Приложение. Общие технические спецификации (CTS) медицинского оборудования диагностики in vitro

Приложение

Общие технические спецификации (CTS) медицинского оборудования диагностики in vitro

1. Сфера применения

Техническая спецификация, установленная в настоящем Приложении, должна применяться для целей, предусмотренных Приложением II Списка А к Директиве 98/79/ЕС.

ГАРАНТ:

По-видимому, в тексте предыдущего абзаца допущена опечатка. Имеется в виду в Список А Приложения II к Директиве 98/79/ЕС

2. Определения и термины

(Диагностическая) чувствительность

Вероятность того, что оборудование даст положительные результаты при наличии целевого маркера.

Истинно положительный

Образец, имеющий положительный целевой маркер и верно классифицируемый оборудованием.

Ложноотрицательный

Образец, имеющий положительный результат анализа на целевой маркер, но неправильно классифицируемый оборудованием.

(Диагностическая) специфичность

Вероятность того, что оборудование даст отрицательный результат при отсутствии целевого маркера.

Ложноположительный

Образец, имеющий отрицательный целевой маркер, но неправильно классифицируемый оборудованием.

Истинно отрицательный

Образец, имеющий отрицательный целевой маркер и верно классифицируемый оборудованием.

Аналитическая чувствительность

Аналитическая чувствительность может быть определена как предельное обнаружение, т.е. наименьшее количество целевых маркеров, которые могут быть четко выявлены.

Аналитическая специфичность

Аналитическая специфичность означает способность метода определять исключительно целевой маркер.

Техника амплификации нуклеиновых кислот (NAT)

Термин "NAT" применяется к исследованиям, направленным на обнаружение и/или подсчет нуклеиновых кислот путем амплификации ДНК-мишени, амплификации импульса или гибридизации.

Экспресс-тест

"Экспресс-тест" означает качественное или полуколичественное медицинское оборудование диагностики in vitro, используемое самостоятельно или в небольших группах, которое использует неавтоматизированные процедуры и было создано, чтобы дать быстрый результат.

Надежность

Надежность аналитических процедур означает способность аналитических процедур оставаться незатронутыми небольшими преднамеренными изменениями в параметрах метода и демонстрировать свою надежность при обычном использовании.

Интенсивность отказов в работе всей системы

Интенсивность отказов в работе всей системы означает количество случаев, когда весь процесс не функционирует, как описано в предписаниях производителя.

Подтверждение исследования

Подтверждение исследования означает проверку, используемую для подтверждения реактивных результатов скринингового исследования.

Исследование на определение типов вирусов

Исследование на определение типов вирусов означает исследование, проводимое для определения типа уже известных положительных проб, не используемое при первичной диагностике инфекций или при скрининговом исследовании.

Сероконверсивные ВИЧ образцы

Сероконверсивные ВИЧ образцы - это:

- р24 - антиген и/или ВИЧ РНК положительное; и

- признанное всеми серологическими тестированиями; и

- положительное или недетерминированное контрольное исследование;

Ранние сероконверсивные ВИЧ образцы

Ранние сероконверсивные ВИЧ образцы - это

- р24 - антиген и/или ВИЧ РНК положительное; и

- не признанное всеми серологическими тестированиями; и

- недетерминированное или отрицательное контрольное исследование.

3. Общие технические спецификации (CTS) продуктов, перечисленных в приложении II списка А к директиве 98/79/ЕС

3.1. CTS для оценки аналитических характеристик реагентов и продуктов реагентов для выявления, подтверждения и количественного анализа в образцах человека маркеров ВИЧ-инфекции (ВИЧ 1 и 2), HTLV I и II, гепатитов B, С и D

Основные принципы

3.1.1. Оборудование, распознающее вирусные инфекции, размещенное на рынке для проведения скрининговых или диагностических тестов, должно соответствовать требованиям чувствительности и специфичности, установленным в Таблице 1. См. также принцип, установленный пунктом 3.1.11 для скрининговых исследований.

3.1.2. Оборудование, предназначенное производителем для проведения анализов биологических жидкостей, кроме сыворотки крови и плазмы, например, таких как моча, слюна и пр., должно соответствовать тем же требованиям CTS чувствительности и специфичности, что и оборудование для тестирования сыворотки и плазмы крови. Оценкой аналитических характеристик должны исследоваться образцы от тех же лиц, у которых в обоих тестах положительные результаты, а также при исследовании соответствующей сыворотки или плазмы крови.

3.1.3. Оборудование, предназначенное производителем для самоконтроля, т.е. для домашнего использования, должно соответствовать тем же требованиям CTS чувствительности и специфичности, что и изделия для профессионального использования. Соответствующие оценки аналитических характеристик должны проводиться (либо проводиться повторно) пользователями-непрофессионалами, чтобы подтвердить работоспособность оборудования и проверку инструкций по применению.

