Методические указания МУК 4.1.3423-17 "Измерение массовой концентрации 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоната тринатрия дигидрата (натрий лимоннокислый трехзамещенный дигидрат, тринатрия цитрат дигидрат) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 21 февраля 2017 г.)

Методические указания МУК 4.1.3423-17
"Измерение массовой концентрации 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоната тринатрия дигидрата (натрий лимоннокислый трехзамещенный дигидрат, тринатрия цитрат дигидрат) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 21 февраля 2017 г.)

Свидетельство о государственной метрологической аттестации N 01.00225/205-13-16.

1. Назначение и область применения

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода спектрофотометрии для измерений массовой концентрации тринатрия цитрата дигидрата в воздухе рабочей зоны в диапазоне массовых концентраций 2,5-17,0 .

Методические указания носят рекомендательный характер.

2. Характеристика вещества

2.1. Физико-химические свойства

Тринатрия цитрат дигидрат

или

Молекулярная масса: 294,1.

Регистрационный номер CAS: 6132-04-3.

Тринатрия цитрат дигидрат - белый кристаллический порошок с температурой разложения 150°С, обладает специфическим солено-кислым вкусом, легко растворим в воде, 0,01 н растворе соляной кислоты, нерастворим в этаноле.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.2. Токсикологическая характеристика

Тринатрия цитрат дигидрат входит в число натриевых солей лимонной кислоты, которые являются пищевой добавкой Е331. Обладает общетоксическим и слабым местным раздражающим действием, оказывает специфическое влияние на процессы свертывания крови (используется в качестве антикоагулянта).

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) тринатрия цитрата дигидрата в воздухе рабочей зоны 5,0 .

3. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой при выполнении измерений массовой концентрации тринатрия цитрата дигидрата метрологические характеристики не превышают значений, представленных в табл. 1 (при доверительной вероятности Р = 0,95).

Таблица 1

Метрологические характеристики

Диапазон измерений массовой концентрации тринатрия цитрата дигидрата,	Показатель точности (границы относительной погрешности), , % при Р = 0,95	Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), , %	Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), , %	Предел повторяемости, r, %, P = 0,95, n = 2	Критическая разность для результатов анализа, полученных в двух лабораториях, , %
От 2,5 до 10,0 вкл.	15	4	6	11	15
Св. 10,0 до 17 вкл.	9	2	3	6	7

4. Метод измерений

Измерение массовой концентрации тринатрия цитрата дигидрата выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов тринатрия цитрата дигидрата в 0,01 н растворе соляной кислоты поглощать УФ-излучение.

Измерение проводят при длине волны 220 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на аналитические аэрозольные фильтры.

Минимально определяемое количество тринатрия цитрата дигидрата в анализируемом объеме раствора пробы - 800 мкг.

Нижний предел измерений массовой концентрации тринатрия цитрата дигидрата в воздухе - 2,5 (при отборе 320 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства лекарственной формы, содержащей тринатрия цитрат дигидрат. Определению не мешают вспомогательные вещества: целлюлоза микрокристаллическая, кроскармеллоза натрия, аэросил, магния стеарат.

5. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

5.1. Средства измерений

Спектрофотометр. Диапазон измерений (54 000 - 11 000) , воспроизводимость волновых чисел
Весы лабораторные с наибольшим пределом взвешивания 200 г, предел допустимой погрешности взвешивания мг	ГОСТ OIML R 76-1-11
Аспирационное устройство трехканальное с диапазоном расхода 40-200 и пределом допустимой погрешности	ТУ 4215-000-11696625-03
Колбы мерные, 2-100-2	ГОСТ 1770-74
Пипетки 1-1-2-1, 1-1-2-2, 1-1-2-5, 1-1-2-10, 1-1-2-50	ГОСТ 29227-91
Пробирки мерные с пришлифованными пробками, П-2-10-14/23 ХС	ГОСТ 1770-74
Секундомер	ГОСТ 8.423-8

ГАРАНТ:

По-видимому, в тексте предыдущего абзаца допущена опечатка. Вместо "ГОСТ 8.423-8" имеется в виду "ГОСТ 8.423-81"

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

5.2. Реактивы

Тринатрия цитрат дигидрат с содержанием основного вещества не менее 99,0% в пересчете на сухое вещество	ГОСТ 22280-76
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72
Кислота соляная, 0,1 н водный раствор, фиксанал	ТУ 6-09-2540-87

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.

