Государственный стандарт Союза ССР ГОСТ 29113-91 "Комбикорма, белково-витаминные добавки, карбамидный концентрат. Методы определения массовой доли карбамида" (утв. постановлением Комитета стандартизации и метрологии СССР от 30 сентября 1991 г. N 1576) (утратил силу)

Государственный стандарт Союза ССР ГОСТ 29113-91
"Комбикорма, белково-витаминные добавки, карбамидный концентрат. Методы определения массовой доли карбамида"
(утв. постановлением Комитета стандартизации и метрологии СССР от 30 сентября 1991 г. N 1576)

Mixed fodders, feeds protein and vitamin supplements, carbamide concentrate. Methods of determining carbamide mass portion

Дата введения 1 января 1993 г.

Взамен ОСТ 8-22-81

ГАРАНТ:

Приказом Росстандарта от 7 ноября 2016 г. N 1604-ст взамен настоящего ГОСТа с 1 января 2018 г. введен в действие ГОСТ 29113-2016 "Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения массовой доли карбамида" для добровольного применения в РФ

Настоящий стандарт распространяется на комбикорма, белково-витаминные добавки, содержащие карбамид, карбамидный концентрат и устанавливает методы определения массовой доли карбамида.

1. Отбор проб

Отбор проб - по ГОСТ 13496.0.

ГАРАНТ:

Приказом Росстандарта от 23 ноября 2011 г. N 587-ст применение ГОСТ 13496.0-80 на территории РФ прекращено с 1 января 2013 г. в связи с утверждением и введением в действие ГОСТ Р ИСО 6497-2011 "Корма для животных. Отбор проб"

2. Ускоренный колориметрический метод определения массовой доли карбамида

Сущность метода заключается в экстракции карбамида водой, образовании окрашенных растворов при взаимодействии с диметиламинобензальдегидом и последующем колориметрировании.

2.1. Аппаратура, материалы, реактивы

Фотоэлектроколориметр марки КФК-2, КФ0, ФЭК-56 или других марок со спектральным диапазоном работы от 315 до 980 нм.

Весы лабораторные 2-го и 3-го классов точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.

Весы лабораторные 4-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г по ГОСТ 24104.

Аппарат для встряхивания жидкости в сосудах типа АВУ-1 или других аналогичных марок.

Насос электровакуумный с разряжением 13 Па или насос Комовского.

Мельница лабораторная марок ЛЗM, МРП-2 или других аналогичных марок.

Сито штампованное с отверстиями диаметром 1 мм.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Воронки Бюхнера по ГОСТ 9147.

Воронки стеклянные по ГОСТ 25336.

Чашка фарфоровая по ГОСТ 9147.

Колбы мерные вместимостью 25; 50; 100; 500 исполнений 1, 2; 2-го класса точности по ГОСТ 1770.

Ступка фарфоровая с пестиком по ГОСТ 9147.

Пипетки вместимостью 1; 5; 10; 20; 25 исполнений 1, 2, 4, 5, 6, 7; 1-го и 2-го классов точности по ГОСТ 20292.

Пробирки стеклянные с притертыми пробками вместимостью 10 и 25 по ГОСТ 25336.

Стаканы стеклянные вместимостью 50; 100 по ГОСТ 25336.

Цилиндры стеклянные вместимостью 50; 100; 500 по ГОСТ 1770, 2-го класса точности.

Склянки с притертыми пробками.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Бумага лакмусовая.

Ножницы.

Кальций хлористый технический по ГОСТ 450 или кальций хлористый обезвоженный прокаленный.

Калий железистосинеродистый 3-водный (желтая кровяная соль) по ГОСТ 4207, х.ч. или ч.д.а. раствор с массовой долей 10,6%.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч. или ч.д.а., плотностью 1,19 .

Кислота уксусная по ГОСТ 61, х.ч. или ч.д.а. раствор с массовой долей 80%.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х.ч, или ч.д.а. раствор с массовой долей 20%.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Уголь активный древесный по ГОСТ 6217.

Цинк уксусный 2-водный по ГОСТ 5823.

Карбамид по ГОСТ 2081.

N-диметиламинобензальдегид.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Примечание. Допускается использовать аппаратуру, мерную посуду или другие средства измерений, имеющие такие же или более высокие метрологические характеристики.

