Межгосударственный стандарт ГОСТ 31941-2012 "Вода питьевая. Методы определения содержания 2,4-Д" (введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 12 декабря 2012 г. N 1902-ст)

Drinking water. Methods for determination of 2,4-D

Дата введения - 1 января 2014 г.

Введен впервые

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 Подготовлен Обществом с ограниченной ответственностью "Протектор" совместно с Муниципальным унитарным предприятием "Уфаводоканал", Закрытым акционерным обществом "Центр исследования и контроля воды", группой компаний "Люмэкс"

2 Внесен Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт)

3 Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 3 декабря 2012 г. N 54)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97	Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97	Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Беларусь	BY	Госстандарт Республики Беларусь
Казахстан	KZ	Госстандарт Республики Казахстан
Киргизия	KG	Кыргызстандарт
Россия	RU	Росстандарт
Узбекистан	UZ	Узстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 12 декабря 2012 г. N 1902-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 31941-2012 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2014 г.

Настоящий стандарт подготовлен на основе применения ГОСТ Р 52730-2007

5 Введен впервые

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на питьевую воду, природные (поверхностные и подземные) воды, в том числе источники питьевого водоснабжения, и устанавливает следующие методы определения массовой концентрации 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты (далее - 2,4-Д):

- высокоэффективная жидкостная хроматография в диапазоне измерений массовых концентраций от 0,01 до 0,5  без предварительного концентрирования из пробы воды (метод 1), в диапазоне измерений массовых концентраций от 0,0002 до 0,01  с предварительным экстракционным концентрированием из пробы воды (метод 2);

- капиллярный электрофорез в диапазоне измерений массовых концентраций от 0,003 до 0,1  с предварительным концентрированием из пробы воды (метод 3).

Метод 2 может быть применен для анализа питьевой воды, расфасованной в емкости.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий

ГОСТ 17.1.5.05-85 Охрана природы. Гидросфера. Общие требования к отбору проб поверхностных и морских вод, льда и атмосферных осадков

ГОСТ 61-75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 2603-79 Реактивы. Ацетон. Технические условия

ГОСТ 3118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ 4166-76 Реактивы. Натрий сернокислый. Технические условия

ГОСТ 4198-75 Реактивы. Калий фосфорнокислый однозамещенный. Технические условия

ГОСТ 4199-76 Реактивы. Натрий тетраборнокислый 10-водный. Технические условия

ГОСТ 4233-77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия

ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия

ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия

ГОСТ 20298-74 Смолы ионообменные. Катиониты. Технические условия

ГОСТ 20301-74 Смолы ионообменные. Аниониты. Технические условия

ГОСТ 23932-90 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Общие технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 27065-86 Качество вод. Термины и определения

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 30813-2002 Вода и водоподготовка. Термины и определения

ГОСТ 31861-2012 Вода. Общие требования к отбору проб

ГОСТ 31862-2012 Вода питьевая. Отбор проб

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети "Интернет" или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ 30813 и ГОСТ 27065.

4 Отбор проб

Пробы воды отбирают по ГОСТ 31861, ГОСТ 31862 и ГОСТ 17.1.5.05 в емкости из стекла вместимостью 2 в случае применения методов 1 или 2 и вместимостью не менее 0,2 в случае применения метода 3, закрывают притертыми стеклянными пробками или завинчивающимися крышками с прокладкой из инертного материала.

Пробу воды до начала анализа хранят не более 12 ч, а при температуре от 2°С до 8°С - не более 3 сут.

Для воды, расфасованной в емкости, сроки и температурные условия хранения должны соответствовать требованиям, указанным в нормативной документации* на готовую продукцию.

5 Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии

Метод основан на разделении компонентов пробы воды или компонентов экстракта из пробы воды на хроматографической колонке в обращенно-фазовом варианте высокоэффективной жидкостной хроматографии и детектировании на спектрофотометрическом детекторе при длине волны поглощения = 230 нм с последующей идентификацией 2,4-Д по времени удерживания пиков на хроматограммах пробы и градуировочного раствора и вычислении массовой концентрации 2,4-Д с использованием градуировочной характеристики.

На определение 2,4-Д в воде мешающее влияние могут оказывать загрязнения реактивов, стеклянной посуды, оборудования, а также матричные примеси пробы, которые элюируются из хроматографической колонки при выбранных условиях одновременно с 2,4-Д. Загрязнение реактивов, стеклянной посуды выявляется при проведении анализа холостых проб. Влияние загрязнений можно устранить применением особо чистых растворителей и реактивов, прокаливанием солей и стеклянной посуды.

Определению 2,4-Д в природных водах может мешать высокое содержание гуминовых веществ и других компонентов природных вод. Для устранения влияния примесей рекомендуется изменить условия хроматографического разделения (например, использовать градиентное элюирование). Условия разделения в таких случаях подбираются индивидуально для различных типов анализируемых вод на этапе внедрения методики в лаборатории.

Метод 2 для идентификации и установления влияния матричных примесей позволяет использовать сравнительное детектирование 2,4-Д при длинах волн поглощения , равных 230 и 285 нм. При этом отношение площадей (высот) пиков 2,4-Д на полученных хроматограммах - () - должно быть постоянным и при принятых условиях разделения должно находиться в пределах (4,90,2). Отклонение от указанного значения свидетельствует о присутствии примесей, которые накладываются на пик 2,4-Д.

