Межгосударственный стандарт ГОСТ 8558.1-78 "Продукты мясные. Методы определения нитрита" (утв. постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 16 ноября 1978 г. N 3003) (утратил силу)

Межгосударственный стандарт ГОСТ 8558.1-78
"Продукты мясные. Методы определения нитрита"
(утв. постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 16 ноября 1978 г. N 3003)

Meat products. Methods for determination of nitrite

Дата введения - 1 января 1981 г.

Взамен ГОСТ 8558-68
в части определения нитрита

ГАРАНТ:

Приказом Росстандарта от 25 марта 2016 г. N 205-ст взамен настоящего ГОСТа введен в действие с 1 января 2017 г. ГОСТ 8558.1-2015 для добровольного применения в РФ

Настоящий стандарт распространяется на мясные продукты всех видов, при изготовлении которых применяют нитрит, а также рассолы и посолочные смеси и устанавливает методы определения нитрита.

Первый метод основан на реакции нитрита с N-(1-нафтил)-этилендиамин дигидрохлоридом и сильфаниламидом в обезбелоченном фильтрате и последующем фотоколориметрическом или визуальном определении интенсивности окраски.

При фотоколориметрическом определении интенсивности окраски метод соответствует международному стандарту ИСО 2918-75*(1) и применяется при разногласиях в оценке качества.

Второй метод основан на реакции Грисса.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).

1. Отбор и подготовка проб

1.1. Пробы колбасных изделий, продуктов из свинины, говядины, баранины, мяса птицы отбирают по ГОСТ 9792*(2).

1.2. Пробы консервов отбирают по ГОСТ 8756.0.

1.3. Рассол для анализа отбирают в количестве 500 .

1.4. Пробы посолочной смеси отбирают от 1% упаковочных единиц (но не менее чем от трех единиц) общей массой не менее 500 г.

1.5. Пробы к анализу готовят следующим образом.

С колбасных изделий снимают оболочку; с фаршированных колбас и языков в шпике - поверхностный слой шпика и оболочку; с окороков, лопаток, рулетов, корейки и грудинки - поверхностный слой шпика; затем пробы дважды измельчают на мясорубке с отверстиями решетки диаметром от 3 до 4 мм.

Продукты, состоящие из шпика с промежуточными слоями мышечной ткани (ветчина в форме, прессованный бекон и аналогичные им) измельчают полностью. Полученный фарш тщательно перемешивают, помещают в стеклянную или пластмассовую банку вместимостью от 200 до 400 , заполнив ее, и закрывают крышкой.

1.6. Пробу хранят при (4 2)°С до окончания анализа.

Анализ проводят не позднее чем через 24 ч после отбора проб.

Пробу сырых продуктов анализируют сразу после измельчения.

Метод, основанный на реакции с реактивом N-(1-нафтил)-этилендиамин дигидрохлоридом

2. Аппаратура, материалы и реактивы

Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025 или электрическая бытовая по ГОСТ 20469 с отверстиями решетки диаметром от 3 до 4 мм.

Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104-88*(3), с наибольшим пределом взвешивания 200 г, второго класса точности.

Баня водяная.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, 1-100-2 или 2-100-2; 1-200-2 или 2-200-2; 1-250-2 или 2-250-2; 1-500-2 или 2-500-2; 1-1000-2 или 2-1000-2.

Воронки по ГОСТ 25336, В-36-80, В-100-150 ХС.

Фильтры беззольные бумажные.

Фотоэлектроколориметр марок ФЭК-М, ФЭК-56, ФЭК-57.

Спектрофотометр СФ-4А.

Пипетки по НТД.

Калий железистосинеродистый по ГОСТ 4207, ч.д.а.

Цинк уксуснокислый по ГОСТ 5823, ч.д.а.

Кислота уксусная по ГОСТ 61, х.ч.

Натрий тетраборнокислый (бура) по ГОСТ 4199, ч.д.а.

Натрий азотистокислый по ГОСТ 4197, ч.д.а.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, ч.д.а., плотностью 1,19 .

Стрептоцид белый (сульфаниламид).

N-(1-нафтил) -этилендиамин дигидрохлорид.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Пробирки по ГОСТ 25336, П1-16-150 ХС.

Примечание. Допускается применять взамен отечественного оборудования, лабораторного химического стекла и реактивов соответствующие импортные. Импортные приборы должны быть аттестованы в соответствии с ГОСТ 8.326*(4) и иметь такие же метрологические характеристики.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).

