Методические указания МУК 4.1.630-96 "Методические указания по определению о-нитроанилина в атмосферном воздухе методом тонкослойной хроматографии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 31 октября 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.630-96
"Методические указания по определению о-нитроанилина в атмосферном воздухе методом тонкослойной хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 31 октября 1996 г.)

Дата введения - с момента утверждения

Введены впервые

Настоящие методические указания устанавливают методику количественного химического анализа атмосферного воздуха для определения в нем содержания о-нитроанилина в диапазоне концентраций 0,0033-0,033 мг/м3 методом тонкослойной хроматографии.

о-C6H4NO2NH2               Мол. масса 138,13

о-Нитроанилин - кристаллическое вещество оранжевого цвета, температура плавления - 71,5°С. Растворим в хлороформе, ацетоне, этиловом спирте, бензоле. Растворимость в воде - 0,126 г/100 см3 при 25 °С. В воздухе находится в виде аэрозоля и паров.

Поражает печень, сердечно-сосудистую и центральную нервную систему.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) - 0,006 мг/м3.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +-18%, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерений

Измерения концентрации о-нитроанилина выполняют методом тонкослойной хроматографии с денситометрическим окончанием.

Концентрирование о-нитроанилина из воздуха осуществляют в сорбционные трубки. Десорбцию проводят водой, экстракцию о-нитроанилина - органическим растворителем.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,1 мкг.

Определению не мешают: анилин, м- и п-нитроанилины, нитробензол, галоидзамещенные анилины.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства и реактивы.

3.1. Средства измерений

Барометр-анероид М-67	ТУ 2504-1797-75
Весы аналитические ВЛА-200	ГОСТ 24104-80Е

ГАРАНТ:

См. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания", утвержденный приказом Ростехрегулирования от 25 декабря 2008 г. N 739-ст

Денситометр
Меры массы, 1-го кл.	ГОСТ 7328-82Е

См. ГОСТ OIML R 111-1-2009 "Государственная система обеспечения единства измерений. Гири классов , , , , , , , и . Часть 1. Метрологические и технические требования", введенный в действие приказом Росстандарта от 22 августа 2011 г. N 233-ст

Микрошприц МШ-10М	ГОСТ 8043-74
Посуда стеклянная лабораторная	ГОСТ 1770-74Е, 20292-74Е
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2; пределы 0-55°С, цена деления 1°С	ГОСТ 215-73Е
Электроаспиратор ЭА-1, погрешность +-10%, Госреестр N 5997-77	ТУ 25-11-1414-78

3.2. Вспомогательные устройства

Воронка делительная вместимостью 50 см3	ГОСТ 25336-82Е
Груша резиновая
Дистиллятор	ТУ 61-1-721-79
Камера хроматографическая стеклянная типа СП-40	ГОСТ 25336-82Е
Сорбционные трубки СК 212 или 312
Стаканы вместимостью 50 см3	ГОСТ 25336-82Е
Пластины хроматографические "Силуфол" размером 150 х 150 мм (производство Чехия)
Пульверизаторы стеклянные	ГОСТ 10391-74

3.3. Материалы

Бумага индикаторная универсальная

ТУ 6-09-1181-76

3.4. Реактивы

Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-77
Бензол, х. ч.	ГОСТ 5955-75
Глицерин, ч.	ГОСТ 6259-75
Калия гидроксид, ч., производство ГДР
Кислота серная, х. ч.	ГОСТ 4204-77
Кислота соляная, х. ч.	ГОСТ 3118-77
Натрия нитрат, х. ч.	ГОСТ 4197-74
Натрия сульфат безводный, ч.	ГОСТ 4166-76
Натрия хлорид, х. ч.	ГОСТ 4233-77
1-Нафтол, ч. д. а.	ГОСТ 5838-79
о-Нитроанилин, ч.	ТУ 6-14-380-76
Хлороформ, х. ч.	ТУ 6-09-4263-76
Этанол, х. ч.	ТУ 6-09-1710-77

4. Требования безопасности

4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1.005-88.

4.2. При работе с электраспиратором следует соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже ст. лаборанта, с опытом работы в тонкослойной хроматографии.

6. Условия измерений

Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях согласно ГОСТу 15150-69 при температуре воздуха (20+-10)°С, атмосферном давлении 630-800 мм рт. ст. и влажности воздуха не более 80%.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка сорбционных трубок, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7.1. Приготовление растворов

Исходный раствор о-анилина для градуировки (с = 1 мг/см3). 50 мг о-нитроанилина вносят в колбу вместимостью 50 см3, доводят объем до метки водой и тщательно перемешивают. Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца.

Рабочий раствор о-нитроанилина для градуировки (с = 0,01 мг/см3). 1 см3 исходного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят объем до метки водой и тщательно перемешивают. Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике.

Сорбционный раствор. К 40 см3 дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 100 см3 добавляют 2,7 см3 концентрированной серной кислоты, перемешивают, добавляют 20 см3 глицерина и доводят до метки водой. Раствор устойчив в течение длительного времени.

Подвижная фаза для хроматографии. Смесь бензола и этанола в объемном соотношении 20 : 1.