3.1.4. Все оценки аналитических характеристик должны проводиться при непосредственном сравнении с установленными высокотехничными приборами. Приборы, используемые для сравнения, должны иметь маркировку СЕ, если они были выпущены на рынок до проведения аналитической оценки характеристик.

3.1.5. Если при оценке выявляются противоречивые результаты тестов, то необходимо как можно тщательнее разрешить противоречия путем:

- исследования противоречивых образцов в дальнейших системах тестирования;

- использования альтернативного метода или маркера;

- пересмотра клинического статуса или диагноза пациента;

- тестирования последующих образцов.

3.1.6. Оценка аналитических характеристик должна быть произведена на населении, равном по численности населению Европы.

3.1.7. Положительные образцы, используемые при оценке аналитических характеристик, должны отбираться по принципам отражения различных стадий заболевания(ий), различных образцов антител, различных генотипов, различных субтипов, мутаций и т.д.

3.1.8. Чувствительность к истинно положительным и сероконверсивным образцам оценивается по следующим критериям:

3.1.8.1. Диагностическое определение чувствительности при сероконверсивном исследовании должно соответствовать современному уровню развития. Если дальнейшее исследование тех же или дополнительных сероконверсивных анализов проводится нотифицированным органом или производителем, результаты должны подтверждать данные первоначальной оценки аналитических характеристик (см. Таблицу 1). Проведение сероконверсивных анализов должно начинаться с образцов крови, давших отрицательный результат, образцы крови должны браться с небольшим временным интервалом.

3.1.8.2. Чтобы оборудование скрининга крови (за исключением тестов на поверхностный антиген вируса гепатита В и тестов на антитела к ядерному антигену вируса гепатита В) получило маркировку СЕ, все истинно положительные образцы должны быть опознаны оборудованием как положительные (Таблица 1). Новое оборудование по диагностике поверхностного антигена вируса гепатита В и антител к ядерному антигену вируса гепатита В должно иметь общие эксплуатационные характеристики, аналогичные характеристикам установленного оборудования (см. 3.1.4.).

3.1.8.3. В отношении тестов на ВИЧ:

- все сероконверсивные ВИЧ-образцы должны быть определены как положительные;

- необходимо провести как минимум 40 анализов ранних сероконверсивных ВИЧ-образцов. Образцы должны соответствовать современному уровню технического развития.

3.1.9. Для оценки характеристик скрининговых исследований необходимо наличие 25 положительных (если возможно в случае редких инфекций) амбулаторных недавно изъятых образцов сыворотки и/или плазмы крови ( день после взятия).

3.1.10. Отрицательные образцы, используемые при оценке, должны быть определены таким образом, чтобы они отражали целевую аудиторию, для которой предназначено исследование, например, доноры крови, госпитализированные больные, беременные женщины и т.д.

3.1.11. Для оценки эффективности скрининговых исследований (Таблица 1) донорская кровь должна быть обследована в как минимум двух центрах переливания крови, а также это должны быть последовательные образцы донорской крови, взятые также и у доноров, впервые сдавших кровь.

3.1.12. Для оборудования должна быть характерна специфичность выявления не менее 99,5% в образцах донорской крови, если иное не указано в сопроводительной таблице. Специфичность необходимо подсчитывать, используя частоту повторяющихся реактивных (например, ложноположительных) результатов при анализе донорской крови, имеющей отрицательный результат в отношении целевого маркера.

3.1.13. Также необходимо оценить влияние веществ, потенциально мешающих анализу, при оценке аналитических характеристик оборудования. На оценку потенциально мешающих веществ будет влиять состав реагента и конфигурация исследования. Вещества, потенциально мешающие анализу, должны быть отнесены к степени риска, оценка которой обязательно требуется для каждого нового прибора, и может включать в себя:

- образцы, представляющие собой "сопутствующие" инфекции;

- образцы, изъятые у повторнородящей женщины, т.е. у женщины, которая имела более чем 1 беременность, или у пациентов с положительным ревматоидным фактором;

- для рекомбинирующих антигенов, антитела человека к компонентам экспрессирующей системы, например, против кишечной палочки или против дрожжевых грибков.

3.1.14. Для приборов, предназначенных производителем для исследования сыворотки крови и плазмы крови, оценка аналитических характеристик должна продемонстрировать соотношение для сыворотки крови и плазмы крови на не менее чем 50 образцах донорской крови (25 положительных и 25 отрицательных результатов).

3.1.15. При оценке аналитических характеристик оборудования, предназначенного для использования с плазмой крови, необходимо проверить рабочие показатели оборудования, используя все антикоагулянты, которые производитель указал подходящими для использования на данном оборудовании. Данное требование считается выполненным при проверке как минимум 50 образцов крови (25 положительных и 25 отрицательных результатов).

