Методические указания по измерению концентраций эфедрина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии МУК 4.1.186-96 (утв. Госкомсанэпиднадзором РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания
по измерению концентраций эфедрина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии
МУК 4.1.186-96
(утв. Госкомсанэпиднадзором РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения: с момента утверждения

Эфедрин гидрохлорид - (1-1-фенил-2-метиламинопропанола-1 гидрохлорид) - бесцветные игольчатые кристаллы или белый кристаллический порошок без запаха, горького вкуса. Легко растворим в воде, растворим в 95%-ном спирте, практически не растворяется в эфире.

В воздухе находится в виде аэрозоля и паров.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе - 1 .

Характеристика метода

Определение основано на хроматографировании вещества в тонком слое сорбента на пластинках "Силуфол" с последующим обнаружением хроматограммы раствором о-толидина и денситометрированием окрашенных зон.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр и этанол.

Нижний предел измерения вещества в анализируемом объеме пробы - 1,0 мкг.

Нижний предел измерения вещества в воздухе - 0,5 (при отборе 10 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций от 0,5 до 10 .

Определению не мешают: аммиак, изопропиловый и этиловый спирт.

Суммарная погрешность измерения не превышает _20%.

Время выполнения измерения - 2 ч 30 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Камера для хроматографирования	ГОСТ 20565-75
Камера для опрыскивания пластинок
Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол" УФ-254 нм
Аспирационное устройство
Фильтродержатели
Прибор Гернет
Колбы грушевидные, вместимостью 50 мл	ГОСТ 10394-72
Колбы мерные, вместимостью 25 и 100 мл	ГОСТ 1770-74
Микропипетки, вместимостью 0,1 мл	ГОСТ 20292-74
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10 мл	ГОСТ 20292-74
Пробирки градуировочные с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл	ГОСТ 10515-75
Вакуумная установка
Денситометр "БИАН-170" или "Спекорд М 40" с приставкой для измерения отражения с фотометрическим шаром

Реактивы, растворы, материалы

Эфедрин гидрохлорид фармакопейный
Этиловый спирт	ГОСТ 5963-67
Хлороформ, х. ч.	ГОСТ 20015-74
Метиловый спирт, х. ч.	ГОСТ 6995-77
Аммиак водный, х. ч., 25%-иый раствор	ГОСТ 3760-79
О-толидин	ТУ 6-09-11-788-76
Кислота уксусная ледяная, х. ч.	ГОСТ 61-75
Кислота соляная, х. ч., 10%-ный раствор	ГОСТ 3118-77
Калий марганцовокислый, х. ч., 1,5%-ный раствор	ГОСТ 20490-75
Калий йодистый, ч. д. а.	ГОСТ 4232-74
Подвижный растворитель - хлороформ : метанол : 25%-ный раствор аммиака (90 : 10 : 1)

Реактивы для проявления

Пары хлора получают в эксикаторе, вместимостью 1,5 л, с пришлифованной крышкой, смешивая 50 мл 1,5%-ного водного раствора марганцовокислого калия с 50 мл 10%-ного раствора соляной кислоты. Пары хлора получают за 1 час до определения.

Раствор о-толидина: 160 мг о-толидина растворяют в 30 мл ледяной уксусной кислоты, доводят объем до 500 мл дистиллированной водой и добавляют 1 г йодистого калия. Хранят в посуде из темного стекла. Реактив устойчив в течение 2-х недель.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией 500 мкг/мл готовят растворением 0,05 г вещества в этаноле в мерной колбе, вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение 2-х недель при хранении в холодильнике.

Стандартные растворы 10 - 20 - 40 - 80 - 160 - 200 мкг/мл готовят путем соответствующего разбавления этанолом стандартного раствора N  1. Растворы устойчивы в течение 2-х недель при хранении в холодильнике.

АФА-ВП-10

ТУ 95-743-80

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 2 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10 и прибор Гернет с 10 мл этанола. Прибор Гернет охлаждают смесью лед + вода. Для определения 1/2 ОБУВ следует отобрать 10 л воздуха. Срок хранения отобранных проб - 2-е суток.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой и содержимое поглотительного сосуда переносят в колориметрическую пробирку, доводят объем до 10 мл этанолом и оставляют на 10 минут, периодически помешивая палочкой для лучшего растворения вещества. Степень десорбции - 98%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 60 - 80°С. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл этанола и используют полученный раствор для анализа.

На линию старта (от края 1,5 см) наносят при помощи микропипетки 0,1 мл растворов пробы и шкалы стандартов, которую готовят аналогично пробам (растворяют сухой остаток в 1 мл этанола). Размер пятен не должен превышать 0,5 см. Пластинку высушивают на воздухе в течение 3-х минут и помещают в камеру для хроматографирования с системой растворителей - хлороформ : метанол : 25%-ный раствор аммиака (90 : 10 : 1). После того как подвижный растворитель поднимается до конца пластинки, ее вынимают из камеры и оставляют на несколько минут для испарения растворителя, затем помещают в сушильный шкаф при температуре 100°С на 10 минут, для освобождения паров аммиака, затем пластинку обрабатывают парами воды (держат 2 минуты над кипящей водяной баней) и переносят в камеру с парами хлора, где выдерживают 15 минут. Для удаления паров хлора пластинку помещают в сушильный шкаф при температуре 50°С на 1 минуту. Далее пластинку орошают раствором о-толидина. Эфедрин гидрохлорид проявляется в виде темно-синего пятна с Rf = 0,13 _ 0,02. Через 1 час проводят количественное измерение используя планиметр или денситометрирование.

Интенсивность окраски пятен измеряют на "Спекорде М 40" с приставкой для измерения отражения с фотометрическим шаром при длине волны 540 нм по отношению к поверхности фона. В качестве фона используется участок исследуемой хроматографической пластинки без вещества. Для каждой концентрации измеряют Т в %. Оптическая плотность Д и отражение Т связаны между собой следующим образом:

, где

Т - выражен в %, отсюда

или

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных хроматограмм, на ось абсцисс - соответствующие им концентрации вещества (в мкг) в анализируемом объеме пробы.

Обработка результатов и расчет концентрации

При использовании планиметра количество вещества "М" (в мкг) в анализируемом объеме пробы находят по формуле:

, где

m - содержание фторацизина на пятне стандарта, мкг;

- площадь пятна пробы, ;

- площадь пятна стандарта, .

При использовании денситометра содержание вещества в анализируемом объеме пробы находят по градуировочному графику.

Концентрацию эфедрина гидрохлорида "С" в воздухе (в ) вычисляют по формуле:

, где

а - содержание вещества, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг,

б - объем пробы, взятой для анализа, мл;

в - общий объем пробы, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

И.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Г.Г. Онищенко