5.1 Определение 2,4-Д без предварительного концентрирования из пробы воды (метод 1)

5.1.1 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы, материалы

Хроматограф жидкостный, оборудованный следующими устройствами:

- изократическим или градиентным насосом постоянного расхода;

- устройством для дегазации элюента (например, типа "On Line Degasser");

- хроматографической колонкой (например, типа "Silasorb Shp, С18" диаметром частиц 9 мкм или "Hypersil ODS" диаметром частиц 5 мкм) размером 250 х 2,1 мм;

- спектрофотометрическим детектором, обеспечивающим регистрацию сигналов в диапазоне длин волн поглощения от 190 до 600 нм;

- инжектором с петлей объемом 0,02  (например, типа "Reodyne");

- интегратором или компьютером с программным обеспечением.

Государственный (межгосударственный) стандартный образец (далее - ГСО) состава 2,4-Д с аттестованным значением массовой доли не менее 98% и погрешностью аттестованного значения не более 2% при доверительной вероятности Р = 0,95.

Весы лабораторные** с наибольшим пределом взвешивания 220 г, обеспечивающие точность взвешивания с пределом допускаемой абсолютной погрешности не более 0,75 мг.

рН-метр любого типа, обеспечивающий точность измерения 0,05 ед. рН.

Колбы мерные по ГОСТ 1770 2-го класса точности вместимостью 100, 500, 1000 .

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770 2-го класса точности вместимостью 50, 100, 500, 1000 .

Пипетки градуированные по ГОСТ 29227 2-го класса точности вместимостью 0,5; 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 .

Шприцы для жидкостной хроматографии (например, типа "Hamilton") вместимостью 0,1  и 0,5  с погрешностью дозирования не более 5%.

Шкаф сушильный любого типа, поддерживающий температуру от 50°С до 200°С с погрешностью не более 5°С.

Стаканы лабораторные по ГОСТ 25336 вместимостью 50, 100, 400, 1000 .

Бутыли из стекла для отбора и хранения проб по ГОСТ 23932 вместимостью 2000 .

Посуда лабораторная стеклянная по ГОСТ 25336.

Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, ос.ч.

Тиосульфат натрия, ч.д.а.

Калий фосфорнокислый однозамещенный по ГОСТ 4198, х.ч.

Гидроокись натрия по ГОСТ 4328, ч.д.а.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч.

Кислота уксусная ледяная по ГОСТ 61, х.ч.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Бумага индикаторная универсальная.

Гелий сжатый очищенный.

Бутыли из стекла со шлифом вместимостью 1 .

Емкости из темного стекла с притертыми пробками или завинчивающимися крышками с фторопластовыми прокладками вместимостью 100  и 500 .

Емкости полиэтиленовые с завинчивающимися крышками вместимостью 250 .

Примечание - Допускается применять другие средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы, в том числе импортные, с метрологическими и техническими характеристиками не хуже указанных в 5.1.1.

5.1.2 Подготовка к анализу

5.1.2.1 Подготовка посуды

Посуду, используемую для отбора, хранения, транспортирования и анализа проб воды, моют хромовой смесью, ополаскивают большим количеством водопроводной воды, затем дистиллированной водой и выдерживают в сушильном шкафу при температуре от 150°С до 200°С в течение 1 ч. После охлаждения посуду хранят в закрытом шкафу.

5.1.2.2 Приготовление элюента

Готовят 0,001 М раствор калия фосфорнокислого однозамещенного (далее - дигидрофосфат калия) следующим способом: в мерную колбу вместимостью 1000  вносят навеску 0,136 г дигидрофосфата калия, растворяют в дистиллированной воде и доводят до метки дистиллированной водой.

В мерную колбу вместимостью 1000  вносят 300  ацетонитрила (30% по объему), 0,2  ледяной уксусной кислоты (0,02% по объему) и доводят объем элюента до метки 0,001 М раствором дигидрофосфата калия (69,98% по объему), тщательно перемешивают. Приготовленный элюент переносят в стеклянную емкость вместимостью 1000 .

Если хроматограф не снабжен системой динамической дегазации (например, типа "On Line Degasser"), элюент перед использованием дегазируют продувкой гелием в течение 30 мин.

Примечание - Приготовление всех растворов проводят при температуре (203)°С с использованием реактивов, предварительно термостатированных при температуре (203)°С.

5.1.2.3 Приготовление 10%-ного раствора соляной кислоты

В стеклянную емкость вместимостью 500  вносят 260  дистиллированной воды и 100  соляной кислоты, перемешивают. Раствор хранят в емкости из темного стекла не более года.

5.1.2.4 Приготовление разбавленного раствора соляной кислоты

В стакан вместимостью 1000  вносят 500  дистиллированной воды и около 2  10%-ного раствора соляной кислоты (см. 5.1.2.3). С помощью рН-метра измеряют рН раствора и доводят до значения рН, равного (2,000,05), внесением дополнительного объема 10%-ного раствора соляной кислоты или дистиллированной воды.

Приготовленный раствор соляной кислоты переносят в стеклянную емкость с притертой пробкой. Разбавленный раствор соляной кислоты готовят в день проведения градуировки, раствор хранению не подлежит.

5.1.2.5 Приготовление исходного раствора 2,4-Д с массовой концентрацией 100 

Исходный раствор 2,4-Д с массовой концентрацией 100  готовят из ГСО состава 2,4-Д следующим способом: в мерную колбу вместимостью 100  вносят от 30 до 50  ацетонитрила и 0,01 г 2,4-Д, растворяют при перемешивании (если требуется, подогревают на водяной бане), спустя 1 ч объем раствора доводят до метки ацетонитрилом и тщательно перемешивают. Раствор хранят в емкости из темного стекла с притертой пробкой или завинчивающейся крышкой с фторопластовой прокладкой при температуре от 2°С до 8°С не более 6 мес.