3.1.16. В рамках требуемой в обязательном порядке оценки степени риска возможности возникновения отказов в работе всей системы, ведущих к ложноотрицательным результатам, необходимо проводить проверку на нескольких исследованиях низкопозитивных образцов.

3.1.17. Если новое медицинское оборудование диагностики in vitro, относящееся к Списку А Приложения II, не регулируется отдельными техническими спецификациями, необходимо учитывать общие технические спецификации родственного оборудования. Оборудование признается родственным по различным основаниям, например, по одинаковым или схожим целям использования или по схожим рискам.

3.2. Дополнительные требования к комплексным тестам на антитела/антигены к ВИЧ

3.2.1. Комплексные тесты на антитела/антигены к ВИЧ, направленные на обнаружение АТ к ВИЧ и р24 антигенов, в том числе исключительно по обнаружению р24 антигенов, должны соответствовать Таблице 1 и Таблице 5, в том числе критерию аналитической чувствительности к р24 антигену.

3.2.2. Комплексные тесты на антитела/антигены к ВИЧ, направленные на обнаружение АТ к ВИЧ и р24 антигенов, не включающие требования по обнаружению р24 антигенов, должны соответствовать Таблице 1 и Таблице 5, за исключением критерия аналитической чувствительности к р24 антигену.

3.3. Дополнительные требования к технике амплификации нуклеиновых кислот (NAT)

Критерии оценки аналитических характеристик NAT-исследований могут быть обнаружены в Таблице 2.

3.3.1. Для амплификационного исследования последовательностей клеток-мишеней функциональный контроль каждого тестируемого образца (внутренний контрольный образец) должен соответствовать современному уровню развития. Подобный контроль по возможности должен использоваться на протяжении всего процесса, т.е. экстрагирования, амплификации/гибридизации, обнаружения.

3.3.2. Аналитическая чувствительность или предельное обнаружение в NAT-исследованиях должны быть отражены в 95% положительных пороговых значениях. Эта аналитическая концентрация, при которой 95% исследований дают положительный результат после серийного разведения международных эталонных образцов, например стандартов ВОЗ или калиброванных эталонных материалов.

3.3.3. Определение генотипа должно проводиться оценкой соответствующих праймеров или зондов, а также должно оцениваться при тестировании характеризующих генотипированных образцов.

3.3.4. Результаты количественных NAT-исследований должны быть выявлены в международных стандартах или калиброванных эталонных материалах, если это возможно, а также выражены в международных единицах, используемых в определенных областях применения.

3.3.5. NAT-исследования могут применяться для обнаружения вируса в антителах отрицательных образцов, т.е. в предварительных сероконверсивных образцах. Вирусы иммунных комплексов могут вести себя не так, как свободные вирусы, например, в ходе центрифугирования. Поэтому очень важно, чтобы во время исследования устойчивости учитывались образцы, отрицательные к антителам (предварительные сероконверсивные).

3.3.6. Для исследования потенциального переноса необходимо провести как минимум пять исследований с переменными высокоположительными и отрицательными образцами при изучении устойчивости. Высокоположительные образцы должны включать в себя образцы с естественно высоким титром вируса.

3.3.7. Интенсивность отказов в работе всей системы, ведущая к ложноотрицательным результатам, должна определяться путем исследования низкоположительных образцов. Низкоположительные образцы должны содержать концентрацию вируса, эквивалентную троекратному 95% пороговому значению положительного результата вирусной концентрации.

3.4. CTS для испытаний при выпуске производителем реагентов и продукции на основе реагентов, предназначенной для обнаружения, подтверждения и количественного анализа в образцах человека маркеров ВИЧ инфекции (ВИЧ 1 и 2), HTLV I и II, и гепатитов B, C и D (исключительно для иммунологического анализа)

3.4.1. При проведении производителем испытаний при выпуске продукции необходимо удостовериться, что в каждой партии всегда выявляются соответствующие антигены, эпитопы и антитела.

3.4.2. В ходе проверки при выпуске производителем партии для скрининговых исследований должны исследоваться как минимум 100 образцов, имеющих отрицательную реакцию на соответствующее анализируемое вещество.

3.5. CTS для оценки аналитических характеристик реагентов и продукции на основе реагентов, предназначенной для определения следующих антигенов групп крови: система антигенов группы крови АВО АВО1(А), АВО2(В), АВО3(А,В); система резус-принадлежности RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e); система групп крови по Келл KEL1 (K)

Критерии оценки аналитических характеристик реагентов и продукции на основе реагентов, предназначенных для определения следующих антигенов групп крови: система антигенов группы крови АВО АВО1(А), АВО2(В), АВО3(А,В); система резус-принадлежности RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e); система групп крови по Келл KEL1 (K) могут быть найдены в Таблице 9.

