1. Устройство и содержание помещений диагностических лабораторий
1.1. Для лаборатории диагностики СПИД необходим набор помещений, обеспечивающий ее профиль работы и соблюдение правил противоэпидемического режима. Помещения лаборатории могут располагаться либо в отдельном здании, либо в изолированной части здания, в составе отделов или лабораторий другого профиля. Размеры комнат диагностической лаборатории не регламентируются, но должны обеспечивать требования режима работы.
В случае организации диагностической лаборатории СПИД в отдельном здании (или отсеке) необходимо предусмотреть:
1) комнату для приема, регистрации поступающего на исследование материала и выдачи результатов;
2) комнату для разборки и подготовки сывороток к серологическим исследованиям;
3) комнату для серологической работы.
4) комнату для проведения реакции иммуноблота и других подтверждающих тестов (если постановка этих тестов входит в функции лаборатории);
5) в наборе помещений лаборатории необходимо предусмотреть автоклавную для стерилизации чистой и обеззараживания инфицированной посуды, препараторскую и моечную;
6) помещение для сотрудников лаборатории,
1.2. Размещение лабораторных комнат должно быть организовано так, чтобы максимально обеспечивать поточность поступающего на исследование материала с последующей его инактивацией.
Помещение, в котором происходят прием и регистрация поступающего на анализ материала, целесообразно разместить при входе в лабораторию смежно с помещениями, в которых проводятся разборка и подготовка сывороток к постановке серологических реакций с учетом соблюдения поточности работы с исследуемым материалом. Автоклавную, моечную, препараторскую комнаты целесообразно сгруппировать в одном узле (месте).
1.3. Лаборатория должна быть обеспечена водопроводом, канализацией, электричеством, центральным отоплением.
1.4. В случае отсутствия в населенном пункте водопровода и канализации работа возможна только при условии постоянного снабжения водой и своевременного обеззараживания инфицированного материала.
В лаборатории должны быть оборудованы раковины для мытья рук и раковины, предназначенные для мытья посуды из легко моющихся и не портящихся от дезинфектантов материалов.
1.5. Все помещения лаборатории должны иметь естественное и искусственное освещение, отвечающее требованиям, предусмотренным строительными нормами и правилами.
1.6. Для соблюдения требуемых условий постановки серологических реакций и получения адекватных результатов температура воздуха в лабораторных помещениях не должна превышать 25°С. Для районов с жарким климатом в летний период устанавливают кондиционеры с охлаждением. Желательно в лабораторных комнатах иметь приточно-вытяжную вентиляцию.
1.7. Полы в лабораторных помещениях должны быть покрыты линолеумом либо керамической плиткой.
1.8. Рабочие поверхности столов, на которых проводятся прием, разборка сывороток, постановка серологических реакций, следует покрывать водонепроницаемым, несгораемым и не портящимся при дезинфекции материалом.
1.9. Лабораторная мебель должна быть легко моющейся.
1.10. В случае формирования лаборатории диагностики СПИД в составе других лабораторий (отделов) не допускается пользование общей термальной комнатой (термостатами) и общими холодильниками. Лаборатория СПИД должна пользоваться только своими термостатами и холодильниками, установленными в разборочной и серологической комнатах.
2. Правила и противоэпидемический режим при проведении серологической диагностики СПИД
2.1. Работа в диагностических лабораториях проводится с соблюдением мер индивидуальной защиты: в сменном боксовом халате, шапочке, сменной обуви и обязательно в резиновых перчатках.
2.2. Доставка образцов крови (сывороток) в лабораторию осуществляется в емкостях (контейнеры, стерилизационные коробки и др.) с закрывающимися крышками, из материала, который не портится при дезинфекции.
Не допускается перевозка материала в сумках, портфелях и других предметах личного пользования.
Оптимальной считается доставка контейнеров с исследуемым материалом в сумках-холодильниках.
Образцы крови (сыворотки) должны доставляться в пробирках или флаконах, герметично закрытых резиновыми или ватно-марлевыми, обернутыми полиэтиленовой пленкой, пробками.
Взятая для исследования цельная кровь должна быть доставлена в диагностическую лабораторию в течение 24 часов с момента взятия крови. В случае невозможности доставки образцов крови в установленное время материал пересылается только в виде сыворотки (без сгустков) в течение 7 дней от дня взятия крови при условии ее хранения до отправки в диагностическую лабораторию СПИД при температуре 4 - 8°С.
Поступающий в лабораторию материал должен сопровождаться направлением (прил. 1).