3. Подготовка к анализу

3.1. Растворы для осаждения белков

3.1.1. Реактив Карреза 1. 106 г железистосинеродистого калия растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора до 1000 . Реактив хранят в склянке из темного стекла не более месяца.

3.1.2. Реактив Карреза 2. 220 г уксуснокислого цинка и 30  ледяной уксусной кислоты растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора до 1000 . Реактив хранят не более месяца.

3.1.3. Насыщенный раствор буры. 50 г тетраборнокислого натрия растворяют в 1000  теплой дистиллированной воды и охлаждают до (202)°С.

3.2. Растворы для проведения цветной реакции

3.2.1. Раствор 1. 2 г амида сульфаниловой кислоты растворяют в 400  раствора соляной кислоты (1:1) и доводят этим раствором кислоты до объема 1000 .

(Измененная редакция, Изм. N 1).

3.2.2. (Исключен, Изм. N 1).

Раствор 2. 0,25 г N-(1-нафтил)-этилендиамин дигидрохлорида растворяют в воде и добавляют до 250 . Раствор хранят в склянке из темного стекла в холодильнике не более месяца.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

3.3. Стандартные растворы азотистокислого натрия

Для приготовления основного раствора азотистокислого натрия отвешивают навеску реактива, содержащую точно 1 г азотистокислого натрия, растворяют в воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 , доводят водой до метки и перемешивают.

Пример расчета. При использовании азотистокислого натрия х. ч. массу навески (X) в граммах вычисляют по формуле

,

где 99 - масса основного вещества в 100 г реактива.

Для приготовления рабочего раствора 25  основного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 1000 , доводят водой до метки и перемешивают.

Из полученного рабочего раствора готовят серию стандартных растворов: 2; 5 и 10  рабочего раствора пипеткой вносят в три мерные колбы вместимостью 100 , доводят водой до метки и перемешивают.

Полученные стандартные растворы содержат в 1  соответственно 1,0; 2,5 и 5,0 мкг азотистокислого натрия.

Готовят три серии стандартных растворов, начиная каждый раз с приготовления основного раствора из новой навески азотистокислого натрия.

Стандартные растворы азотистокислого натрия не стойки, поэтому их готовят непосредственно перед построением градуировочного графика.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.4. Построение градуировочного графика

3.4.1. В четыре мерные колбы вместимостью 100  пипеткой вносят: в первую колбу для приготовления раствора сравнения 10  воды, а в остальные по 10  стандартных растворов, содержащих 1,0; 2,5 и 5,0 мкг азотистокислого натрия в 1  раствора.

3.4.2. В каждую колбу добавляют по 50  воды; 10  раствора 1 для проведения цветной реакции. Растворы в колбах перемешивают и выдерживают в темном месте 5 мин. Добавляют 2  раствора 2 для проведения цветной реакции, перемешивают и выдерживают в темном месте при (202)°С 3 мин.

Растворы в колбах доводят водой до метки и перемешивают.

Измеряют интенсивность красной окраски на спектрофотометре при длине волны 538 нм или фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 1 см в отношении раствора сравнения.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

3.4.3. По полученным средним данным из трех стандартных растворов строят на миллиметровой бумаге размером 25x25 см градуировочный график.

На оси абсцисс откладывают концентрацию азотистокислого натрия (в мкг в 1  окрашенного раствора); на оси ординат - соответствующую оптическую плотность.

Градуировочный график должен проходить через начало координат. Пример градуировочного графика приведен в приложении.

3.5. Приготовление растворов сравнения нитрита

3.5.1. 5  рабочего раствора, приготовленного по п. 3.3, вносят в мерную колбу вместимостью 100 , доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

1 полученного стандартного раствора содержит 2,5 мкг азотистокислого натрия.

3.5.2. Для приготовления стандартных эталонов в семь мерных колб вместимостью по 100  пипеткой вносят следующие количества раствора сравнения, приготовленного в п. 3.5.1: в первую колбу - 2 , во вторую - 4 , в третью - 6 , в четвертую - 7 , в пятую - 8 , в шестую - 10  и в седьмую - 11 . Последовательно в каждую колбу добавляют по 50  дистиллированной воды, 10  раствора 1 и выдерживают колбы в темном месте 5 мин. Затем добавляют по 2  раствора 2 и снова выдерживают в темном месте 3 мин, после чего объемы растворов в колбах доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

Полученные растворы сравнения содержат соответственно 0,050; 0,100; 0,150; 0,175; 0,200; 0,250 и 0,275 мкг азотистокислого натрия в 1  раствора.