3.5.1. Все оценки аналитических характеристик должны проводиться при непосредственном сравнении с установленными высокотехничными приборами. Приборы, используемые для сравнения, должны иметь маркировку СЕ, если они были выпущены на рынок до проведения аналитической оценки характеристик.

3.5.2. Если при оценке выявляются противоречивые результаты тестов, то необходимо как можно тщательнее разрешить противоречия путем:

- исследования противоречивых образцов в дальнейших системах тестирования;

- использования альтернативного метода.

3.5.3. Оценка аналитических характеристик должна быть произведена на населении, равном по численности населению Европы.

3.5.4. Положительные образцы, используемые при оценке аналитических характеристик, должны отбираться по принципам отражения вариативности и слабой выраженности антигенов.

3.5.5. Частью оценки аналитических характеристик должна являться оценка влияния веществ, потенциально мешающих анализу. На оценку потенциально мешающих анализу веществ будет влиять состав реагента и конфигурация исследования. Вещества, потенциально мешающие анализу, должны быть отнесены к степени риска, оценка которой обязательно требуется для каждого нового прибора.

3.5.6. При оценке аналитических характеристик оборудования, предназначенного для использования с плазмой крови, необходимо проверить рабочие показатели оборудования, используя все антикоагулянты, которые указаны производителем в качестве подходящих для использования на данном оборудовании. Данное требование считается выполненным при проверке как минимум 50 образцов крови.

3.6. CTS для испытаний при выпуске производителем реагентов и продукции на основе реагентов, предназначенной для определения антигенов групп крови: система антигенов группы крови АВО АВО1(А), АВО2(В), АВО3(А,В); система резус-принадлежности RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e); система групп крови по Келл KEL1 (K)

3.6.1. При проведении производителем испытаний при выпуске продукции необходимо удостовериться, что в каждой партии всегда выявляются соответствующие антигены, эпитопы и антитела.

3.6.2. Требования к проведению испытаний при выпуске производителем партии указаны в Таблице 10.

3.7. CTS для скринингового исследования крови на болезнь Крейтцфельдта-Якоба* (vCJD)

CTS для скринингового исследования крови на болезнь Крейтцфельдта-Якоба установлены в Таблице 11.

_____________________________

* Текст в редакции Решения 2011/869/EС Европейской Комиссии от 20 декабря 2011 г.

Таблица 1

"Скрининговое" исследование: Ат к ВИЧ 1 и 2, Ат к HTLV I и II, антитела к вирусу гепатита С, поверхностный антиген вируса гепатита В, антитела к ядерному антигену вируса гепатита В

		Ат к ВИЧ-1/2	Ат к HTLV-I/II	антитела к вирусу гепатита С	поверхностный антиген вируса гепатита В	антитела к ядерному антигену вируса гепатита В
Диагностическая чувствительность	Положительные образцы	400 ВИЧ-1 100 ВИЧ-2, в том числе 40 не подтипа- В, все доступные подтипы ВИЧ/1 должны быть представлены не менее чем 3 образцами на каждый подтип	300 HTLV-I 100 HTLV-II	400 (положительных проб). В том числе образцы, демонстрирующие разные стадии развития инфекции и отражающие различные образцы антител. Генотип 1-4: > 20 проб каждого генотипа (в том числе не-а подтипа генотипа 4); 5:> 5 проб; 6: при возможности	400 в том числе подтипы	400 в том числе определение прочих маркеров вируса гепатита В
	Сероконверсивные группы тестов	20 групп тестов 10 последующих групп тестов (в уполномоченном органе или у производителя)	Определяются при возможности	20 групп тестов 10 последующих групп тестов (в уполномоченном органе или у производителя)	20 групп тестов 10 последующих групп тестов (в уполномоченном органе или у производителя)	Определяются при возможности
Аналитическая чувствительность	Стандарты				0,130 МЕ/мл (Второй международный стандарт для поверхностного антигена вируса гепатита В, подтип adw2, генотип А, НИБСК* код: 00/588 )
Специфичность	Неотобранные доноры (в том числе доноры, впервые сдавшие кровь)	5 000	5 000	5 000	5 000	5 000
	Госпитализированные пациенты	200	200	200	200	200
	Перекрестно-реагирующие пробы крови (RF+, сопутствующие инфекции, беременность и т.д.)	100	100	100	100	100

_____________________________

* Национальный институт биологических стандартов и контроля - прим. перев.