5.3. Вспомогательные устройства и материалы

Аналитические аэрозольные фильтры гидрофильные на основе ацетилцеллюлозы с площадью рабочей поверхности 20 (фильтры)	ТУ 95-1892-89
Фильтродержатели	ТУ 95.72.05-77
Фильтры бумажные обеззоленные средней плотности (фильтры бумажные)	ТУ 6-09-1678-77
Бюксы стеклянные, СВ 24/10	ГОСТ 25336-82
Палочки стеклянные	ГОСТ 25336-82
Воронки химические	ГОСТ 25336-82
Кюветы кварцевые с толщиной оптического слоя 10 мм
Ультразвуковая ванна УВМ-5	ТУ 25-7401
Дистиллятор	ГОСТ Р 50444-92
Шкаф сушильный	ТУ 61-1-721-79

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76, ГОСТ 12.1.005-88 с изменением N 1.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91. Должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Необходимо провести обучение работающих правилам безопасности труда согласно ГОСТ 12.0.004-90.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-09 и инструкцией по эксплуатации прибора.

6.4. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК и ОБУВ, установленные ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07.

7. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений и обработке их результатов допускается специалист, имеющий высшее образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедший обучение и владеющий техникой спектрофотометрического анализа, освоивший метод анализа и уложившийся в нормативы оперативного контроля при проведении процедур контроля погрешности анализа.

8. Требования к условиям измерений

8.1. Условия приготовления растворов и подготовки проб к анализу:

- температура воздуха	;
- атмосферное давление	(84-106) кПа;
- относительная влажность воздуха, не более	80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, контроль стабильности градуировочной характеристики, отбор проб воздуха.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной раствор тринатрия цитрата дигидрата. Основной раствор тринатрия цитрата дигидрата с массовой концентрацией 4 000 готовят растворением г тринатрия цитрата дигидрата в 0,01 н растворе соляной кислоты в мерной колбе вместимостью 100 .

Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

9.1.2. Кислота соляная, 0,01 н водный раствор. В мерную колбу вместимостью 500 с помощью пипетки вместимостью 50 наливают 50 0,1 н водного раствора кислоты соляной, приготовленного из фиксанала, и доводят дистиллированной водой до метки.

Раствор устойчив в течение месяца.

9.2. Подготовка спектрофотометра

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы тринатрия цитрата дигидрата, устанавливают по шести сериям измерений по шести концентрациям вещества в каждой серии согласно табл. 2.

Таблица 2

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении тринатрия цитрата дигидрата

Номер градуировочного раствора	Объем основного раствора тринатрия цитрата дигидрата с массовой концентрацией 4 000 ,	Содержание тринатрия цитрата дигидрата на фильтре, мкг	Массовая концентрация градуировочного раствора тринатрия цитрата дигидрата,	Содержание тринатрия цитрата дигидрата в анализируемом объеме градуировочного раствора, мкг
1	0,0	0,0	0,0	0,0
2	0,2	800,0	160,0	800,0
3	0,3	1 200,0	240,0	1 200,0
4	0,4	1 600,0	320,0	1 600,0
.5	0,5	2 000,0	400,0	2 000,0
б	0,9	3 600,0	720,0	3 600,0
7	1,4	5 600,0	1 120,0	5 600,0

Градуировочные растворы устойчивы в течение трех часов.

На фильтры, помещенные в бюксы, пипеткой вместимостью 1 и 2 наносят основной раствор тринатрия цитрата дигидрата в соответствии с табл. 2. Фильтры подсушивают при комнатной температуре и с помощью пипетки вместимостью 5 приливают по 5 0,01 н раствора соляной кислоты. Бюксы с фильтрами помещают в ультразвуковую ванну и оставляют на 15 минут для лучшего растворения вещества, затем фильтры тщательно отжимают и удаляют. Растворы сливают в мерные пробирки вместимостью 10 и доводят объем до 5 0,01 н раствором соляной кислоты. Аналогично обрабатывается чистый фильтр.

