Межгосударственный стандарт ГОСТ 32009-2013 (ISO 13730:1996) "Мясо и мясные продукты. Спектрофотометрический метод определения массовой доли общего фосфора" (введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 28 июня 2013 г. N 308-ст) (с изменениями и дополнениями)

Межгосударственный стандарт ГОСТ 32009-2013 (ISO 13730:1996)
"Мясо и мясные продукты. Спектрофотометрический метод определения массовой доли общего фосфора"
(введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 28 июня 2013 г. N 308-ст)

Meat and meat products. Spectrophotometric method for determination of total phosphorous content

Дата введения - 1 июля 2014 г.

Введен впервые

ГАРАНТ:

Курсив в тексте не приводится

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на все виды мяса, включая мясо птицы, мясные и мясосодержащие продукты (колбасные изделия, продукты из мяса, полуфабрикаты, кулинарные изделия, консервы) и устанавливает спектрофотометрический метод определения массовой доли общего фосфора.

Характеристики точности измерений, приведенные в настоящем стандарте, относятся только к колбасным изделиям.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования номенклатуры видов защиты ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия ГОСТ 3765-78 Реактивы. Аммоний молибденовокислый. Технические условия ГОСТ 4025-95 Мясорубки бытовые. Технические условия ГОСТ 4198-75 Реактивы. Калий фосфорнокислый однозамещенный. Технические условия ГОСТ 4461-77 Реактивы. Кислота азотная. Технические условия ГОСТ ИСО 5725-2-2003 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия ГОСТ 7269-79 Мясо. Методы отбора образцов и органолептические методы определения свежести ГОСТ 7702.2.0-95 Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты птичьи. Методы отбора проб и подготовка к микробиологическим исследованиям ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия ГОСТ 9336-75 Реактивы. Аммоний ванадиево-кислый мета. Технические условия ГОСТ 9792-73 Колбасные изделия и продукты из свинины, баранины, говядины и мяса других видов убойных животных и птиц. Правила приемки и методы отбора проб ГОСТ 19908-90 Тигли, чашки, стаканы, колбы, воронки, пробирки и наконечники из прозрачного кварцевого стекла. Общие технические условия ГОСТ 20469-95 Электромясорубки бытовые. Технические условия ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры ГОСТ 29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой ГОСТ 31727-2012 (ISO 936:1998) Мясо и мясные продукты. Метод определения массовой доли общей золы

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети "Интернет" или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:

3.1 массовая доля общего фосфора в мясе и мясных продуктах: Массовая доля фосфора, определенная в соответствии с методикой, изложенной в настоящем стандарте, и выраженная как массовая доля пентоксида (пятиокиси) фосфора в процентах.

4 Сущность метода

Метод основан на высушивании навески, озолении остатка с последующим охлаждением и гидролизом золы азотной кислотой, фильтровании, разбавлении фильтрата смесью монованадата аммония и гептамолибдата аммония с образованием соединения желтого цвета и фотометрическом измерении оптической плотности при длине волны 430 нм.

5 Реактивы

Все реактивы должны быть аналитического качества (не ниже х.ч.). Используемая вода должна быть дистиллированной или деминерализованной, или эквивалентной частоты.

5.1 Кислота азотная по ГОСТ 4461, разбавленная 1:2 (по объему)

Смешивают один объем азотной кислоты (массовая доля 65%; = 1,40 ) с двумя объемами воды.

5.2 Монованадат аммония () (аммоний ванадиевокислый мета) по ГОСТ 9336, раствор массовой концентрацией 2,5

Растворяют 2,5 г монованадата аммония в 500  кипящей воды. Охлаждают и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 . Добавляют 20  разбавленной азотной кислоты, доводят объем до метки водой и перемешивают.

5.3 Гептамолибдат аммония (аммоний молибденовокислый) по ГОСТ 3765, раствор массовой концентрацией 50

Растворяют 50 г тетрагидрата гептамолибдата аммония примерно в 800  теплой воды (температура приблизительно 50°С), охлаждают и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 . Доводят объем до метки водой и перемешивают.

5.4 Окрашивающий реактив

Смешивают один объем разбавленной азотной кислоты (5.1) с одним объемом раствора монованадата аммония (5.2). Затем добавляют один объем раствора гептамолибдата аммония (5.3) и перемешивают. При этом окрашивающий реактив должен быть прозрачным, светло-желтого цвета.

5.5 Фосфат, основной раствор с массовой концентрацией с (Р) = 218 

Растворяют в воде 958,8 мг дигидроортофосфата калия () (фосфорнокислого калия однозамещенного) по ГОСТ 4198, предварительно высушенного в течение 3 ч при температуре (1032)°С и охлажденного в эксикаторе.

Количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000  (6.7). Доводят водой до метки и перемешивают. Данный раствор содержит 500  пятиокиси фосфора ().

5.6 Фосфат, стандартные растворы массовой концентрацией от 0,05 до 0,30 .

В мерные колбы вместимостью 100  (6.7) вносят пипеткой или бюреткой 10, 20, 30, 40, 50 и 60  основного раствора фосфата (5.5). Добавляют в каждую колбу по 10  разбавленной азотной кислоты (5.1). Доводят объем до метки водой и перемешивают.

Полученные стандартные растворы содержат 0,05; 0,10; 0,15; 0,20; 0,25 и 0,30  соответственно.

5.7 Контрольный раствор

В мерную колбу вместимостью 100  (6.7) вносят пипеткой 2  разбавленной азотной кислоты (5.1) и 30  окрашивающего реактива (5.4). Доводят объем до метки водой и перемешивают.

5.8 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 или вода для лабораторного анализа.

6 Аппаратура

Примечание - Всю стеклянную посуду необходимо тщательно вымыть моющим средством, не содержащим фосфатов, затем ополоснуть водой.

Применяют обычное лабораторное оборудование, и, в частности, следующее.

6.1 Гомогенизатор или мясорубка механическая по ГОСТ 4025 или электрическая по ГОСТ 20469, с решеткой, диаметр отверстий которой не более 4,5 мм.

6.2 Баня водяная, обеспечивающая поддержание температуры на уровне 100°С.

6.3 Фильтр бумажный складчатый диаметром 15 см, не содержащий фосфатов.

6.4 Спектрофотометр, обеспечивающий измерение при длине волны (4302) нм, или фотоэлектроколориметр со светофильтром, имеющим максимум поглощения при длине волны (4302) нм.

6.5 Кюветы стеклянные с длиной рабочей грани 10 мм.

6.6 Весы аналитические с допускаемой погрешностью взвешивания не более 0,001 г по ГОСТ 24104.

6.7 Колбы мерные с одной отметкой по ГОСТ 1770, вместимостью 100 и 1000 .

6.8 Печь муфельная с электрическим обогревом, способная поддерживать температуру (55025)°С, с программируемым устройством управления температурой в зависимости от времени или без него.

6.9 Чашка с плоским дном из фарфора, кварца или металла, например никеля, платины, нержавеющей стали, не подверженного воздействию условий испытания, диаметром 60 мм и наклонными стенками высотой 25 мм или тигли фарфоровые по ГОСТ 9147 или тигли кварцевые по ГОСТ 19908.

6.10 Пипетки мерные по ГОСТ 29169, вместимостью 10, 20 и 50 .

6.11 Эксикатор по ГОСТ 25336.

Примечание - Для уточнения приведенного перечня аппаратуры, используемой при озолении, см. ГОСТ31727.

7 Отбор проб

Отбор проб - по ГОСТ 7269, ГОСТ 9792, ГОСТ 7702.2.0.

Проба должна быть представительной, а также без повреждений и изменений при транспортировании и хранении.

От представительной пробы отбирают пробу массой не менее 200 г.

Пробу хранят таким образом, чтобы предотвратить порчу и изменение химического состава.

8 Подготовка проб

Пробу измельчают на гомогенизаторе или дважды пропускают через мясорубку (6.1), и тщательно перемешивают. При этом температура пробы должна быть не более 25°С. Подготовленную пробу помещают в воздухонепроницаемый сосуд, закрывают и хранят таким образом, чтобы предотвратить порчу и изменение состава продукта. Образец следует использовать для анализа по возможности быстро, но не позже, чем через 24 ч после измельчения.

9 Порядок проведения испытания

9.1 Около 5 г подготовленной пробы взвешивают с записью результата взвешивания до третьего десятичного знака.

9.2 Проведение испытания

9.2.1 Минерализацию навески (9.1) проводят в муфельной печи (6.8) в соответствии с [3].

9.2.2 Полученную золу растворяют в 10  разбавленной азотной кислоты (5.1), помешивая стеклянной палочкой.

9.2.3 Чашку (тигель) накрывают часовым стеклом и нагревают в течение 30 мин на кипящей водяной бане (6.2), охлаждают и количественно переносят жидкость в мерную колбу вместимостью 100  (6.7). Доводят объем до метки водой, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр (6.3), отбрасывая первые 5-10  фильтрата.

9.2.4 В мерную колбу вместимостью 100  (6.7) вносят 20  прозрачного и бесцветного фильтрата и добавляют 30  окрашивающего реактива (5.4). Содержимое колбы доводят до метки водой, перемешивают выдерживают не менее 15 мин.