2.3. Перед работой все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем или напальчниками. Распаковка материала, присланного в лабораторию для исследования, проводится с соблюдением мер предосторожности, в резиновых перчатках. Присланные образцы крови (сыворотки) в пробирках, флаконах перекладывают в штативы или другие емкости диагностической лаборатории, помещенные на эмалированные или металлические подносы, и переносят в комнату разборки и подготовки материала для серологических исследований. Контейнеры, в которых доставлен исследуемый материал, после разгрузки обрабатывают дезраствором.
2.4. Поступившие образцы крови (сыворотки) регистрируют в отдельном журнале регистрации поступающего на исследование материала (прил. 2).
2.5. Сыворотку отсасывают со сгустков крови в день поступления или не позднее 24 часов после поступления в лабораторию.
2.6. До проведения исследования сыворотки хранят# при 4 - 8°С и могут быть использованы для серологических исследований в течение 10 дней от дня взятия крови.
2.7. Комнаты, предназначенные для разборки и подготовки материала к серологическим исследованиям, должны иметь:
- лабораторный стол, покрытый не портящимся при дезинфекции материалом;
- шкаф для посуды;
- холодильник на +4°С;
- центрифугу на 1,5 - 2 тыс. об/мин (в предбокснике);
- бактерицидные лампы.
В помещениях, предназначенных для приема, разборки материала и постановки серологических реакций, запрещается проводить другие виды работы.
2.8. Для обеззараживания перчаток, инфицированной посуды необходимо предусмотреть эксикаторы или другие емкости с закрывающимися крышками с соответствующими дезинфицирующими растворами, баки для сбрасывания посуды и другого инфицированного материала, предназначенного для автоклавирования.
Все емкости с дезрастворами должны быть промаркированы: название дезраствора, его концентрация, назначение и дата приготовления.
2.9. После регистрации и разборки сывороток их переносят в комнату для серологических исследований.
Комнаты, предназначенные для серологических исследований, должны иметь:
- лабораторный стол для размещения посуды, необходимой в работе (мерные цилиндры, колбы, бутыль с дистиллированной водой и т.д.);
- лабораторный стол для размещения аппаратуры (спектрофотометр, промыватель и т.д.);
- стол для серологической работы;
- холодильник на 4°С;
- термостат.
Плашку с диагностикумом помещают на эмалированный или металлический поднос (лоток) и проводят всю работу во втором (боксовом) халате, в резиновых перчатках.
2.10. Для защиты от возможного попадания вируссодержащего материала во время работы рекомендуется использовать защитные очки, экраны* или другие защитные средства, подвергающиеся дезинфекции. В боксе, где проводятся серологические исследования, не рекомендуется в качестве дезинфицирующих средств использовать хлорсодержащие препараты и аммиак в открытых емкостях.
2.11. После окончания работы исследуемый материал (пробирки с сывороткой) переносят в холодильник, а использованную инфицированную посуду помещают в бак для грязной посуды. Туда же кладут для контроля режима работы парового стерилизатора стеклянные герметично запаянные трубки (ампулы) с никотинамидом или Д(+)-маннозой и 0,1% фуксина основного или фуксина кислого, генцианвиолета, фенолового красного (температура плавления 132°С). Баки плотно закрывают крышкой, завязывают шпагатом, пломбируют и сдают в автоклавную под расписку автоклаверу (прил. 3).
2.12. Хранение бака до автоклавирования не допускается более рабочей смены. Обеззараживание в паровом стерилизаторе (автоклаве) проводится при температуре 132+-2°С под избыточным давлением 2,0 кгс/см2 (0,20 МПа) в течение 60 мин. После обеззараживания лаборант проверяет ампулу с химическим контролем. Расплавление химического теста и его окрашивание красителем свидетельствует о достижении необходимой температуры. Только после этого бак с посудой передается в моечную.
2.13. Пробирки с кровью помещают в специальную маркированную емкость (кастрюля, ведро, бак), закрывающуюся крышкой, с дезинфицирующим раствором (3% раствор хлорамина, осветленный раствор хлорной извести; 0,6% осветленные растворы нейтрального гипохлорита кальция (НГК), гипохлорита кальция технического (ГКТ); 0,5% р-ры ДП-2, сульфохлорантина не менее, чем на 2 часа. Приготовление растворов осуществляется в соответствии с прил. 8, 9. Другой способ обеззараживания - в паровом стерилизаторе при режиме - 2 кгс/см2 (0,2 МПа) при температуре 132+-2°С в течение 60 мин.