5.1.2.6 Приготовление промежуточного раствора 2,4-Д с массовой концентрацией 10 

В мерную колбу вместимостью 100  пипеткой вместимостью 10  вносят 10  исходного раствора 2,4-Д (см. 5.1.2.5), доводят объем раствора до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.

Приготовленный промежуточный раствор 2,4-Д переносят в емкость из темного стекла, хранят при температуре от 2°С до 8°С не более 1 мес.

5.1.2.7 Приготовление градуировочных растворов 2,4-Д

Градуировочные растворы 2,4-Д готовят из промежуточного раствора (см. 5.1.2.6) следующим способом: в шесть мерных колб вместимостью 100 , начиная со второй колбы, пипетками вместимостью 0,5; 1 и 5  вносят соответственно 0,1; 0,2; 0,3; 1,0 и 5,0  промежуточного раствора (в первую колбу промежуточный раствор не вносят). Объем каждой колбы доводят до метки разбавленным раствором соляной кислоты (см. 5.1.2.4), при этом получают растворы массовых концентраций 2,4-Д соответственно: 0,00; 0,01; 0,02; 0,03; 0,1 и 0,5 . Градуировочные растворы 2,4-Д готовят в день проведения градуировки, растворы хранению не подлежат.

5.1.2.8 Подготовка хроматографа

Подготовку хроматографа к работе осуществляют в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации.

Рекомендуемые условия хроматографирования:

    скорость потока,  .................................. 0,4;

    длина волны поглощения, нм .................................. 230;

    объем дозирующей петли,  ................................. 0,02;

    режим элюирования ........................................... изократический.

Примечание - Допускается изменять условия хроматографирования при обеспечении выполнения анализа с метрологическими характеристиками, установленными в настоящем стандарте.

5.1.2.9 Градуировка прибора

Градуировочные растворы (см. 5.1.2.7) анализируют в порядке возрастания массовой концентрации 2,4-Д в линейном диапазоне спектрофотометрического детектора в условиях по 5.1.2.8. Каждый раствор хроматографируют не менее двух раз.

На полученных хроматограммах идентифицируют пик 2,4-Д и устанавливают соответствующее ему время удерживания, которое используют для идентификации 2,4-Д в анализируемых пробах воды.

Используя программное обеспечение к прибору или компьютерные программы, предназначенные для обработки градуировочных характеристик, строят градуировочную характеристику, проходящую через начало координат, в виде зависимости значений площади (высоты) пика на хроматограмме от массовой концентрации 2,4-Д в градуировочном растворе. В процессе обработки данных фиксируют значение коэффициента линейной корреляции. Градуировка признается удовлетворительной, если коэффициент корреляции не менее 0,98. Устанавливают градуировочный коэффициент b, получаемый в виде отношения значений площади (высоты) пика к массовой концентрации 2,4-Д:

или ,

(1)

где - массовая концентрация 2,4-Д в градуировочном растворе, ;

() - значение площади (высоты) пика 2,4-Д, выраженное в условных единицах абсорбции (поглощения).

Построение градуировочной характеристики проводят не реже одного раза в 6 мес, а также при смене реактивов, колонки или после ремонта прибора, связанного с нарушением условий хроматографирования.

5.1.2.10 Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят ежедневно. В качестве средства контроля используют один из градуировочных растворов по 5.1.2.7 с массовой концентрацией 2,4-Д в средней области диапазона измерений. Градуировочную характеристику считают стабильной, если расхождение между заданным и измеренным значениями массовой концентрации 2,4-Д относительно заданного значения не превышает 10%.

В случае превышения допускаемого расхождения выясняют причины и проводят повторную градуировку прибора, используя свежеприготовленные градуировочные растворы.

5.1.2.11 Контроль стабильности времени удерживания

Контроль стабильности времени удерживания 2,4-Д проводят по хроматограммам градуировочного раствора (см. 5.1.2.10), который анализируют 2 - 3 раза в течение рабочего дня, чередуя с анализом рабочих проб. При этом отклонение значений времени удерживания от первоначального должно быть не более 10%.

5.1.2.12 Подготовка пробы воды к анализу

Перед анализом пробу исследуемой воды подкисляют 10%-ным раствором соляной кислоты (см. 5.1.2.3) до значения рН, равного (2,000,05), измеренного с помощью рН-метра. Объемы пробы и раствора соляной кислоты измеряют и учитывают при обработке результатов анализа.

Примечание - Для определения общего содержания 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты, ее солей и эфиров (в виде свободной 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты) необходимо провести щелочной гидролиз в соответствии с требованиями приложения А.

5.1.3 Проведение анализа

5.1.3.1 Хроматографический анализ холостой пробы

Холостая проба представляет собой аликвоту дистиллированной воды, подготовленную к хроматографическому анализу аналогично исследуемой пробе воды (см. 5.1.2.12). Холостую пробу анализируют для выявления присутствия мешающих примесей в реактивах, стеклянной посуде и т.д. Анализ проводят при условиях хроматографирования по 5.1.2.8.

Содержание мешающих примесей при анализе холостой пробы не должно превышать 10% от значения минимально определяемой концентрации 2,4-Д.