9.2.5 Измеряют оптическую плотность раствора при длине волны (4302) нм в стеклянной кювете (6.5) относительно контрольного раствора (5.7), используя спектрофотометр или фотоэлектроколориметр со светофильтром (6.4).

9.2.6 По градуировочному графику, построенному в соответствии с 9.3, находят концентрацию фосфора в растворе образца.

9.3 Градуировочный график

9.3.1 В мерные колбы вместимостью 100  (6.7) вносят по 20  каждого стандартного раствора фосфата (5.6).

К этим растворам добавляют по 30  окрашивающего реактива (5.4). Доводят объем до метки водой для получения концентраций 10, 20, 40, 50 и 60  соответственно. Содержимое колб перемешивают и выдерживают не менее 15 мин.

9.3.2 Измеряют оптическую плотность в соответствии с 9.2.5.

9.3.3 Строят градуировочный график, откладывая измеренные значения оптической плотности против соответствующих концентраций разбавленных стандартных растворов фосфата (9.3.1) и проводя прямую линию через отложенные точки и начало координат.

Для каждой серии анализов строят новый градуировочный график.

9.4 Для проверки выполнения условий повторяемости (сходимости) проводят два единичных определения в соответствии с 9.1 - 9.3.

10 Обработка результатов

Массовую долю общего фосфора X, выраженную в виде массовой доли пентоксида (пятиокиси) фосфора, %, вычисляют по формуле

,

(1)

где С - концентрация пятиокиси фосфора в растворе образца (9.2.4), найденная по градуировочному графику, ;

20 - объем фильтрата отобранный из количественно перенесенной и растворенной в азотной кислоте золы, для проведения цветной реакции, ;

m - масса навески, г (9.1).

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение двух параллельных определений, округленное до второго десятичного знака, если удовлетворяются условия повторяемости (сходимости). Удовлетворение данных условий следует относить только к колбасным изделиям.

11 Контроль точности метода

Точность метода установлена межлабораторными испытаниями только для колбасных изделий [1], [2], выполненными в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-2.

Метрологические характеристики метода при доверительной вероятности Р = 0,95 приведены в таблице 1.

Таблица 1

Наименование определяемого показателя	Показатели точности
	Диапазон измерений массовой доли, %	Границы относительной погрешности , %	Предел повторяемости (сходимости) r, %	Предел воспроизводимости R, %
Фосфор	От 0,01 до 0,5 включ.	15	0,10	0,25
	Св. 0,5 до 1,5 включ.	8	0,05	0,1
Примечания 1 - среднеарифметическое результатов двух параллельных определений, %. 2 - среднеарифметическое результатов двух определений, выполненных в разных лабораториях, %.

Расхождение между результатами двух параллельных определений, выполненных одним оператором при анализе одной и той же пробы с использованием одних и тех же средств измерений и реактивов, не должно превышать предела повторяемости (сходимости) r, значения которого приведены в таблице 1.

,

(2)

где и - результаты двух параллельных измерений, %;

r - предел повторяемости, %.

Расхождение между результатами двух определений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости R, значения которого приведены в таблице 1.

,

(3)

где и - результаты двух определений, выполненных в разных лабораториях, %;

R - предел воспроизводимости, %.

Границы относительной погрешности, результата измерений () Р = 0,95, при соблюдении условий настоящего стандарта, не должны превышать значений, приведенных в таблице 1.

12 Оформление результатов испытаний

Протокол испытаний должен включать:

- ссылку на метод, в соответствии с которым проводился отбор проб;

- ссылку на используемый метод испытания;

- полученные результаты;

- если проверена повторяемость (сходимость), окончательно полученные результаты.

В протоколе испытаний должны быть отражены все подробности проведения испытания, не предусмотренные настоящим стандартом или рассматриваемые как необязательные, а также любые факторы, влияющие на результаты испытания.

Протокол испытаний должен содержать всю информацию, необходимую для полной идентификации образца.

13 Требования безопасности 13.1 При подготовке и проведении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007. 13.2 Помещение, в котором проводят измерения, должно быть снабжено приточно-вытяжной вентиляцией. Работу необходимо проводить, соблюдая правила личной гигиены и противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. 13.3 При работе с электроприборами необходимо соблюдать требования безопасности по ГОСТ 12.1.019.

Библиография

[1]	Bundesverband der Deutschen Feinkostindustrie eV Untersuchungs-methoden fur die Feinkostindustrie. Bonn, Germany, 1978
[2]	Bestimmung des Gesamtphosphjrgehaltes in Fleisch und Fleischerzeugnissen. Amrliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach §35 LMGB, Method 06.00-9, Beuth Verlag, Berlin, December 1992