Таблица 2

NAT исследование на ВИЧ 1, вирус Гепатита С, вирус Гепатита В, HTLV I/II (количественное и качественное, немолекулярное типирование)

ВИЧ 1			Вирус Гепатита С		Вирус Гепатита В		HTLV I/II		Критерий приемлемости
NAT	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий
				В отношении количественной характеристики ВИЧ		В отношении количественной характеристики ВИЧ		В отношении количественной характеристики ВИЧ
Чувствительность Предел обнаружения Определение аналитической чувствительности (МЕ/мл; определяется по стандартам ВОЗ или проверенным эталонным материалам)	В соответствии с Руководством по Европейской фармакопее*: серийное разведение до пограничных концентраций; статистическое исследование (например, пробит-анализ) на основе как минимум 24 повторяющихся проб; подсчет 95% пороговых значений	Предел обнаружения: так же как и при качественном анализе; Качественный предел: раствор (половина лог10 или менее) калиброванных эталонных препаратов, определение нижнего и верхнего качественного предела, четкость, точность, "линейный" диапазон измерений, "динамический диапазон". Необходимо продемонстрировать воспроизводимость на различных уровнях концентрации	В соответствии с Руководством по Европейской фармакопее*: серийное разведение до пограничных концентраций; статистическое исследование (например, пробит-анализ) на основе как минимум 24 повторяющихся проб; подсчет 95% пороговых значений		В соответствии с Руководством по Европейской фармакопее*: серийное разведение до пограничных концентраций; статистическое исследование (например, пробит-анализ) на основе как минимум 24 повторяющихся проб; подсчет 95% пороговых значений		В соответствии с Руководством по Европейской фармакопее*: серийное разведение до пограничных концентраций; статистическое исследование (например, пробит-анализ) на основе как минимум 24 повторяющихся проб; подсчет 95% пороговых значений

ВИЧ 1			Вирус Гепатита С		Вирус Гепатита В		HTLV I/II		Критерий приемлемости
NAT	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий
				В отношении количественной характеристики ВИЧ		В отношении количественной характеристики ВИЧ		В отношении количественной характеристики ВИЧ
Генотип/ определение подтипа/количественная оценка эффективности	Как минимум 10 проб каждого подтипа (если возможно) Кондиционированная среда культуры клеток (используется вместо редких ВИЧ-1 подтипов) В соответствии с Руководством по Европейской фармакопее* при доступности калиброванных подтипов эталонных материалов; матрицы in vitro должны представляться вариативно	Серийное разведение всех соответствующих генотипов/подтипов, предпочтительно из эталонных материалов, если возможно Возможно использование матриц или плазмид, подсчитанных соответствующим методом	Не менее 10 проб каждого генотипа (если возможно) В соответствии с Руководством по Европейской фармакопее* при доступности калиброванных подтипов эталонных материалов; матрицы in vitro должны представляться вариативно		При доступности калиброванных подтипов эталонных материалов В соответствии с Руководством по Европейской фармакопее* при доступности калиброванных подтипов эталонных материалов; матрицы in vitro должны представляться вариативно		При доступности калиброванных подтипов эталонных материалов В соответствии с Руководством по Европейской фармакопее* при доступности калиброванных подтипов эталонных материалов; матрицы in vitro должны представляться вариативно

ВИЧ 1			Вирус Гепатита С		Вирус Гепатита В		HTLV I/II		Критерий приемлемости
NAT	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий
				В отношении количественной характеристики ВИЧ		В отношении количественной характеристики ВИЧ		В отношении количественной характеристики ВИЧ
Диагностическая специфичность отрицательных проб	500 образцов донорской крови	100 образцов донорской крови	500 образцов донорской крови		500 образцов донорской крови		500 индивидуальных образцов донорской крови
Потенциально перекрестнореагирующие маркеры	Подходящими анализами структурных признаков (например, последовательное сравнение) и/или как минимум 10 положительных проб ретровируса человека (например, HTLV)	Так же, как и при качественном тесте	Исследование структур и/или проверка как минимум 10 флавивирусов человека (например, HGV, вирус желтой лихорадки)		Исследование структур и/или проверка как минимум 10 положительных проб прочих ДНК-вирусов человека		Исследование структур и/или проверка как минимум 10 положительных проб ретровируса человека (например, ВИЧ)
Устойчивость		Так же, как и при качественном тесте
Перекрестная контаминация	Как минимум 5 серий, использующих переменные высокоположительные (возникающие естественным путем) и отрицательные пробы		Как минимум 5 серий, использующих переменные высокоположительные (возникающие естественным путем) и отрицательные пробы		Как минимум 5 серий, использующих переменные высокоположительные (возникающие естественным путем) и отрицательные пробы		Как минимум 5 серий, использующих переменные высокоположительные (возникающие естественным путем) и отрицательные пробы

