Методические указания МУК 4.1.3421-17 "Измерение массовой концентрации транс-4-(аминометил)циклогексанкарбоновой кислоты (транексамовая кислота) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 21 февраля 2017 г.)

Методические указания МУК 4.1.3421-17
"Измерение массовой концентрации транс-4-(аминометил)циклогексанкарбоновой кислоты (транексамовая кислота) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 21 февраля 2017 г.)

Свидетельство о государственной метрологической аттестации N 01.00225/205-45-15.

1. Назначение и область применения

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода спектрофотометрии для измерений массовой концентрации транексамовой кислоты в воздухе рабочей зоны в диапазоне массовых концентраций 1,0-4,0 .

Методические указания носят рекомендательный характер.

2. Характеристика вещества

2.1. Физико-химические свойства

Транексамовая кислота

Молекулярная масса 157,2.

Регистрационный номер CAS: 1197-18-8.

Транексамовая кислота - белый или почти белый кристаллический порошок, температура плавления 300°С, легко растворим в воде и ледяной уксусной кислоте, практически нерастворим в ацетоне и спирте этиловом 96%.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.2. Токсикологическая характеристика

Транексамовая кислота - гемостатическое средство, малотоксичное и малоопасное соединение, оказывает специфическое влияние на систему гемостаза и общетоксическое действие на функцию печени и почек.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) транексамовой кислоты в воздухе рабочей зоны 2 .

3. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой при выполнении измерений массовой концентрации транексамовой кислоты метрологические характеристики не превышают значений, представленных в табл. 1 (при доверительной вероятности Р = 0,95).

Таблица 1

Метрологические характеристики

Диапазон измерений массовой концентрации транексамовой кислоты,	Показатель точности (границы относительной погрешности), , % при Р = 0,95	Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), , %	Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), , %	Предел повторяемости, r, %, Р = 0,95, n = 2	Критическая разность для результатов анализа, полученных в двух лабораториях, , %
От 1,0 до 4,0 вкл.	18	2	4	5,5	10

4. Метод измерений

Измерение массовой концентрации транексамовой кислоты выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности окрашенных в розово-сиреневый цвет растворов, образующихся при взаимодействии транексамовой кислоты с нингидрином в присутствии пиридина, поглощать УФ-излучение.

Измерение производят при длине волны 590 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на аналитические аэрозольные фильтры.

Минимально определяемое количество транексамовой кислоты в анализируемом объеме раствора пробы - 5 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации транексамовой кислоты в воздухе - 1,0 (при отборе 50 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства таблеток с использованием транексамовой кислоты в качестве активной субстанции. Определению не мешают вспомогательные вещества, входящие в состав лекарственной формы: целлюлоза микрокристаллическая, крахмал прежелатинизированный, карбоксиметилкрахмал натрия, тальк, кремния диоксид коллоидный.

5. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

5.1. Средства измерений

Спектрофотометр. Диапазон измерений (54 000 - 11 000) , воспроизводимость волновых чисел
Весы лабораторные с наибольшим пределом взвешивания 200 г, предел допустимой погрешности взвешивания мг	ГОСТ OIML R 76-1-11
Аспирационное устройство двухканальное с диапазоном расхода 2,0-20,0 и пределом допустимой погрешности	ТУ 4215-000-11696625-03
Колбы мерные, 2-100-2	ГОСТ 1770-74
Пипетки 1-1-2-1, 1-1-2-5, 1-1-2-10	ГОСТ 29227-91
Пробирки мерные с пришлифованными пробками, П-2-10-14/23 ХС	ГОСТ 1770-74
Цилиндры мерные, 3-100	ГОСТ 1770-74
Секундомер	ГОСТ 8.423-81

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

5.2. Реактивы

Транексамовая кислота с содержанием основного вещества не менее 99,0%	НД 20140311
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72
Пиридин, чда	ГОСТ 13647-78
Нингидрин 1-водный, чда	ТУ 6-09-2737-73

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.