3.5.3. В семь пробирок одинакового диаметра из бесцветного стекла наливают растворы сравнения азотистокислого натрия.

Растворы сравнения не стойки, поэтому их готовят из основного раствора непосредственно перед определением.

3.5.2, 3.5.3. (Измененная редакция, Изм. N 2).

4. Проведение анализа

4.1. Определение нитрита с помощью фотоэлектроколориметра

4.1.1. В мерную колбу вместимостью 200  помещают 10 г подготовленной к анализу пробы, взвешенной с погрешностью не более 0,001 г, добавляют последовательно 5  насыщенного раствора буры и 100  воды температурой (752) °С.

Колбу с содержимым нагревают на кипящей водяной бане 15 мин, периодически встряхивая, затем охлаждают до (202)°С и, тщательно перемешивая, последовательно добавляют по 2  реактива Карреза 1 и реактива Карреза 2, доводят до метки и выдерживают 30 мин при (202) °С. Затем содержимое колбы фильтруют через складчатый фильтр.

Полученный обезбелоченный фильтрат вносят в количестве не более 20  пипеткой в мерную колбу вместимостью 100  и проводят цветную реакцию и фотометрирование по п. 3.4.2, используя вместо стандартных растворов вышеуказанное количество обезбелоченного фильтрата.

Параллельно проводят контрольный опыт на реактивы, помещая в мерную колбу вместимостью 200  вместо 10 г пробы 10  воды.

Если полученная оптическая плотность превышает максимальную оптическую плотность на градуировочном графике, то цветную реакцию проводят с меньшим количеством фильтрата.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).

4.1.2. Обработка результатов

Массовую долю нитрита () в процентах вычисляют по формуле

,

где - массовая концентрация нитрита натрия, найденная по градуировочному графику, ;

m - навеска продукта, г;

v - количество фильтрата, взятое для фотоколориметрического измерения, ;

- коэффициент перевода в граммы.

За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений и вычисляют с точностью до 0,0001%.

Предел возможных значений относительной погрешности измерений - 2% при вероятности 0,95.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

4.1.3. Контроль точности измерений анализа

Расхождение между двумя параллельными определениями (т.е. выполненными одним аналитиком одновременно или непосредственно одно за другим) не должно превышать 0,0002%.

Расхождение между результатами, полученными в двух разных лабораториях, не должно превышать 0,0004%.

(Введен дополнительно, Изм. N 2).

4.1а. Визуальное определение предельно допустимого содержания нитрита с помощью растворов сравнения.

4.1а.1. В мерную колбу вместимостью 100  вносят пипеткой 10  обезбелоченного фильтрата, полученного по п. 4.1.1, последовательно добавляют 50  дистиллированной воды, 10  раствора 1 и выдерживают в темном месте 5 мин. Затем добавляют 2  раствора 2 и снова выдерживают в темном месте 3 мин, после чего объем раствора в колбе доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. Испытуемый окрашенный раствор наливают в пробирку из бесцветного стекла, имеющую такой же диаметр, как и пробирка для раствора сравнения (п. 3.5.3). Сравнение интенсивности окраски испытуемого раствора с окраской раствора сравнения производят визуально на фоне листа белой бумаги.

4.1а, 4.1а.1. (Введены дополнительно, Изм N 1).

4.1а.2. Обработка результатов

Массовая доля нитрита в процентах (при навеске 10 г и объеме фильтрата 10 ) указана в таблице.

Номер пробирки	Массовая концентрация нитрита в растворе сравнения,	Массовая доля нитрита, %
1 2 3 4 5 6 7	0,050 0,100 0,150 0,175 0,200 0,250 0,275	0,001 0,002 0,003 0,0035 0,004 0,005 0,0055

Массовую долю нитрита () при других разведениях в процентах вычисляют по формуле

,

где Е - массовая концентрация нитрита в растворе сравнения, который по интенсивности окраски соответствует испытуемому раствору, ;

М - навеска, г;

- количество обезбелоченного фильтрата, взятое для испытания, ;

- коэффициент перевода в граммы.