5.1.3.2 Хроматографический анализ пробы воды

Каждую пробу воды (см. 5.1.2.12) анализируют не менее двух раз при условиях хроматографирования по 5.1.2.8.

5.1.3.3 Идентификацию 2,4-Д в пробе проводят по соответствию времени удерживания пика 2,4-Д на хроматограмме анализируемой пробы воды и хроматограмме градуировочного раствора.

5.1.3.4 По полученным хроматограммам определяют площадь (высоту) пика 2,4-Д.

5.1.4 Обработка результатов анализа

5.1.4.1 Массовую концентрацию 2,4-Д, X, , в анализируемой пробе воды рассчитывают по формуле

или ,

(2)

где () - площадь (высота) пика 2,4-Д на хроматограмме анализируемой пробы воды, усл. ед. абсорбции;

b - градуировочный коэффициент, установленный по 5.1.2.9;

- объем анализируемой пробы воды, ;

- объем 10%-ного раствора соляной кислоты, израсходованный для подкисления анализируемой пробы воды (см. 5.1.2.12), .

5.1.4.2 За результат измерений массовой концентрации 2,4-Д принимают среднеарифметическое значение результатов параллельных определений и в двух аликвотах пробы воды. Приемлемость результатов определения оценивают, исходя из условия

,

(3)

где r - значение предела повторяемости по таблице 1.

При невыполнении условия (3) используют методы проверки приемлемости результатов параллельных определений и установления окончательного результата измерений согласно [1] (подраздел 5.2) или [2].

Примечание - При получении результатов измерений в двух лабораториях и за результат измерений принимают среднеарифметическое значение результатов измерений, полученных в двух лабораториях при выполнении условия

,

(4)

где R - значение предела воспроизводимости по таблице 1.

При невыполнении условия (4) для проверки приемлемости в условиях воспроизводимости каждая лаборатория должна выполнить процедуры согласно [1] (5.2.2, 5.3.2.2) или [2].

5.1.5 Метрологические характеристики

Метод обеспечивает получение результатов измерения с метрологическими характеристиками, не превышающими значений, приведенных в таблице 1, при доверительной вероятности Р = 0,95.

Таблица 1

Диапазон измерений массовой концентрации 2,4-Д,	Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных определений при Р = 0,95) r, %	Предел воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами определений, полученными в условиях воспроизводимости при Р = 0,95) R, %	Показатель точности (границы* допускаемой относительной погрешности при вероятности Р = 0,95) , %
От 0,01 до 0,5 включ.	28	33	26
* Установленные численные значения границ допускаемой относительной погрешности соответствуют численным значениям расширенной неопределенности (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2.

5.1.6 Контроль показателей качества результатов измерений

Контроль показателей качества результатов измерений в лаборатории предусматривает проведение контроля стабильности результатов измерений с учетом требований [1] (раздел 6) и [3].

5.1.7 Оформление результатов измерений

Результаты измерений регистрируют в протоколе, который оформляют в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО/МЭК 17025, при этом протокол должен содержать ссылку на настоящий стандарт с указанием метода определения.

Результаты измерений массовой концентрации 2,4-Д X, , представляют в виде (при подтвержденном в лаборатории соответствии аналитической процедуры требованиям настоящего стандарта)

либо ,

(5)

где - результат измерений, полученный в соответствии с процедурами по 5.1.3 и 5.1.4;

- абсолютная погрешность измерений массовой концентрации 2,4-Д, , рассчитываемая по формуле

,

где - относительная погрешность измерения массовой концентрации 2,4-Д по таблице 1, %;

,

где - расширенная неопределенность (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2 по таблице 1.

Допускается результат измерений представлять в виде

, ,

(6)

при условии , где - значение показателя точности измерений (доверительные границы абсолютной погрешности измерений), установленное при реализации настоящего метода в лаборатории и обеспечиваемое контролем стабильности результатов измерений;

, ,

(7)

при условии , где - значение расширенной неопределенности, установленное при реализации настоящего метода в лаборатории с учетом [4] или [5] и обеспечиваемое контролем стабильности результатов измерений в лаборатории.

5.2 Определение 2,4-Д с предварительным экстракционным концентрированием из пробы воды (метод 2)

5.2.1 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы, материалы - по 5.1.1 со следующими дополнениями:

- пипетки градуированные по ГОСТ 29227 2-го класса точности вместимостью 20 ;

- шприц типа "Рекорд" вместимостью 2  с погрешностью дозирования не более 5%;

- делительная воронка по ГОСТ 25336 вместимостью 1000 ;

- колбы с притертыми пробками по ГОСТ 25336 вместимостью 100, 1000 ;

- воронки лабораторные по ГОСТ 25336;

- эксикатор по ГОСТ 25336;

- концентратор Кудерна-Даниша (для концентрирования экстрактов);

- баня водяная любого типа;

- плитка электрическая с закрытой спиралью по ГОСТ 14919;

- электрическая муфельная печь любого типа (например, "Аверон 011У"), обеспечивающая температуру 400°С с погрешностью не более 20°С;

- хлористый метилен, х.ч.;

- натрий хлористый по ГОСТ 4233, ч.д.а.;

- натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166, ч.д.а.

Примечание - Допускается применять другие средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы с метрологическими и техническими характеристиками не хуже указанных в 5.1.1 и 5.2.1, в том числе импортные.

5.2.2 Подготовка к проведению анализа - по 5.1.2 со следующими дополнениями.