Оптическую плотность полученных градуировочных растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 220 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (табл. 2, раствор N 1).

Строят градуировочную характеристику: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания тринатрия цитрата дигидрата в мкг.

9.4. Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в квартал, а также при смене реактивов и изменении условий анализа (после ремонта и поверки прибора). Один раз в год градуировочную характеристику устанавливают заново.

Для контроля стабильности готовят три градуировочных раствора по п. 9.3 (в начале, середине и конце измерений) и анализируют в точном соответствии с методикой.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие:

, где (1)

, - значение оптической плотности образца тринатрия цитрата дигидрата для контроля, измеренное и найденное по градуировочной характеристике соответственно;

- норматив контроля, , где

- границы относительной погрешности, % (табл. 1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то выполняют повторное измерение этого образца с целью исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировочная характеристика нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для установления градуировочной характеристики, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики ее устанавливают заново.

9.5. Отбор проб воздуха

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с ГОСТ 12.1.005-88 с изменением N 1 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" и Р 2.2.2006-05 (прилож. 9) "Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны", раздел 2 "Контроль соответствия максимальным ПДК".

Одновременно отбирают две параллельные пробы.

Воздух с объемным расходом 40 аспирируют через фильтр, помещенный в фильтродержатель, снабженный металлической сеткой. Для определения массовой концентрации тринатрия цитрата дигидрата на уровне 1/2 ОБУВ (2,5 ) необходимо отобрать не менее 320 воздуха в течение 8 минут.

Пробы можно хранить в бюксах с пришлифованными крышками в течение трех дней.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в бюкс, пипеткой вместимостью 5 приливают 5 0,01 н раствора соляной кислоты. Бюкс с фильтром помещают в ультразвуковую ванну и оставляют на 15 минут для лучшего растворения вещества, затем фильтр тщательно отжимают и удаляют.

Раствор фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр в мерную пробирку с пришлифованной пробкой вместимостью 10 . Объем раствора доводят до 5 0,01 н раствором соляной кислоты и далее анализ проводят аналогично градуировочным растворам.

Оптическую плотность полученного анализируемого объема раствора пробы измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 220 нм по отношению к раствору сравнения, используя чистый фильтр. Раствор сравнения необходимо предварительно профильтровать через фильтр бумажный.

Количественное определение содержания тринатрия цитрата дигидрата в анализируемом объеме раствора пробы проводят по предварительно построенной градуировочной характеристике.

Примечание. Фильтрование растворов проб проводится для удаления нерастворимых в 0,01 н растворе соляной кислоты веществ, входящих в состав препаративных форм.

11. Вычисление результатов измерений

Массовую концентрацию тринатрия цитрата дигидрата в воздухе рабочей зоны С, , вычисляют по формуле:

, где (2)

а - содержание тринатрия цитрата дигидрата в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочной характеристике, мкг;

- объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (прилож. 1).

За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости:

, где (3)

, - результаты параллельных определений массовой концентрации тринатрия цитрата дигидрата в воздухе рабочей зоны, ;

r - значение предела повторяемости, % (табл. 1).

Если условие (3) не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с требованиями методики измерений.

12. Оформление результатов измерений

Результат количественного химического анализа представляют в виде:

, при Р = 0,95, где

- среднее арифметическое значение результатов п определений, признанных приемлемыми, ;

- границы относительной погрешности измерений, % (табл. 1).

Если полученный результат анализа ниже нижней (выше верхней) границы диапазона измерений, то производят следующую запись в журнале: "массовая концентрация тринатрия цитрата дигидрата менее 2,5 (более 17,0 )".

13. Контроль результатов измерений

13.1. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости

Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

а) при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;

б) при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).

Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.

Приемлемость результатов измерений, полученных в двух лабораториях, оценивают сравнением разности этих результатов с критической разностью по формуле:

, где (4)

, - средние значения массовой концентрации тринатрия цитрата дигидрата, полученные в первой и второй лабораториях, ;

- значение критической разности, % (табл. 1).

Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 (п. 5.3.3).

При разногласиях руководствуются ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 (п. 5.3.4).

13.2. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории

Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по ГОСТ Р ИСО 5725-6-02, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по 6.2.2 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 и показателя правильности по п. 6.2.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02.

Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А.Ю. Попова