Для продуктов с допустимым содержанием нитрита не более 0,003% интенсивность окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивности окраски раствора сравнения азотисто-кислого натрия с содержанием нитрита 0,150 мкг в 1 с раствора, для продуктов с допустимым содержанием нитрита не более 0,005% - 0,250 мкг в 1 .

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).

Определение нитрита в рассоле

4.2. 25  испытуемого рассола переносят в мерную колбу вместимостью 500 , доводят объем до метки водой и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100  пипеткой вносят не более 20  разведенного рассола и далее проводят анализ, как указано в п. 3.4.2 или в п. 4.1а.

Массовую долю нитрита () в процентах вычисляют по формуле

,

где - массовая концентрация нитрита, найденная по градуировочному графику, ;

v - объем фильтрата, взятый для фотоколориметрического измерения, ;

d - плотность рассола, ;

- коэффициент перевода в граммы.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

Определение нитрита в посолочной смеси

4.3. 2,5 г испытуемой посолочной смеси взвешивают с погрешностью не более 0,01 г, полностью растворяют в воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500  и, перемешивая, доводят объем до метки. В мерную колбу вместимостью 100  пипеткой вносят не более 20  полученного раствора и далее проводят анализ, как указано в п. 3.4.2.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

5. Метод, основанный на реакции Грисса

5.1. Аппаратура, материалы и реактивы

Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025 или электрическая бытовая по ГОСТ 20469 с диаметром отверстий решетки от 3 до 4 мм.

Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104, с наибольшим пределом взвешивания 200 г, второго класса точности.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, 1-100-2 или 2-100-2; 1-200-2 или 2-200-2; 1-250-2 или 2-250-2; 1-500-2 или 2-500-2; 1-1000-2 или 2-1000-2.

Колбы конические по ГОСТ 25336, Кн-1-100-36 или Кн-2-100-36 ТХС.

Воронки по ГОСТ 25336, В-36-80, В-100-150 ХС.

Цилиндры по ГОСТ 1770, 1-50 или 3-50.

Стаканы по ГОСТ 25336, В-1-100 или Н-1-100, В-1-250 или Н-1-250 ТХС.

Фильтры обеззоленные бумажные.

Фотоэлектроколориметр марок ФЭК-М, ФЭК-56, ФЭК-57 или КФК-2.

Спектрофотометр СФ-4А.

Пипетки по НТД.

Кислота уксусная по ГОСТ 61, раствор с () = 2,0 .

Натрий азотистокислый по ГОСТ 4197, ч.д.а. или х.ч.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, ч.д.а., плотностью 1,19 , раствор с (НСl) = 0,1 .

Аммиак водный по ГОСТ 3760, раствор с () = 3,0 .

Кислота сульфаниловая безводная, по ГОСТ 5821, ч.д.а. или х. ч. -нафтиламин.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор с (NaOH) = 0,1 .

Цинк сернокислый по ГОСТ 4174, раствор 4,5 .

Пыль цинковая.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Вата медицинская по ГОСТ 5556.

Примечание. Допускается применять взамен отечественного оборудования, лабораторного стекла и реактивов соответствующие импортные. Импортные приборы должны быть аттестованы в соответствии с ГОСТ 8.326 и должны иметь также метрологические характеристики.

5.2. Подготовка к анализу

5.2.1 Растворы для проведения цветной реакции

Раствор 1. 0,5 г сульфаниловой кислоты растворяют в 150  раствора уксусной кислоты.

Раствор 2. 0,2 г -нафтиламина кипятят с 20  воды, раствор фильтруют и прибавляют к фильтрату 180  раствора уксусной кислоты. Раствор хранят в темной склянке.

Реактив Грисса. Смешивают равные объемы растворов 1 и 2. В случае появления при смешивании растворов розовой окраски добавляют цинковую пыль, взбалтывают и фильтруют. Реактив Грисса готовят непосредственно перед анализом.

5.2.2. Стандартные растворы азотистокислого натрия

Для приготовления основного раствора отвешивают навеску азотистокислого натрия, содержащую 1 г основного вещества.

Пример расчета. При использовании азотистокислого натрия ч.д.а. массу навески () в граммах вычисляют по формуле

,

где 98 - количество основного вещества, содержащегося в 100 г реактива.

Навеску переносят в мерную колбу вместимостью 1000  и доводят дистиллированной водой до метки.

Для приготовления рабочего раствора 10 основного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 500 и доводят водой до метки.