5.2.2.1 Приготовление натрия сернокислого безводного

Перед использованием натрий сернокислый безводный прокаливают в муфельной печи при температуре 400°С в течение 4 ч в мелком поддоне. Прокаленный сернокислый натрий хранят в стеклянной емкости с притертой пробкой в эксикаторе.

5.2.2.2 Приготовление натрия хлористого

Перед использованием натрий хлористый прокаливают в муфельной печи при температуре 400°С в течение 4 ч в мелком поддоне. Прокаленный натрий хлористый хранят в стеклянной емкости с притертой пробкой не более 1 мес.

5.2.2.3 Приготовление промежуточного раствора 2,4-Д с массовой концентрацией 10 

Промежуточный раствор с концентрацией 10  готовят из исходного раствора (см. 5.1.2.5) следующим образом: пипеткой вместимостью 10  отбирают 10  исходного раствора 2,4-Д, переносят в мерную колбу вместимостью 100 , доводят объем раствора до метки ацетонитрилом и тщательно перемешивают.

Промежуточный раствор 2,4-Д переносят в емкость из темного стекла, хранят при температуре от 2°С до 8°С в течение 3 мес.

5.2.2.4 Приготовление градуировочных растворов 2,4-Д

Градуировочные растворы 2,4-Д готовят из промежуточного (см. 5.2.2.3) и исходного (см. 5.1.2.5) растворов следующим образом: в семь мерных колб вместимостью 100 , начиная со второй колбы, пипетками вместимостью 2; 5; 10 и 20  вносят соответствующий объем выбранного добавляемого раствора (см. таблицу 2), при этом в первую колбу раствор 2,4-Д не вносят. Затем в каждую колбу вносят требуемый объем ацетонитрила (см. таблицу 2) и доводят до метки дистиллированной водой, при этом получают градуировочные растворы с массовой концентрацией 2,4-Д, приведенной в таблице 2.

Таблица 2

Массовая концентрация 2,4-Д в градуировочном растворе,	Добавляемый раствор			Требуемый объем ацетонитрила,
	Наименование раствора	Массовая концентрация 2,4-Д,	Объем,
0,0	-	-	-	30
0,2	Промежуточный	10	2	28
0,5	Промежуточный	10	5	25
1	Промежуточный	10	10	20
2	Промежуточный	10	20	10
5	Исходный	100	5	25
10	Исходный	100	10	20

Градуировочные растворы 2,4-Д хранят в емкостях из темного стекла при температуре от 2°С до 8°С не более 1 мес.

5.2.2.5 Подготовка хроматографа

Подготовка хроматографа - по 5.1.2.8.

5.2.2.6 Градуировка прибора

Градуировка хроматографа - по 5.1.2.9, при этом для градуировки используют градуировочные растворы 2,4-Д, приготовленные по 5.2.2.4.

5.2.2.7 Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики - по 5.1.2.10, при этом в качестве средства контроля применяют один из градуировочных растворов, приготовленных по 5.2.2.4.

5.2.2.8 Контроль стабильности времени удерживания

Контроль стабильности времени удерживания 2,4-Д проводят по 5.1.2.11, при этом в качестве средства контроля используют градуировочный раствор по 5.2.2.4.

5.2.2.9 Подготовка пробы воды к анализу

Перед проведением экстракции пробу анализируемой воды делят на две аликвоты по 1 . В каждую аликвоту добавляют 10%-ный раствор соляной кислоты до значения рН, равного (2,000,05), измеренного с помощью рН-метра. Затем проводят экстракцию 2,4-Д из двух аликвот пробы анализируемой воды по способу 1 приложения Б до получения сухого остатка экстракта.

Примечание - Для определения общего содержания 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты, ее солей и эфиров (в виде свободной 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты) необходимо провести щелочной гидролиз в соответствии с требованиями приложения А.

5.2.3 Проведение анализа

5.2.3.1 Перед анализом сухой остаток экстракта растворяют, вводя шприцем 0,3  ацетонитрила, тщательно омывая стенки концентраторной пробирки, и перемешивают. Затем вносят 0,7  дистиллированной воды и встряхивают для равномерного распределения компонентов экстракта.

Примечание - Объем исходной пробы и объем раствора сухого остатка могут быть иными, но должны быть точно измерены и учтены при обработке результатов анализа.

5.2.3.2 Хроматографический анализ раствора сухого остатка экстракта из холостой пробы

Холостая проба представляет собой аликвоту дистиллированной воды. Подготовку к анализу холостой пробы проводят аналогично подготовке к анализу исследуемой пробы воды по 5.2.2.9. Хроматографирование раствора сухого остатка экстракта из холостой пробы проводят при условиях по 5.1.2.8.

Холостую пробу анализируют для выявления присутствия мешающих примесей в лабораторном оборудовании, реагентах или стеклянной посуде. Анализ холостой пробы проводят по мере необходимости (после ремонта или замены вспомогательного оборудования, при использовании новой партии реактивов и при выявлении неудовлетворительных результатов оценки приемлемости параллельных определений). Содержание примесей при анализе холостой пробы не должно превышать 20%-ного значения минимально определяемой концентрации 2,4-Д.

5.2.3.3 Хроматографический анализ раствора сухого остатка экстракта из двух аликвот пробы анализируемой воды проводят по 5.1.2.8.

5.2.3.4 Идентификацию 2,4-Д в пробе исследуемой воды проводят по 5.1.3.3.

5.2.3.5 По полученным хроматограммам определяют площадь (высоту) пика 2,4-Д.