2.2. Подготовка к испытанию

2.2.1. Приготовление раствора карбамида концентрацией 1

Навеску карбамида массой 0,1 г переносят в мерную колбу вместимостью 100 , добавляют 50 дистиллированной воды, растворяют навеску и доводят объем в колбе водой до метки. Раствор готовят в день анализа.

2.2.2. Приготовление раствора уксуснокислого цинка с массовой долей 21,9%

Навеску реактива массой 21,9 г переносят в мерную колбу вместимостью 100 , добавляют 50 дистиллированной воды и 3 уксусной кислоты, доводят объем в колбе водой до метки.

2.2.3. Приготовление раствора соляной кислоты в соотношении 1:5

К пяти частям дистиллированной воды добавляют одну часть соляной кислоты, раствор тщательно перемешивают.

2.2.4. Приготовление раствора гидроокиси натрия с массовой долей 20%

Навеску реактива массой 20 г растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды в фарфоровой чашке, переносят содержимое в мерную колбу вместимостью 100 и доводят объем раствора в колбе водой до метки.

2.2.5. Приготовление раствора калия железистосинеродистого с массовой долей 10,6%

Навеску реактива массой 10,6 г переносят в мерную колбу вместимостью 100 , растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора водой до метки, тщательно перемешивают.

2.2.6. Очистка n-диметиламинобензальдегида

Навеску реактива массой 5 г переносят в химический стакан вместимостью 100 и растворяют в 50 соляной кислоты, разбавленной в соотношении 1:5. К раствору приливают по каплям раствор гидроокиси натрия до появления белого густого осадка. Затем содержимое стакана переносят в воронку Бюхнера с вложенным в нее бумажным фильтром, фильтруют под вакуумом и промывают водой до нейтральной реакции (pH проверяют лакмусовой бумагой). Осадок с фильтром высушивают в эксикаторе, заправленном хлористым кальцием, до постоянной массы. Высушенный реактив помещают в темную склянку с притертой пробкой и хранят в холодильнике.

2.2.7. Приготовление раствора n-диметиламинобензальдегида

500 мг очищенного реактива помещают в мерную колбу вместимостью 25 , приливают 10 этилового спирта и 2,5 концентрированной соляной кислоты, доводят объем в колбе этиловым спиртом до метки и перемешивают. Раствор готовят в день анализа.

2.2.8. Приготовление исследуемой пробы для анализа

Пробу испытуемого продукта для анализа массой около 60 г отбирают методом квартования из тщательно перемешанной средней пробы и измельчают на лабораторной мельнице до получения полного прохода через сито с отверстиями диаметром 1 мм. При невозможности получения полного прохода, в случае измельчения пленчатых культур, пленки, оставшиеся на сите, измельчают ножницами или в ступке и прибавляют к просеянной части продукта. Пробу тщательно перемешивают и методом квартования выделяют навеску массой 25 г.

2.2.9. Построение градуировочного графика

В 7 стеклянных пробирок отмеривают пипеткой соответственно порядковому номеру 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 раствора карбамида. В пробирки, в порядке установленной очередности, добавляют пипеткой 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3 дистиллированной воды. В результате концентрация карбамида в пробирках будет соответственно равна 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7 . В каждую пробирку приливают по 1 раствора n-диметиламинобензальдегида и перемешивают. Через 2 мин измеряют оптическую плотность окрашенных в зеленоватый цвет растворов на фотоэлектроколориметре с синим светофильтром N 3 (длина волны 400 нм) в кюветах с рабочей гранью 20 мм. Раствором сравнения служит контрольная проба, приготовленная без карбамида (10 дистиллированной воды и 1 раствора n-диметиламинобензальдегида).

На основании известных концентраций карбамида и соответствующих им полученных значений оптической плотности строят градуировочный график, откладывая по оси абсцисс значения концентрации карбамида в растворах (), по оси ординат - соответствующие им значения оптической плотности. Каждая точка градуировочного графика должна представлять собой среднее арифметическое результатов двух параллельных измерений. Градуировочный график уточняют при работе с вновь приготовленными реактивами.