ВИЧ 1			Вирус Гепатита С		Вирус Гепатита В		HTLV I/II		Критерий приемлемости
NAT	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий	Качественный критерий	Количественный критерий
				В отношении количественной характеристики ВИЧ		В отношении количественной характеристики ВИЧ		В отношении количественной характеристики ВИЧ
Ингибирование	Желательно, чтобы внутренний контроль проводился на протяжении всей процедуры амплификации нуклеиновых кислот (NAT)		Желательно, чтобы внутренний контроль проводился на протяжении всей процедуры амплификации нуклеиновых кислот (NAT)		Желательно, чтобы внутренний контроль проводился на протяжении всей процедуры амплификации нуклеиновых кислот (NAT)
Интенсивность отказов в работе всей системы, ведущая к ложноотрицательным результатам	Как минимум 100 проб вируса, меченных 3 x 95% положительных предельных концентраций		Как минимум 100 проб вируса, меченных 3 x 95% положительных предельных концентраций		Как минимум 100 проб вируса, меченных 3 x 95% положительных предельных концентраций		Как минимум 100 проб вируса, меченных 3 x 95% положительных предельных концентраций		99/100 положительных анализов

_____________________________

* Руководство по Европейской фармакопее.

Примечания: критерием приемлемости для "интенсивности отказов в работе всей системы, ведущей к ложноотрицательным результатам" является 99/100 положительных анализов. Количественное исследование NAT должно проводиться на как минимум 100 положительных образцах, отражающих повседневные условия пользователей (например, предварительный отбор образцов). Результаты сравнительного исследования с другими системами тестирования NAT должны проводиться параллельно. Качественное исследование NAT на диагностическую чувствительность должно проводиться с использованием как минимум 10 сероконверсивных групп тестов. Результаты сравнительного исследования с другими системами тестирования NAT должны проводиться параллельно.

Таблица 3

Экспресс-тест: Ат к ВИЧ 1 и 2, антитела к вирусу гепатита С, поверхностный антиген вируса гепатита В, антитела к ядерному антигену вируса гепатита В, Ат к HTLV I и II

		Ат к ВИЧ 1/2	Антитела к вирусу Гепатита С	Поверхностный антиген вируса гепатита В	Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В	Ат к HTLV I/II	Критерий приемлемости
Диагностическая чувствительность	Положительные образцы	Те же критерии, что и для скрининговых анализов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов
	Сероконверсивные группы тестов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов	Те же критерии, что и для скрининговых анализов
Диагностическая специфичность	Отрицательные образцы	1 000 образцов донорской крови 200 клинических образцов 200 проб от беременных женщин 100 потенциально мешающих образцов	1 000 образцов донорской крови 200 клинических образцов 200 проб от беременных женщин 100 потенциально мешающих образцов	1 000 образцов донорской крови 200 клинических образцов 200 проб от беременных женщин 100 потенциально мешающих образцов	1 000 образцов донорской крови 200 клинических образцов 100 потенциально мешающих образцов	1 000 образцов донорской крови 200 клинических образцов 200 проб от беременных женщин 100 потенциально мешающих образцов	(Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В: )

Таблица 4

Контрольные/сопутствующие исследования на Ат к ВИЧ 1 и 2, Ат к HTLV I и II, антитела к вирусу гепатита С, поверхностный антиген вируса гепатита В

		Контрольное исследование на Ат к ВИЧ	Контрольное исследование на Ат к HTLV	Сопутствующее исследование на вирус Гепатита С	Контрольное исследование на поверхностный антиген вируса гепатита В	Критерий приемлемости
Диагностическая чувствительность	Положительные образцы	200 на ВИЧ-1 и 100 на ВИЧ-2 В том числе образцы, отражающие различные стадии инфекции и различные образцы антител.	200 на РЕДМ-1 и 100 на РЕДМ-2	300 на вирус Гепатита С (положительные результаты) В том числе образцы, отражающие различные стадии инфекции и различные образцы антител. Генотипы 1-4:> 20 образцов (в том числе не-а подтипа генотипа 4); 5: > 5 образцов; 6: если возможно	300 на поверхностный антиген вируса гепатита В. В том числе образцы, отражающие различные стадии инфекции 20 высокоположительных образцов (> 26 МЕ/мл); 20 образцов в пороговом пределе	Верное определение как положительного (или недетерминируемого), а не отрицательного образца.
	Сероконверсивные группы тестов	15 сероконверсивных групп тестов/группы тестов с низкими титрами		15 сероконверсивных групп тестов/группы тестов с низкими титрами	15 сероконверсивных групп тестов/группы тестов с низкими титрами
Аналитическая чувствительность	Стандарты				Второй международный стандарт для поверхностного антигена вируса гепатита В, подтипа adw2, генотипа А, НИБСК код: 00/588
Диагностическая специфичность	Отрицательные образцы	200 образцов донорской крови 200 клинических образцов, в том числе и от беременных женщин 50 потенциально мешающих образцов, в том числе образцы с недетерминированными результатами от других контрольных исследований	200 образцов донорской крови 200 клинических образцов, в том числе и от беременных женщин 50 потенциально мешающих образцов, в том числе образцы с недетерминированными результатами от других контрольных исследований	200 образцов донорской крови 200 клинических образцов, в том числе и от беременных женщин 50 потенциально мешающих образцов, в том числе образцы с недетерминированными результатами от других контрольных исследований	10 ложноположительных образцов, доступных после оценки аналитических характеристик скринингового исследования*. 50 потенциально мешающих образцов.	Не ложноположительные результаты/* не нейтрализации

* Критерий приемлемости не нейтрализации для контрольного исследования на поверхностный антиген вируса гепатита В.