Для приготовления образцового раствора 5 рабочего раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 и доводят водой до метки. 1 образцового раствора содержит 0,001 мг (или 1 мкг) азотистокислого натрия.

5.3. Построение градуировочного графика

5.3.1. В шесть мерных колб вместимостью по 100  каждая пипеткой вносят рабочий раствор: 0; 1,0; 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 . В первую колбу рабочий раствор не вносят, используя ее как контрольную.

5.3.2. В каждую колбу добавляют 5  раствора аммиака, 10  раствора соляной кислоты, доводят водой до метки и перемешивают. В конические колбы вместимостью 100  пипеткой переносят по 15 приготовленных растворов, 15  реактива Грисса и после 15 мин выдержки при комнатной температуре измеряют интенсивность розовой окраски на спектрофотометре при длине волны 538 нм или фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром (N 6) в кювете толщиной поглощающего свет слоя 2 см в отношении раствора сравнения.

5.3.3. Готовят три серии стандартных растворов, начиная каждый раз с приготовления основного раствора из новой навески азотистокислого натрия.

5.3.4. По полученным средним данным из трех стандартных растворов строят на миллиметровой бумаге размером 25x25 см градуировочный график. На оси абсцисс откладывают массовую концентрацию нитрита натрия, , на оси ординат - соответствующие оптические плотности. Градуировочный график должен проходить через начало координат.

5.4. Проведение анализа

20 г пробы, подготовленной к анализу, взвешивают с погрешностью не более 0,01 г и помещают в химический стакан. Заливают 35 - 40  дистиллированной воды, нагретой до (552) °С, и настаивают, периодически перемешивая, в течение 10 мин. Затем вытяжку фильтруют через ватный фильтр в мерную колбу вместимостью 200 . Навеску несколько раз промывают и переносят на фильтр, где еще промывают водой, затем раствор охлаждают и доводят водой до метки.

Для приготовления вытяжки из сырокопченых продуктов из свинины, баранины, говядины и сырокопченых колбас навеску 20 г заливают 200  предварительно отмеренной и нагретой до (552)°С дистиллированной воды и настаивают, периодически помешивая, в течение 30 мин. Затем вытяжку фильтруют через ватный фильтр, не перенося осадка на фильтр.

20  вытяжки помещают в мерную колбу вместимостью 100 , добавляют 10  раствора гидроокиси натрия и 40  раствора сернокислого цинка для осаждения белков. Смесь в колбе нагревают 7 мин на кипящей водяной бане, после чего охлаждают, доводят до метки водой, перемешивают и фильтруют через обеззоленный бумажный фильтр.

Параллельно проводят контрольный анализ на реактивы, помещая в мерную колбу вместимостью 100  вместо 20  вытяжки 20  дистиллированной воды.

В коническую колбу вместимостью 100  помещают 5  прозрачного фильтрата, полученного после осаждения белков, 1  раствора аммиака, 2  раствора соляной кислоты, 2  дистиллированной воды и, для усиления окраски, 5  образцового раствора азотистокислого натрия, содержащего 1 мкг в 1 . Затем в колбу приливают 15  реактива Грисса и через 15 мин измеряют интенсивность окраски на спектрофотометре при длине волны 538 нм или на фотоколориметре с зеленым светофильтром (N 6) в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 2 см в отношении раствора сравнения.

5.5. Обработка результатов

Массовую долю нитрита () в процентах вычисляют по формуле

,

где - массовая концентрация нитрита натрия, найденная по градуировочному графику, ;

m - масса навески продукта, г;

- коэффициент перевода в граммы.

За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных определений и вычисляют с точностью до 0,0001%. Предел возможных значений относительной погрешности измерений - 2% при вероятности 0,95.

5.6. Контроль точности измерений

Расхождение между двумя параллельными определениями (т. е. выполненными одним аналитиком одновременно или непосредственно одно за другим) не должно превышать 0,0002%.

Расхождение между результатами, полученными в двух разных лабораториях, не должно превышать 0,0004%.

Разд. 5. (Введен дополнительно, Изм. N 2).

__________________

*(1) Действует ГОСТ 29299-92.

*(2) На территории Российской Федерации дополнительно действует ГОСТ Р 51447-99.

*(3) С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001 (здесь и далее).

*(4) На территории Российской Федерации действуют ПР 50.2.009-94 (здесь и далее).