2.3. Проведение испытания

Навеску измельченного продукта массой 25 г помещают в мерную колбу вместимостью 500 , приливают 300 дистиллированной воды и встряхивают на качалке в течение 5 мин (вручную 4 мин). Затем доводят в колбе объем водой до метки и перемешивают. Получают первоначальный объем разведенного продукта. Через 5 мин экстракт продукта (над осадком) в количестве: 20 - при анализе комбикормов, 5 - при анализе БВД или 2,5 - при анализе карбамидного концентрата, переносят в мерную колбу вместимостью 50 . Экстракт разводят, добавляя по 0,5 растворов железистосинеродистого калия и уксуснокислого цинка. Доводят объем в колбе дистиллированной водой до метки и перемешивают. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный складчатый фильтр, на который предварительно помещают 1 г измельченного в ступке активного угля. Первые порции фильтрата отбрасывают. Затем к 10 фильтрата прибавляют 1 раствора n-диметиламинобензальдегида, перемешивают и через 2 мин колориметрируют, как указано в п. 2.2.9. Испытание проводят в двух параллельных определениях.

2.4. Обработка результатов

2.4.1. Массовую долю карбамида (X) в процентах вычисляют по формуле

,

где с - концентрация карбамида, найденная по графику, ;

V - первоначальный объем разведенного продукта, ;

- объем взятого на анализ экстракта после разведения, ;

100 - коэффициент перевода массовой доли карбамида в проценты;

m - масса навески, г;

- объем взятого на анализ экстракта до разведения, ;

1000 - коэффициент перевода миллиграммов в граммы.

2.4.2. С целью упрощения вычисления массовой доли карбамида расчет проводят по формулам с вводом коэффициентов, учитывающих соответствующие количественные выражения:

а) в комбикорме

X (%) = или X (г/кг) = ;

б) в БВД

Х (%) = или X (г/кг) = ;

в) в карбамидном концентрате

Х (%)= или X (г/кг) = .

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, которые вычисляют до второго десятичного знака и округляют до первого десятичного знака.

Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений () и между результатами, полученными в разных условиях. () при доверительной вероятности Р=0,95 для БВД и карбамидного концентрата не должны превышать соответственно 0,4 абс. % и 0,8 абс. %, а для комбикормов - 0,1 и 0,2 абс. %.

3. Определение массовой доли карбамида уреазным методом

Метод основан на экстракции карбамида водой, гидролизе его ферментом уреазой, содержащимся в семенах сои, и последующем титровании соляной кислотой.

3.1. Аппаратура, материалы, реактивы

Весы лабораторные 3-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.

Аппарат для встряхивания жидкости в сосудах типа АВУ-1 или других аналогичных марок.

Мельница лабораторная марок ЛЗM, МРП-2 или других аналогичных марок.

Сито штампованное с отверстиями диаметром 1 мм.

Бюретки мерные вместимостью 2; 5; 10 исполнений 1, 2, 3, 6; 1-го и 2-го классов точности по ГОСТ 20292.

Колбы мерные вместимостью 50; 500; 1000 исполнений 1, 2; 2-го класса точности по ГОСТ 1770.

Колбы конические вместимостью 50 или 100 по ГОСТ 25336.

Пипетки вместимостью 10 исполнений 1, 2, 4, 5, 6, 7; 1-го класса точности по ГОСТ 20292.

Капельница стеклянная лабораторная по ГОСТ 25336.

Цилиндр вместимостью 50 и 500 по ГОСТ 1770.

Стекла предметные.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч. или ч.д.а., плотностью 1,19 .

Соя по ГОСТ 17109.

Метиловый красный, спиртовой раствор с массовой долей 0,2%.

Метиленовый голубой, спиртовой раствор с массовой долей 0,1%.

Примечание. Допускается использовать аппаратуру, мерную посуду или другие средства измерений, имеющие такие же или более высокие метрологические характеристики.

3.2. Подготовка к испытанию

3.2.1. Подготовка испытуемой пробы для анализа - по п. 2.2.8.

3.2.2. Приготовление растворов соляной кислоты концентрацией с(НСl)=0,1 и с(НСl)=0,5

Используют стандарт-титр соляной кислоты в соответствии с правилами, приложенными к комплекту, или отмеряют 8,2 и 41 соляной кислоты плотностью 1,19 для приготовления растворов концентрацией с(НСl)=0,1 и с(НСl)=0,5 соответственно. Кислоту переносят в мерную колбу вместимостью 1000 , добавляют дистиллированную воду и доводят объем в колбе водой до метки, перемешивая. Работу проводят в вытяжном шкафу.