5.2.4 Обработка результатов анализа

5.2.4.1 Массовую концентрацию 2,4-Д , , в растворе сухого остатка экстракта из пробы анализируемой воды рассчитывают по формуле

или ,

(8)

где () - значение площади (высоты) пика 2,4-Д на хроматограмме раствора сухого остатка экстракта из пробы анализируемой воды, усл. ед. абсорбции;

- градуировочный коэффициент (см. 5.1.2.9), установленный при градуировке по 5.2.2.6.

5.2.4.2 Массовую концентрацию 2,4-Д X, , в анализируемой пробе воды рассчитывают по формуле

,

(9)

где - массовая концентрация 2,4-Д в растворе сухого остатка экстракта из пробы анализируемой воды (см. 5.2.4.1), ;

- объем раствора сухого остатка экстракта из пробы анализируемой воды, ;

V - объем пробы анализируемой воды, ;

- коэффициент извлечения 2,4-Д из пробы анализируемой воды, определяемый по приложению В.

5.2.4.3 Проверку приемлемости результатов измерений и , полученных в условиях повторяемости, проводят по 5.1.4.2, при этом значение предела повторяемости r - по таблице 3.

Примечание - Проверку приемлемости результатов измерений и , полученных в условиях воспроизводимости в двух лабораториях, проводят по 5.1.4.2 (примечание), при этом значение предела воспроизводимости R - по таблице 3.

5.2.5 Метрологические характеристики

Метод обеспечивает получение результатов измерения с метрологическими характеристиками, не превышающими значений, приведенных в таблице 3, при доверительной вероятности Р = 0,95.

Таблица 3

Диапазон измерений массовой концентрации 2,4-Д,	Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных определений при Р = 0,95) r, %	Предел воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами определений, полученными в условиях воспроизводимости при Р = 0,95) R, %	Показатель точности (границы* допускаемой относительной погрешности при вероятности Р = 0,95) , %
От 0,0002 до 0,01 включ.	30	44	38
* Установленные численные значения границ допускаемой относительной погрешности соответствуют численным значениям расширенной неопределенности (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2.

5.2.6 Контроль показателей качества результатов измерений - по 5.1.6.

5.2.7 Оформление результатов измерений - по 5.1.7, при этом значение относительной погрешности измерений массовой концентрации 2,4-Д () - по таблице 3.

6 Метод капиллярного электрофореза

Метод основан на разделении ионов вследствие их различной электрофоретической подвижности в процессе миграции по кварцевому капилляру в тетраборатном электролите под действием электрического поля с последующей регистрацией разницы поглощения 2,4-Д и электролитом ультрафиолетового излучения в диапазоне длин волн от 190 до 230 нм.

6.1 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы и материалы

Вспомогательное оборудование, реактивы, материалы - по 5.1.1 и 5.2.1 со следующими дополнениями:

ионный капиллярный электрофоретический анализатор или система капиллярного электрофореза (далее - прибор), оснащенный кварцевым капилляром длиной не менее 40 см и внутренним диаметром от 50 до 100 мкм, фотометрическим детектором с источником излучения в интервале длин волн от 190 до 230 нм и электронно-вычислительной машиной (компьютером) со специальным программным обеспечением для обработки электрофореграмм;

- микрошприцы вместимостью 0,05 и 0,25  с погрешностью дозирования не более 5%;

- колбы мерные по ГОСТ 1770 2-го класса точности вместимостью 10 ;

- ультразвуковая мешалка любого типа;

- ротационное перемешивающее устройство любого типа со скоростью вращения не менее 25 (1500 об/мин);

- устройство для вакуумирования любого типа (например, водоструйный насос по ГОСТ 25336);

- фильтры мембранные с диаметром пор 0,45 мкм;

- колонка осушительная стеклянная согласно рисунку Б.1 (приложение Б);

- чашка выпаривательная по ГОСТ 9147;

- колбы грушевидные по ГОСТ 25336 вместимостью 50 , 250 ;

- насос водоструйный по ГОСТ 25336;

- натрий тетраборнокислый 10-водный по ГОСТ 4199, х.ч.;

- натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х.ч.;

- спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 18300;

- ацетон по ГОСТ 2603;

- вода деионизированная (дистиллированная вода по ГОСТ 6709, пропущенная через колонку с ионообменными смолами по ГОСТ 20298 и ГОСТ 20301 или через установку для получения деионизированной воды).

Примечание - Рекомендуется для получения деионизированной воды использовать специальную установку.

6.2 Подготовка к выполнению анализа

6.2.1 Приготовление раствора соляной кислоты для промывки капилляра прибора

В мерную колбу вместимостью 100 , примерно наполовину заполненную деионизированной водой, наливают 8,3 соляной кислоты, доводят до метки деионизированной водой и перемешивают.

Срок хранения раствора - не более года.

6.2.2 Приготовление раствора гидроокиси натрия для промывки капилляра прибора

Растворяют от 0,3 до 0,5 г гидроокиси натрия при перемешивании в 100  деионизированной воды.

Срок хранения раствора в емкости из полимерного материала - не более года.

6.2.3 Приготовление раствора соляной кислоты (в соотношении 1:2) для подкисления проб

Смешивают две объемные части деионизированной воды и одну объемную часть соляной кислоты.

Срок хранения раствора в стеклянной емкости - не более года.

6.2.4 Приготовление раствора этилового спирта

В стеклянную колбу с притертой пробкой помещают девять объемных частей деионизированной воды, одну объемную часть этилового спирта и перемешивают.

