ТУ 6-09-3752-74	2
ТУ 6-09-5299-38	2
ТУ 6-09-5303-86	2

Настоящий стандарт распространяется на вареные колбасы, сосиски, сардельки и вареные продукты из свинины и устанавливает метод определения остаточной активности кислой фосфатазы.

Метод основан на фотометрическом определении в продукте интенсивности развивающейся окраски, зависящей от остаточной активности кислой фосфатазы, выраженной массовой долей фенола.

Метод применяют в случае сомнения в проваренности продукта.

1. Отбор и подготовка проб

1.1. Отбор проб - по ГОСТ 9792.

1.2. Точечные пробы продуктов из свинины должны быть освобождены от жировой ткани и шкурки, а точечные пробы вареных колбас, сосисок и сарделек - от оболочки и шпика.

1.3. Для составления объединенной пробы точечные пробы соединяют, дважды измельчают на бытовой или электрической мясорубке и тщательно перемешивают.

Объединенную пробу помещают в стеклянную или пластмассовую банку вместимостью 200 - 400 , заполнив ее полностью, и закрывают крышкой.

1.4. Объединенную пробу, подготовленную для испытания, хранят при температуре (42)°С до окончания испытаний.

2. Аппаратура, материалы и реактивы

Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025 или электромясорубка бытовая по ГОСТ 20469 с отверстиями решетки диаметром от 3 до 4 мм.

Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 2-го класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г.

Потенциометр с погрешностью измерения 0,06 рН.

Калориметр фотоэлектрический лабораторный с устройством для отсчитывания значения оптической плотности и светофильтром с = (60010) нм по ГОСТ 12083 или спектрофотометр для измерения в видимой области спектра.

Ультратермостат или водяная баня, обеспечивающие регулирование температуры от 30 до 99°С.

Воронки B-36-80 ХС, В-56-80 ХС по ГОСТ 25336.

Колбы мерные 2-500-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770, вымеренные на наливной объем.

Пипетки 4-2-1, 4-2-2, 7-2-5, 7-2-10 по ГОСТ 20292.

Холодильник ХШ-1-400-29/32 ХС по ГОСТ 25336.

Колба К-1-2000-29/32 ТХС по ГОСТ 25336.

Пробирки П1-16-150 ХС, П1-21-200 ХС, П1-25-200 ХС по ГОСТ 25336.

Палочки стеклянные.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Груша резиновая.

Кислота лимонная по ГОСТ 3652, х.ч.

Натрий лимоннокислый 5-водный по ГОСТ 22280, ч.д.а.

Фенилфосфорной кислоты динатриевая соль по ТУ 6-09-3752, свежеприготовленный раствор 2 .

Кислота трихлоруксусная кристаллическая по ТУ 6-09-1926, растворы 50 и 200 .

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х.ч., гранулированная, раствор с (NaOH) = 0,5 .

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Фенол по ТУ 6-09-5303, ч.д.а.

Толуол по ГОСТ 5789, ч.д.а.

Натрий вольфрамовокислый 2-водный по ГОСТ 18289, х.ч.

Натрий молибденовокислый по ГОСТ 10931, ч.д.а.

Литий сернокислый 1-водный по ТУ 6-09-5299, х.ч.

Кислота ортофосфорная по ГОСТ 6552, х.ч., плотностью 1,72 .

Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч., плотностью 1,19 .

Бром по ГОСТ 4109, х.ч.

Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками, а также реактивов с качественным показателями не ниже указанных в настоящем стандарте.

3. Подготовка к испытанию

3.1. Приготовление цитратного буфера

В мерной колбе вместимостью 1000  в дистиллированной воде растворяют 13,88 г лимоннокислого натрия и 0,588 г лимонной кислоты, доливают водой до метки и перемешивают, рН буфера 6,5. Затем добавляют 1  толуола. Раствор хранят в холодильнике при температуре (41)°С не более 12 сут.

3.2. Приготовление реактива Фолина

100 г вольфрамовокислого натрия и 25 г молибденовокислого натрия растворяют в 700  дистиллированной воды. К раствору добавляют 50  ортофосфорной кислоты и 100  соляной кислоты. Смесь осторожно кипятят в течение 10 ч в колбе вместимостью 2000  с обратным холодильником, после чего охлаждают и добавляют 150 г сернокислого лития, 50  воды и несколько капель брома. Остаток брома отгоняют кипячением смеси без холодильника в вытяжном шкафу, охлаждают, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 , доводят объем дистиллированной водой до метки, перемешивают и фильтруют. Реактив должен быть золотисто-желтого цвета без зеленого оттенка. Реактив хранят в склянке с притертой пробкой в темном месте не более 6 мес.