3.2.3. Приготовление индикатора

Смешивают равные количества спиртового раствора метилового красного и спиртового раствора метиленового голубого.

3.2.4. Приготовление семян сои для анализа

Для анализа выделяется навеска семян сои массой около 100 г. Семена сои должны быть тщательно очищены от сорной и масличной примесей по ГОСТ 10854. Из очищенной навески методом квартования выделяют навеску массой 25 г, измельчают на лабораторной мельнице и просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Остаток на сите вновь измельчают до полного прохода через указанное сито. Оставшиеся частицы пленок отбрасывают. Просеянную часть перемешивают, переносят на стеклянную пластинку и распределяют ровным слоем. Затем слегка придавливают другим стеклом такого же размера так, чтобы слой продукта получился не толще 3-4 мм. Удалив верхнее стекло, отбирают не менее чем из десяти разных мест слоя навеску массой 1 г.

3.3. Проведение испытания

Пробу продукта подготавливают для испытания как указано в п. 2.2.8. Навеску измельченного продукта массой 25 г помещают в мерную колбу вместимостью 500 , приливают 300 дистиллированной воды, закрывают пробкой и колбу с содержимым помещают на качалку, встряхивают в течение 5 мин (вручную - 4 мин). Затем доводят объем в колбе водой до метки, перемешивают. В мерную колбу вместимостью 50 вносят 1 г свежеизмельченных семян сои. Сюда же приливают 10 экстракта карбамидного концентрата, БВД или 20 экстракта комбикорма, отобранного осторожно из надосадочной жидкости, смесь встряхивают, доводят объем водой до метки, закрывают пробкой. В течение 2 ч содержимое колбы выдерживают при комнатной температуре. Первые 1,5 ч водные растворы перемешивают через каждые 30 мин. Затем пипеткой отбирают 10 экстракта (над осадком), переносят в коническую колбу вместимостью 50-100 , прибавляют 5 капель индикатора и титруют экстракт комбикорма и белково-витаминных добавок раствором соляной кислоты концентрацией с(НСl)=0,1 , а экстракт карбамидного концентрата раствором соляной кислоты концентрацией с(НСl)=0,5 до перехода зеленой окраски раствора в розово-фиолетовую.

3.4. Обработка результатов

3.4.1. Массовую долю карбамида (X) в процентах вычисляют по формулам:

а) в комбикорме и БВД

;

б) в карбамидном концентрате

:

где А - объем раствора соляной кислоты, израсходованный на титрование экстракта продукта с карбамидом, ;

0,5 - объем раствора соляной кислоты концентрацией с(НСl)=0,1 , израсходованный на титрование экстракта комбикорма или БВД без карбамида, ;

0,1 - объем раствора соляной кислоты концентрацией с(НСl)=0,5 , израсходованный на титрование экстракта исходного сырья для карбамидного концентрата без карбамида, ;

V - первоначальный объем экстракта анализируемого продукта, ;

- объем взятого на анализ экстракта после разведения, ;

- объем взятого на анализ экстракта до разведения, ;

- объем экстракта анализируемого продукта, взятого для титрования, ;

100 - коэффициент пересчета массовой доли карбамида в процентах;

0,003 - массовая доля карбамида, соответствующая массовой доле соляной кислоты, содержащейся в 1 раствора с концентрацией (НСl)=0,1 , г;

0,015 - массовая доля карбамида, соответствующая массовой доле соляной кислоты, содержащейся в 1 раствора с концентрацией (НСl)=0,5 , г;

m - масса навески продукта, г.

3.4.2. С целью упрощения вычисления массовой доли карбамида расчет проводят по формулам с вводом коэффициентов, учитывающих соответствующие количественные выражения:

а) в комбикорме

X (%) = или X (г/кг) = ;

б) в БВД

Х (%) = или X (г/кг) = ;

в) в карбамидном концентрате

Х (%) = или Х (г/кг) = .

3.4.3. За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, которые вычисляют до второго десятичного знака и округляют до первого десятичного знака.

Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений () и между результатами, полученными в разных условиях () при доверительной вероятности Р=0,95 для БВД и карбамидного концентрата не должны превышать соответственно 0,5 абс. % и 1,0 абс. %, а для комбикормов - 0,2 и 0,4 абс. %.