Срок хранения раствора - не более 3 мес.

6.2.5 Приготовление электролита

3,82 г натрия тетраборнокислого 10-водного растворяют в 1000  деионизированной воды, перемешивают ультразвуковой мешалкой 3 - 5 мин и фильтруют через мембранный фильтр с порами размером 0,45 мкм.

Срок хранения электролита в емкости из полимерного материала - не более года.

6.2.6 Приготовление исходного раствора 2,4-Д

Во взвешенную мерную колбу вместимостью 10  помещают (205) мг ГСО состава 2,4-Д и взвешивают колбу с навеской (по разнице весов находят массу навески М, мг), после чего доводят до метки этиловым спиртом и перемешивают.

Массовую концентрацию 2,4-Д, , , в исходном растворе рассчитывают по формуле

,

(10)

где М - масса навески 2,4-Д, мг;

1000 - коэффициент пересчета массы навески из мг в мкг;

10 - вместимость мерной колбы,

Срок хранения раствора при температуре не выше 8°С - не более 6 мес.

6.2.7 Приготовление промежуточного раствора 2,4-Д

В мерную колбу вместимостью 10  помещают от 4 до 6  этилового спирта, 0,1  исходного раствора 2,4-Д (см. 6.2.6), после чего доводят до метки этиловым спиртом и перемешивают.

Массовую концентрацию 2,4-Д в промежуточном растворе, , , рассчитывают по формуле

,

(11)

где 0,1 - аликвота исходного раствора, ;

10 - вместимость мерной колбы, .

Срок хранения раствора при температуре не выше 8°С - не более 3 мес.

6.2.8 Подготовка прибора

Подготовку прибора к работе осуществляют в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации, устанавливая рабочие параметры:

- напряжение - положительное от 15 до 25 кВ;

- ввод пробы - гидростатический или гидродинамический;

- детектирование - в ультрафиолетовой области спектра длиной волны от 190 до 230 нм;

- температура капилляра - от 20°С до 30°С;

- время промывки капилляра электролитом перед каждым анализом - 2 - 3 мин.

Рабочие параметры конкретного прибора (напряжение, способ ввода, объем пробы и длину волны детектирования) подбирают так, чтобы на электрофореграмме раствора с концентрацией 2,4-Д, соответствующей нижней границе диапазона измерений, соотношение высоты пика 2,4-Д и амплитуды шума сигнала детектора было не менее 5:1.

6.2.9 Подготовка капилляра

Перед началом работы капилляр промывают согласно руководству (инструкции) по эксплуатации прибора сначала деионизированной водой в течение 10 мин, затем электролитом (см. 6.2.5) в течение 15 мин, по окончании проведения анализа - деионизированной водой в течение 5 мин, после чего капилляр оставляют заполненным деионизированной водой.

Новый капилляр промывают в следующей последовательности:

- деионизированной водой - 5 мин;

- раствором соляной кислоты (см. 6.2.1) - 5 мин;

- деионизированной водой - 5 мин;

- раствором гидроокиси натрия (см. 6.2.2) - 5 мин;

- деионизированной водой - 5 мин;

- электролитом (см. 6.2.5) - 5 мин.

6.2.10 Градуировка прибора

6.2.10.1 В шесть грушевидных колб вместимостью от 30 до 40  , начиная со второй колбы, вносят аликвоты промежуточного раствора (см. 6.2.7) в следующих объемах: 0,015; 0,050; 0,10; 0,15; 0,25  (в первую колбу промежуточный раствор не вносят), что соответствует значениям массовой концентрации 2,4-Д в анализируемых пробах воды С, , рассчитанным по формуле

,

(12)

где - объем аликвоты промежуточного раствора, ;

- массовая концентрация 2,4-Д в промежуточном растворе, ;

0,1 - объем анализируемой пробы, .

Вакуумируют содержимое колб до полного удаления этилового спирта. Затем в каждую колбу добавляют по 1  раствора этилового спирта в деионизированной воде (см. 6.2.4), тщательно обмывая им стенки колб, выдерживают 1 - 2 мин, после чего переносят приготовленные растворы в пробирки сэмплера прибора. Пробирки с приготовленными растворами помещают в устройство ввода проб (сэмплер) прибора и проводят измерения в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации прибора при рабочих параметрах, установленных по 6.2.8. Измерения каждого раствора проводят не менее трех раз.

6.2.10.2 На электрофореграммах растворов, полученных по 6.2.10.1, идентифицируют пик 2,4-Д и устанавливают соответствующее ему время миграции, которое используют для идентификации 2,4-Д в анализируемых пробах воды. Сходимость для времен миграции пика 2,4-Д признается удовлетворительной при выполнении условия

,

(13)

где - максимальное время миграции пика 2,4-Д, мин;

- минимальное время миграции пика 2,4-Д, мин;

- предел повторяемости времени миграции пика, равный 20%.

6.2.10.3 На электрофореграммах растворов, полученных по 6.2.10.1, определяют площади пиков 2,4-Д, вычисляют их среднеарифметические значения и проверяют сходимость полученных значений для каждой массовой концентрации раствора 2,4-Д. Сходимость площадей пиков 2,4-Д признается удовлетворительной при выполнении условия

,

(14)

где - максимальная площадь пика 2,4-Д, усл. ед.;

- минимальная площадь пика 2,4-Д, усл. ед.;

- предел повторяемости площадей пиков, равный 15%.