Кипячение является наиболее простым и доступным методом дезинфекции. Дезинфицирующий эффект достигается после кипячения в течение 30 минут (от момента закипания).
2.14. Поверхность рабочих столов и все предметы, соприкасавшиеся с исследуемым материалом (пипетки, пробирки, ампулы), должны быть обеззаражены. С этой целью можно использовать следующие дезинфицирующие средства: 6% раствор перекиси водорода без моющего или с моющим средством, 4% раствор формальдегида.# 0,6% раствор НГК, 0,4% раствор ГКТ, 0,5% раствор ДП-2, сульфохлорантина в течение 60 мин методом погружения или двукратного протирания (для поверхностей).
При наличии видимых пятен крови их следует сначала залить дезинфицирующим раствором на рекомендуемое время обеззараживания, затем удалить смесь крови и дезинфицирующего средства, сбросить тампон или салфетку в дезинфицирующий раствор. После этого поверхность следует протереть дезинфицирующим раствором. Если применяется 70% этиловый спирт (при отсутствии других средств), поверхность следует протереть несколько (3-5) раз, поскольку спирт быстро испаряется.
2.15. Растворы перекиси водорода готовят ежедневно. Растворы хлорамина можно готовить 1 раз на две недели, хлорной извести, ГКТ, НГК - на 6 дней, однако готовые растворы используют только в течение рабочего дня.
2.16. Насасывание сывороток и другого исследуемого материала производят только с помощью груши или автоматической пипетки с последующим обеззараживанием наконечников в емкости (эксикатор и др.) с дезинфицирующим раствором. Дезинфекцию наконечников к автоматическим пипеткам можно проводить 70°** спиртом или 6% перекисью водорода в течение 60 минут или автоклавированием при 1,1 кгс/см2 (0,1 МПа) при температуре 120+#2°С в течение 45 мин.
Одноразовый инструментарий (пластины, наконечники к автоматическим пипеткам и др.) обеззараживаются в паровом стерилизаторе при 2,0 кгс/см2 (0,2 МПа), температуре 132+-2°С в течение 60 минут и выбрасывают в специально отведенные места.
2.17. После дезинфекции и влажной уборки помещения проводят обеззараживание воздуха с помощью бактерицидных ламп типа ДБ-30 в течение 60 мин. При определении количества ламп исходят из расчета: 2,5 Вт на 1 м3 для неэкранированных ламп и 1,0 Вт на 1 м3 - для экранированных. Неэкранированные лампы включают только в отсутствие людей.
При выходе из рабочей комнаты сотрудник лаборатории обязан убрать исследуемый материал со стола, обработать стол дезинфицирующим раствором, а руки после обеззараживания тщательно вымыть с мылом. Перчатки обеззараживают в 6% растворе перекиси водорода или 70° спирте.
2.18. Стирка халатов и другой спецодежды на дому категорически запрещается. Смена спецодежды должна осуществляться 1 раз в неделю. Перед стиркой спецодежду замачивают на 3 часа в 1,0% растворе хлорамина или 3% растворе перекиси водорода с 0,5% моющего средства (температура раствора 50°С) или автоклавируют при 1,1 кгс/см2 (0,1 МПа) при температуре 120+#2°С в течение 45 мин. Пятна крови предварительно смачивают растворами более высокой концентрации (как для поверхностей).
2.19. Для обеззараживания поверхности пола (текущая дезинфекция) в конце рабочего дня используют 1% раствор хлорамина, 1 % осветленный раствор хлорной извести с последующим проветриванием помещения. Пролитая на пол кровь, сыворотка и др. заливаются раствором одного из дезинфицирующих средств, указанных для обеззараживания поверхности рабочего стола.
2.20. При работе с дезинфицирующими средствами необходимо соблюдать меры предосторожности, изложенные в "Правилах по охране труда работников дезинфекционного дела и по содержанию дезинфекционных станций, дезинфекционных отделов, отделений профилактической дезинфекции санитарно-эпидемиологических станций, отдельных дезинфекционных установок", утв. Минздравом СССР 09.02.79 г., N 1963-79.
2.21. Приготовление растворов дезинфицирующих средств проводят в хорошо проветриваемых помещениях с использованием мер индивидуальной защиты - резиновых перчаток, герметичных очков (тип ПО-2, ПО-3 или моноблок), респираторов с противогазовым патроном марки А или В (тип РУ-60М, РПГ-67 и др.), халата, шапочки, резинового фартука.
Запасы препаратов хранят в защищенном от попадания прямых солнечных лучей месте.