5.3. Вспомогательные устройства и материалы

Аналитические аэрозольные фильтры гидрофильные на основе ацетилцеллюлозы с площадью рабочей поверхности 10 (фильтры)	ТУ 95-1892-89
Фильтродержатели	ТУ 95.72.05-77
Фильтры бумажные обеззоленные средней плотности (фильтры бумажные)	ТУ 6-09-1678-77
Бюксы стеклянные, СВ 24/10	ГОСТ 25336-82
Палочки стеклянные	ГОСТ 25336-82
Воронки химические	ГОСТ 25336-82
Кюветы кварцевые с толщиной оптического слоя 5 мм
Дистиллятор	ГОСТ Р 50444-92
Баня водяная	ТУ 64-432-72
Шкаф сушильный	ТУ 61-1-721-79

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76, ГОСТ 12.1.005-88 с изменением N 1.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91. Должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Необходимо провести обучение работающих правилам безопасности труда согласно ГОСТ 12.0.004-90.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-09 и инструкцией по эксплуатации прибора.

6.4. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК и ОБУВ, установленные ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07.

7. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений и обработке их результатов допускается специалист, имеющий высшее образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедший обучение и владеющий техникой спектрофотометрического анализа, освоивший метод анализа в процессе тренировки и уложившийся в нормативы оперативного контроля при проведении процедур контроля погрешности анализа.

8. Требования к условиям измерений

8.1. Условия приготовления растворов и подготовки проб к анализу:

- температура воздуха	;
- атмосферное давление	(84-106) кПа;
- относительная влажность воздуха, не более	80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, контроль стабильности градуировочной характеристики, отбор проб воздуха.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной раствор транексамовой кислоты с концентрацией 1 000 готовят растворением г транексамовой кислоты в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 100 .

Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

9.1.2. Нингидрин 1-водный, 2%-й водный раствор готовят следующим образом: 2,0 г нингидрина 1-водного вносят в колбу вместимостью 100 , добавляют 98,0 дистиллированной воды и перемешивают.

Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике в темной склянке.

9.1.3. Пиридин, 10%-й водный раствор готовят следующим образом: 10,0 пиридина вносят в колбу вместимостью 100 , добавляют 90,0 дистиллированной воды и перемешивают.

Раствор устойчив в течение месяца.

9.2. Подготовка спектрофотометра

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы транексамовой кислоты, устанавливают по шести сериям измерений по шести концентрациям вещества в каждой серии согласно табл. 2.

Таблица 2

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении транексамовой кислоты

Номер градуировочного раствора	Объем основного раствора транексамовой кислоты с массовой концентрацией 1 000 ,	Содержание транексамовой кислоты на фильтре, мкг	Массовая концентрация транексамовой кислоты в градуировочной растворе,	Содержание транексамовой кислоты в анализируемом объеме градуировочного раствора, мкг
1	0,00	0,0	0,0	0,0
2	0,05	50,0	5,0	5,0
3	0,07	70,0	7,0	7,0
4	0,10	100,0	10,0	10,0
5	0,15	150,0	15,0	15,0
6	0,18	180,0	18,0	18,0
7	0,20	200,0	20,0	20,0

Градуировочные растворы устойчивы в течение 30 мин.

На фильтры, помещенные в бюксы, пипеткой вместимостью 1 наносят основной раствор транексамовой кислоты с массовой концентрацией 1 000 в соответствии с табл. 2. Фильтры подсушивают при комнатной температуре и пипеткой вместимостью 5 приливают по 5 дистиллированной воды и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтры тщательно отжимают, растворы сливают в пробирки вместимостью 10 . Фильтры повторно обрабатывают 5 дистиллированной воды, оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой, затем фильтры тщательно отжимают и удаляют. Растворы объединяют в мерных пробирках вместимостью 10 и доводят объем до метки дистиллированной водой.

Отбирают в пробирки мерные по 1,0 каждого градуировочного раствора, добавляют по 1,0 растворов пиридина 10%-го и нингидрина 1-водного 2%-го, закрывают пробками и помещают в кипящую водяную баню на 5 мин. После охлаждения растворов измеряют оптическую плотность каждого из них в кюветах с толщиной оптического слоя 5 мм при длине волны 590 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (табл. 2, раствор N 1).