Проявляющий реагент N 1 (диазотирующий). В смесь 46 см3 дистиллированной воды и 4 см3 концентрированной соляной кислоты вносят 1 г нитрата натрия. Раствор готовят перед употреблением.

Проявляющий реагент N 2 (азосочетающий). 2,8 г гидроксида калия растворяют в 50 см3 воды, затем добавляют 0,1 г 1-нафтола и тщательно перемешивают. Раствор устойчив в течение длительного времени.

Гидроксида калия 50% раствор. 50 г гидроксида калия растворяют в 50 см3 дистиллированной воды. Раствор устойчив в течение длительного времени.

7.2. Подготовка сорбционных трубок

Сорбционный раствор при помощи резиновой груши засасывают в сорбционную трубку таким образом, чтобы полностью смочить стеклянную крошку. Затем грушей выдувают избыток сорбционного раствора. Трубки пригодны к эксплуатации в течение длительного времени.

7.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику устанавливают на градуировочных растворах о-нитроанилина. Она выражает зависимость интенсивности окраски пятна на хроматограмме от содержания о-нитроанилина в пятне и устанавливается по 3-м сериям растворов для градуировки. Каждую серию, состоящую из 6-ти растворов, готовят в мерных колбах вместимостью 100 см3. Для этого в каждую колбу вносят рабочий раствор для градуировки в соответствии с табл. 1, доводят до метки водой и тщательно перемешивают.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной шкалы при определении концентрации о-нитроанилина

Номер раствора для градуировки	1	2	3	4	5	6
Объем рабочего раствора (с=0,01 мг/см3), см3	1	2	3	5	8	10
Содержание о-нитроанилина в 0,5 см3 хлороформа, мкг	0,1	0,2	0,3	0,5	0,8	1,0

10 см3 каждого градуировочного раствора помещают в стакан, добавляют раствор гидроксида калия до рН 8-9, хлорид натрия до насыщения, затем раствор переносят в делительную воронку. Экстракцию проводят хлороформом, 3 раза порциями по 5 см3, встряхивая по 5 мин. Экстракт отделяют от водной фазы, пропускают через слой безводного сульфата натрия, помещают в градуированную конусообразную пробирку и испаряют хлороформ до объема 5 см3.

На хроматографической пластине на расстоянии 15 мм от края намечают линию старта. 0,5 см3 каждого раствора наносят на линию старта в виде отдельных пятен диаметром не более 10 мм по обеим сторонам от центра линии старта (этот участок оставляют для нанесения раствора пробы) на расстоянии 15 мм друг от друга. Содержание о-нитроанилина в пятнах градуировочной шкалы указано в таблице. Хроматографический анализ шкалы стандартов проводят одномоментно с анализом пробы в условиях, изложенных в п. 8.

7.4. Отбор проб

Отбор проб проводят согласно ГОСТу 17.2.3.01-86.

Воздух со скоростью 10 дм3/мин аспирируют в течение 30 мин через сорбционную трубку, заполненную сорбционным раствором. Пробу можно хранить не более 3-х суток.

8. Выполнение измерений

После отбора пробы через сорбционную трубку пропускают 10 см3 воды, засасывая и выдувая воду в стаканчик несколько раз резиновой грушей. В смыв добавляют 50% раствор гидроксида калия до рН 8-9, хлорид натрия до насыщения, затем раствор переносят в делительную воронку. Обработку пробы проводят аналогично п. 7.3, далее 0,5 см3 полученного экстракта с помощью микрошприца или микропипетки наносят в центр линии старта хроматографической пластинки с градуировочной шкалой.

В хроматографическую камеру вносят подвижную фазу (высота слоя 0,5 см), через 30 мин в нее помещают хроматографическую пластину и развивают хроматограмму на высоту 10 см. Затем пластину вынимают из камеры, подсушивают на воздухе, обрабатывают из пульверизатора сначала проявляющим реагентом N 1 и после подсушивания - реагентом N 2. о-Нитроанилин обнаруживается в виде розовых пятен с Rf = 0,72 на светлом фоне.

Количество о-нитроанилина в пятне пробы находят с помощью денситометра любого типа (БИАН, ХРОМОСКАН и др.) по отношению интегральных значений содержания вещества в пятнах пробы и градуировочной шкалы.

9. Вычисление результатов измерений

Концентрацию о-нитроанилина в атмосферном воздухе (мг/м3) вычисляют по формуле:

                     m х V

                          1

                С = --------, где

                     V x V

                      2   0

     m - количество  о-нитроанилина  в пробе, найденное по градуировочной

шкале, мкг;

     V  - общий объем раствора пробы, см3;

      1

     V  - объем анализируемого раствора пробы, см3;

      2

     V  - объем отобранного воздуха, приведенный  к нормальным  условиям,

      0

дм3;

                     V x 273 x P

                      t

              V = ----------------, где

               0  (273 + t) x 760

     V - объем воздуха, отобранный для анализа, дм3;

      t

     Р - атмосферное давление в месте отбора пробы, мм рт. ст.;

     t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.