Таблица 5

Антиген ВИЧ 1

		Исследование на антиген ВИЧ-1	Критерий приемлемости
Диагностическая чувствительность	Положительные образцы	50 образцов с положительным антигеном ВИЧ-1 50 образцов кондиционированной среды культуры клеток, в том числе различные подтипы ВИЧ-1 и ВИЧ-2	Верное определение (после нейтрализации)
	Сероконверсивные группы тестов	20 сероконверсивных групп тестов/группы тестов с низкими титрами
Аналитическая чувствительность	Стандарты	Антиген p24 ВИЧ-1, Первый международный референтный реагент, НИБСК код: 90/636	МЕ/мл
Диагностическая специфичность		200 образцов донорской крови 200 клинических образцов 50 потенциально мешающих образцов	после нейтрализации

Таблица 6

Серотипическое исследование и генотипирование: вирус гепатита С

		Серотипирование и генотипирование на Вирус гепатита С	Критерий приемлемости
Диагностическая чувствительность	Положительные образцы	200 (положительных образцов) В том числе образцы, отражающие различные стадии инфекции и различные образцы антител. Генотипы 1-4: > 20 образцов (в том числе не-а подтипа генотипа 4); 5: > 5 образцов; 6: если возможно	совпадения результатов серотипирования и генотипирования > 95% совпадения результатов генотипирования и секвенирования
Диагностическая специфичность	Отрицательные образцы	100

Таблица 7

Маркеры вируса гепатита В: антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В, антитела к ядерному антигену вируса гепатита В иммуноглобулина М, антитела к антигену вируса гепатита Ве, е антиген вируса гепатита В

		Антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В	Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В иммуноглобулина М	Антитела к антигену вируса гепатита Ве	Е антиген вируса гепатита В	Критерий приемлемости
Диагностическая чувствительность	Положительные образцы	100 вакцинированных пациентов	200 В том числе образцы, отражающие различные стадии инфекции (острая/хроническая стадия и т.д.) Критерий приемлемости применяется только к образцам, изъятым в острой стадии заболевания		200 В том числе образцы, отражающие различные стадии инфекции (острая/хроническая стадия и т.д.)
	Сероконверсивные группы тестов	10 последующих наблюдений или сероконверсия антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В	Если доступно
Аналитическая чувствительность	Стандарты	Второй международный эталонный препарат ВОЗ 1977; НИБСК, Великобритания			Вирус гепатита Ве- Эталонный антиген 82, Институт им. Пауля Эрлиха, Германия	Антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В: < 10 МЕ/мл
Диагностическая специфичность	Отрицательные образцы	500 Включая клинические образцы 50 потенциально мешающих образцов	200 образцов донорской крови 200 клинических образцов 50 потенциально мешающих образцов	200 образцов донорской крови 200 клинических образцов 50 потенциально мешающих образцов	200 образцов донорской крови 200 клинических образцов 50 потенциально мешающих образцов

Таблица 8

Маркеры вируса гепатита D: антитела к поверхностному антигену вируса гепатита D, антитела к ядерному антигену вируса гепатита D иммуноглобулина М, дельта антиген

		Антитела к поверхностному антигену вируса гепатита D	Антитела к ядерному антигену вируса гепатита D иммуноглобулина М	Дельта антиген	Критерий приемлемости
Диагностическая чувствительность	Положительные образцы	100 определяющих маркеров вируса гепатита В	50 определяющих маркеров вируса гепатита В	10 определяющих маркеров вируса гепатита В
Диагностическая специфичность	Отрицательные образцы	200 В том числе клинические образцы 50 потенциально мешающих образцов	200 В том числе клинические образцы 50 потенциально мешающих образцов	200 В том числе клинические образцы 50 потенциально мешающих образцов

Таблица 9

Системы антигенов группы крови АВО, системы резус-принадлежности, системы групп крови по Келл