6.2.10.4 При удовлетворительных результатах контроля параметров пика 2,4-Д (времени миграции и площади) устанавливают градуировочную характеристику в виде зависимости среднеарифметического значения площадей пика 2,4-Д от его массовой концентрации.

При неудовлетворительных результатах контроля повторяют промывку капилляра (см. 6.2.9) и градуировку прибора.

6.2.10.5 Градуировку прибора проводят не реже одного раза в 3 мес, а также при смене капилляра, использовании новой партии электролита.

6.2.10.6 Перед проведением измерений проводят проверку соответствия времени миграции пика 2,4-Д времени, заданному в компьютерной программе обработки информации, следующим образом: смешивают 0,035  промежуточного раствора (см. 6.2.7) и 1  раствора этилового спирта в деионизированной воде (см. 6.2.4), помещают в пробирку сэмплера прибора и проводят анализ по 6.3.1.

При несоответствии полученного времени миграции пика 2,4-Д проводят повторную промывку капилляра по 6.2.9.

6.2.10.7 Подготовка пробы воды к анализу

Экстракцию 2,4-Д и получение сухого остатка экстракта из анализируемой пробы воды проводят в соответствии с требованиями приложения Б (способ 2 или 3).

Непосредственно перед анализом в грушевидную колбу с сухим остатком экстракта, полученным по приложению Б (способ 2 ил и 3), добавляют 1  раствора этилового спирта в деионизированной воде (см. 6.2.4), тщательно обмывая им стенки колбы, выдерживают 1 - 2 мин, после чего переносят в пробирку самплера прибора.

6.3 Проведение анализа

6.3.1 Пробирку с подготовленной пробой анализируемой воды (см. 6.2.10.7) помещают в устройство ввода проб (самплер) прибора и проводят измерения в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации прибора при рабочих параметрах, установленных по 6.2.8. Регистрируют не менее двух электрофореграмм для каждой пробы. На полученных электрофореграммах по времени миграции пиков идентифицируют 2,4-Д и вычисляют площади пиков.

6.3.2 Для выявления присутствия мешающих примесей в реактивах, материалах и посуде проводят анализ холостой пробы согласно 6.2.10.7 и 6.3.1. Холостая проба представляет собой аликвоту деионизированной воды. Присутствие 2,4-Д в холостой пробе не должно превышать 1/3 от нижней границы диапазона измерений. В противном случае проводят проверку и замену реактивов, посуды и деионизированной воды.

6.3.3 Если в результате измерений определяемая концентрация 2,4-Д в исходной пробе окажется более 50 , то раствор, подготовленный по 6.2.10.7, разбавляют раствором этилового спирта в деионизированной воде (см. 6.2.4) таким образом, чтобы массовая концентрация 2,4-Д соответствовала диапазону от 3,0 до 50 .

6.4 Обработка результатов

6.4.1 По градуировочной характеристике (см. 6.2.10.4) по значению площади пика 2,4-Д, полученному на электрофореграмме пробы анализируемой воды, определяют массовую концентрацию 2,4-Д, при этом учитывают коэффициент извлечения , установленный в соответствии с приложением В.

Примечание - При использовании специального программного обеспечения для обработки электрофореграмм в окне "разведение" устанавливают значение, равное .

6.5 Метрологические характеристики

Метод обеспечивает получение результатов анализа с погрешностью, не превышающей значений, приведенных в таблице 4, при доверительной вероятности Р = 0,95.

Таблица 4

Диапазон измерений массовой концентрации 2,4-Д,	Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных определений при Р = 0,95) r, %	Предел воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами определений, полученными в условиях воспроизводимости при Р = 0,95) R, %	Показатель точности (границы* допускаемой относительной погрешности при вероятности Р = 0,95) , %
От 3,0 до 10 включ. Св. 10 " 100 "	34 22	50 36	35 25
* Установленные численные значения границ допускаемой относительной погрешности соответствуют численным значениям расширенной неопределенности (в относительных единицах) при коэффициенте охвата k = 2.

6.6 Контроль показателей качества результатов измерений - по 5.1.4.2, 5.1.6, при этом значение предела повторяемости и воспроизводимости - по таблице 4.

6.7 Оформление результатов измерений - по 5.1.7, при этом значение относительной погрешности измерения массовой концентрации 2,4-Д - по таблице 4.

_____________

* В Российской Федерации - требованиям ГОСТ Р 52109-2003 "Вода питьевая, расфасованная в емкости. Общие технические условия".

** В Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

Библиография

[1]	Международный стандарт ISO 5725-6:1994*	Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results. Part 6. Use in practice of accuracy values [Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике]
[2]	Рекомендация МИ 2881-2004	Государственная система обеспечения единства измерений. Методики количественного химического анализа. Процедуры проверки приемлемости результатов анализа
[3]	Рекомендации по межгосударственной стандартизации РМГ 76-2004	Государственная система обеспечения единства измерений. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа
[4]		Руководство ЕВРОХИМ/СИТАК "Количественное описание неопределенности в аналитических измерениях". 2-е издание, пер. с англ. - СПб, ВНИИМ им. Д.И. Менделеева, 2002.
[5]	Рекомендации по стандартизации Р 50.1.060-2006	Государственная система обеспечения единства измерений. Статистические методы. Руководство по использованию оценок повторяемости, воспроизводимости и правильности при оценке неопределенности измерений

___________

* В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике". До принятия межгосударственного стандарта используют аналогичные национальные стандарты, если они идентичны международному стандарту ISO 5725-6:1994.