Строят градуировочную характеристику: на ось ординат наносят средние значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания транексамовой кислоты в мкг.

9.4. Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в квартал, а также при смене реактивов и изменении условий анализа (после ремонта и поверки прибора). Один раз в год градуировочную характеристику устанавливают заново.

Для контроля стабильности готовят три градуировочных раствора по п. 9.3 (в начале, середине и конце диапазона измерений) и анализируют в точном соответствии с методикой.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие:

, где (1)

, - значение оптической плотности транексамовой кислоты в образце для контроля, измеренное и найденное по градуировочной характеристике соответственно;

- норматив контроля, , где

- границы относительной погрешности, % (табл. 1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то выполняют повторное измерение этого образца с целью исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировочная характеристика нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для установления градуировочной характеристики, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики ее устанавливают заново.

9.5. Отбор проб воздуха

Отбор проб проводят с учетом требований ГОСТ 12.1.005-88 с изменением N 1 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" и Р 2.2.2006-05 (прилож. 9) "Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны", раздел 2 "Контроль соответствия максимальным ПДК".

Одновременно отбирают две параллельные пробы.

Воздух с объемным расходом 5 аспирируют через фильтр, помещенный в фильтродержатель, снабженный металлической сеткой. Для измерения 1/2 ОБУВ транексамовой кислоты необходимо отобрать не менее 50 воздуха в течение 10 мин.

Отобранные пробы могут храниться в бюксах в течение трех дней.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в бюкс и с помощью пипетки вместимостью 5 приливают 5,0 дистиллированной воды и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают, раствор сливают в другой бюкс. Фильтр повторно обрабатывают 5,0 дистиллированной воды, оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой, затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр в мерную пробирку с пришлифованной пробкой вместимостью 10 . Объем раствора доводят до метки дистиллированной водой и далее анализ проводят аналогично градуировочным растворам.

Оптическую плотность полученного анализируемого объема раствора пробы измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 5 мм при длине волны 590 нм по отношению к раствору сравнения, используя чистый фильтр. Раствор сравнения необходимо предварительно профильтровать через бумажный фильтр.

Количественное определение содержания транексамовой кислоты (в мкг) в анализируемом объеме раствора пробы проводят по предварительно построенной градуировочной характеристике.

Примечание. Фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в воде вспомогательных веществ, входящих в состав лекарственных форм, содержащих транексамовую кислоту.

11. Вычисление результатов измерений

Массовую концентрацию транексамовой кислоты в воздухе рабочей зоны С, , вычисляют по формуле:

, где (2)

а - содержание транексамовой кислоты в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочной характеристике, мкг;

В - общий объем раствора пробы, ;

б - анализируемый объем раствора пробы, ;

- объем воздуха, отобранный для анализа , приведенный к стандартным условиям (прилож. 1).

За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости:

, где (3)

, - результаты параллельных определений массовой концентрации транексамовой кислоты в воздухе рабочей зоны, ;

r - значение предела повторяемости, % (табл. 1).

Если условие (3) не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с требованиями методики измерений.

12. Оформление результатов измерения

Результат количественного химического анализа представляют в виде:

, при Р = 0,95, где

- среднее арифметическое значение результатов п определений, признанных приемлемыми, ;

- границы относительной погрешности измерений, % (табл. 1).

Если полученный результат измерений ниже нижней (выше верхней) границы диапазона измерений, то производят следующую запись в журнале: "массовая концентрация транексамовой кислоты менее 1,0 (более 4,0 )".

13. Контроль результатов измерений

13.1. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости

Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

а) при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;

б) при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).

Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.

Приемлемость результатов измерений, полученных в двух лабораториях, оценивают сравнением разности этих результатов с критической разностью по формуле:

, где (4)

, - средние значения массовой концентрации транексамовой кислоты, полученные в первой и второй лабораториях, ;

- значение критической разности, % (табл. 1).

Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 (п. 5.3.3).

При разногласиях руководствуются ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 (п. 5.3.4).

13.2. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории

Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по ГОСТ Р ИСО 5725-6-02, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по п. 6.2.2 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 и показателя правильности по п. 6.2.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02.

Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А.Ю. Попова