	1	2	3
Специфичность	Количество анализов по рекомендованному методу	Общее количество исследований образцов, необходимое для выпуска продукта	Общее количество исследований образцов, необходимое для новой формуляции или для использования положительно характеризующихся реагентов
Ат к АВО1 (анти-А), Ат к АВО2 (анти-В), Ат к АВО3 (анти-А,В)	500	3000	1000
Ат к RH1 (при резус-изоиммунизации)	500	3000	1000
Ат к RH2 (Анти-С), Ат к RH4 (анти-с), Ат к RH3 (анти-Е)	100	1000	200
Ат к RH5 (анти-е)	100	500	200
Ат к группе крови Келл (анти-К)	100	500	200

Критерий приемлемости:

Все вышеуказанные реагенты должны показать результаты тестов, сопоставимые с установленными реагентами, имеющими допустимые характеристики в отношении заявленной реакционной способности приборов. Дальнейшее тестирование установленных реагентов, применение или использование которых было изменено или расширено, должно проводиться в соответствии с требованиями, указанными в 1 колонке таблицы (вышерасположенной).

Оценка аналитических характеристик антирезусных реагентов должна включать в себя тесты в отношении ряда слабых антигенов RH1 (D) и частичных RH1 (D) образцов в зависимости от целей использования приборов.

Квалификация:

Клинические образцы: 10% от общего количества тестов

Неонатальные образцы: > 2% от общего количества тестов

АВО образцы: > 40% А, В положительных

"слабовыраженные D": > 2% RH1(D) положительных

Таблица 10

Критерии выдачи разрешений на выпуск партий реагентов и продукции на основе реагентов для определения систем антигенов групп крови АВО, резус-принадлежности, групп крови по Келл

Требования по проверке специфичности по каждому реагенту

1. Тестовые реагенты

Реагенты групп крови	Минимальное количество контролируемых клеток, подлежащее тестированию
	Положительная реакция					Отрицательная реакция
	А1	А2В	Ах			В	0
Анти-АВО1 (Анти-А)	2	2	2*			2	2
	B	A1B				A1	0
Анти-АВО2 (Анти-B)	2	2				2	2
	A1	A2	Ax	B		0
Анти-АВО2 (Анти -В)	2	2	2	2		4
	R1r	R2r	слабый D			r'r	r'r	rr
Анти-RH1 (анти- D)	2	2	2*			1	1	1
	R1R2	R1r	r'r			R2R2	r'r	rr
Анти-RH2 (анти-С)	2	1	1			1	1	1
	R1R2	R1r	r'r			R1R1
Анти-RH4 (анти-с)	1	2	1			3
	R1R2	R2r	r'r			R1R1	r'r	rr
Анти-RH3 (анти-Е)	2	1	1			1	1	1
	R1R2	R2r	r'r			R2R2
Анти-RH5 (анти-е)	2	1	1			3
	Кk					kk
Анти-Кел1 (анти К)	4					3

* Только рекомендованными техниками, если имеется заявленная реактивность на эти антигены.

Примечание: поликлональные реагенты должны тестироваться на большем количестве групп тестов клеток, чтобы подтвердить специфичность и исключить присутствие нежелательных инфицированных антител.

Критерий приемлемости:

Каждая партия реагентов должна демонстрировать явный положительный или отрицательный результат, полученный по всем рекомендованным техникам, в соответствии с результатами оценки аналитических характеристик.

2. Контрольные материалы (эритроциты)

Фенотипы эритроцитов, используемые при контроле реагентов групп крови, перечисленные выше, должны подтверждаться при помощи установленного оборудования.

Скрининговое исследование крови на болезнь Крейтцфельдта-Якоба (vCJD)

	Материалы	Количество образцов	Критерий приемлемости
Аналитическая чувствительность	vCJD мозговые спайки в плазме крови человека (ВОЗ идентификационный номер NHBYO/0003)	24 воспроизводящегося результата каждого из трех титров раствора материала ВОЗ номер NHBY0/0003 (, , )	23 из 24 воспроизводящихся результата, обнаруженных на
	vCJD селезеночные спайки в плазме крови человека (10% гомогената селезенки - НИБСК идентификационный номер NHSYO/0009)	24 воспроизводящегося результата каждого из трех титров раствора материала НИБСК номер NHSY0/0009 (, , )	23 из 24 воспроизводящихся результата, обнаруженных на
Диагностическая чувствительность	А) Образцы соответствующих моделей у животных	Максимально доступное количество образцов, но не менее 10	90%
	В) Образцы человека с клинической установленной болезнью Крейтцфельдта-Якоба (vCJD)	Максимально доступное количество образцов, но не менее 10	90%
		В случае если 10 образцов недоступно: - количество протестированных образцов - от 6 до 9 - все доступные образцы должны быть протестированы	не более одного ложноотрицательного результата
Аналитическая специфичность	Потенциально перекрестно-реагирующие образцы крови	100
Диагностическая специфичность	Нормальная плазма крови человека из областей с низко проявляющейся ГЭ КРС	5000	Не менее 99,5%