3.3. Приготовление стандартного раствора

2 г фенола (результат взвешивания записывают до третьего десятичного знака) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1000 , доводят объем до метки и перемешивают. Отбирают пипеткой с помощью резиновой груши 5  раствора в колбу вместимостью 500 , добавляют около 300 дистиллированной воды, вносят 25 г кристаллической трихлоруксусной кислоты. После растворения содержимое колбы доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. Полученный раствор содержит 20 мкг фенола в 1 .

3.4. Построение градуировочного графика

В пробирки вносят следующие объемы стандартного раствора: 0; 0,25; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 , что соответствует массе фенола: 0; 5; 10; 20; 30; 40 мкг. Доводят объем в каждой пробирке до 2,5 , добавляя соответствующий объем 50 раствора трихлоруксусной кислоты (2,5; 2,25; 2,0; 1,5; 1,0; 0,5 ) и перемешивая. В каждую пробирку добавляют 5  0,5 раствора гидроокиси натрия, перемешивают, выдерживают 10 мин и добавляют 1,5 реактива Фолина, разведенного дистиллированной водой в соотношении 1:2 и перемешивают.

Через 30 мин измеряют оптическую плотность растворов по отношению к 50 раствору трихлоруксусной кислоты на фотоэлектрическом калориметре с применением светофильтра с = () нм в кювете с расстоянием между рабочими гранями 10 мм или на спектрофотометре при длине волны 600 нм в кювете аналогичного размера.

По полученным средним данным по трем стандартным растворам на миллиметровой бумаге размером 20X20 см строят градуировочный график. На оси абсцисс откладывают значение массовой доли фенола (микрограмм в 9  окрашенного раствора); на оси ординат - значение соответствующей оптической плотности (D). Градуировочный график должен проходить через начало координат. Пример градуировочного графика приведен в приложении.

4. Проведение испытания

4.1. От объединенной пробы, подготовленной к испытанию, берут 2 навески массой по 1 г ( результат взвешивания записывают до третьего десятичного знака) и переносят в две пробирки (одна - контрольная, другая - опытная).

В пробирки вносят по 10  цитратного буфера рН 6,5, тщательно перемешивают стеклянной палочкой и настаивают в течение 20 мин при комнатной температуре, периодически перемешивая.

В контрольную пробирку добавляют 5  200 раствора трихлоруксусной кислоты, перемешивают и добавляют 5  2 раствора динатриевой соли фенилфосфорной кислоты, выдерживают 10 мин и фильтруют.

В опытную пробирку добавляют 5  2 раствора динатриевой соли фенилфосфорной кислоты и помещают в ультратермостат при температуре (391)°С на 1 ч, затем добавляют 5  200 раствора трихлоруксусной кислоты, выдерживают 10 мин и фильтруют.

Для проведения цветной реакции из контрольной и опытной пробирок отбирают по 2,5  безбелкового фильтрата. Цветную реакцию проводят по п. 3.4.

Массовую долю фенола определяют по градуировочному графику.

5. Обработка результатов

5.1. Массовую долю фенола (X) в процентах вычисляют по формуле

,

где - масса фенола в опытной пробирке, найденная по градуировочному графику, мкг;

- масса фенола в контрольной пробирке, найденная по градуировочному графику, мкг;

- масса анализируемой пробы, г;

- коэффициент пересчета в граммы;

20 - разведение, ;

2,5 - объем фильтрата, отобранный для цветной реакции, .

Вычисление проводят до четвертого десятичного знака.

5.2. За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, допускаемое расхождение между которыми при Р = 0,95 не должно превышать 10% по отношению к среднему арифметическому.

Окончательный результат определяют до третьего десятичного знака.

5.3. Допускаемое расхождение между результатами испытаний, проведенных в двух разных лабораториях, при Р = 0,95 не должно превышать 25% по отношению к среднему арифметическому значению.

5.4. Значение среднего квадратического отклонения случайной составляющей погрешности измерений массовой доли фенола одной и той же пробы в разных лабораториях при допускаемых методикой изменениях влияющих факторов составляет 0,0002 .