II. Нормативные ссылки
2.1. Федеральный закон от 22.06.93 N 5487-1 "Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан".
2.2. Федеральный закон от 25.11.09 N 267-ФЗ "О внесении изменений в Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан и отдельные законодательные акты Российской Федерации".
2.3. Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".
2.6. Федеральный закон от 26.12.08 N 294-ФЗ "О защите прав юридических лиц и индивидуальных предпринимателей при осуществлении государственного контроля (надзора) и муниципального контроля".
2.8. Федеральный закон "Об отходах производства и потребления" от 24.06.1998 г. N 89-ФЗ.
2.9. Федеральный закон от 22.07.2008 N 123-ФЗ "Технический регламент о требованиях пожарной безопасности".
2.11. Постановление Правительства Российской Федерации от 28.03.01 N 241 "О мерах по обеспечению промышленной безопасности опасных производственных объектов на территории Российской Федерации".
2.12. Постановление Правительства Российской Федерации от 15.09.05 N 569 "О положении об осуществлении государственного санитарно-эпидемиологического надзора в Российской Федерации".
2.13. Приказ Минздравмедпрома России от 14.03.96 N 90 "О порядке проведения предварительных и периодических медицинских осмотров работников и медицинских регламентах допуска к профессии".
2.14. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 06.02.01 N 23 "О внесении изменений в приказ Минздравмедпрома России от 14.03.96 N 90".
2.15. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 16.08.04 N 83 "Об утверждении перечней вредных и (или) опасных производственных факторов и работ, при выполнении которых проводятся предварительные и периодические медицинские осмотры (обследования), и порядка проведения этих осмотров (обследований)".
2.16. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16.05.05 N 338 "О внесении изменений в приложение N 2 к приказу Минздравсоцразвития России от 16 августа 2004 г. N 83".
2.17. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 22.06.09 N 357н "Об утверждении Типовых норм бесплатной выдачи специальной одежды, специальной обуви и других средств индивидуальной защиты работникам, занятым на работах с вредными и (или) опасными условиями труда, а также на работах, выполняемых в особых температурных условиях или связанных с загрязнением".
2.18. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 01.07.09 N 378н "Об утверждении Типового положения о территориальном органе Федеральной службы по труду и занятости".
2.19. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 29.05.06 N 413 "Об утверждении типового Положения о комитете (комиссии) по охране труда".
2.20. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 28.05.09 N 284 "Об организации обучения по охране труда отдельных категорий застрахованных в 2009 году".
2.21. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 23.07. 2007 N 54 "О надзоре за продукцией, полученной с использованием нанотехнологий и содержащих наноматериалы".
2.22. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 31.10. 2007 N 79 "Об утверждении Концепции токсикологических исследований, методологии оценки риска, методов идентификации и количественного определения наноматериалов".
2.23. Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 19.07.2007 N 224 "О санитарно-эпидемиологических экспертизах, обследованиях, исследованиях, испытаниях и токсикологических, гигиенических и иных видах оценок".
2.24. СП 2.2.2.1327-03 "Гигиенические требования к организации технологических процессов, производственному оборудованию и рабочему инструменту".
2.25. СП 1.1.1058-01 "Организация и проведение производственного контроля за соблюдением санитарных правил и выполнением санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий".
2.26. ГН 2.2.5.1313-03 "Гигиенические нормативы. Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".
2.27. ГН 2.2.5.2308-07 "Гигиенические нормативы. Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".
2.28. ГН 1.2.2633-10 "Гигиенические нормативы содержания приоритетных наноматериалов в объектах окружающей среды".
2.29. СанПиН 1.2.1330-03 "Гигиенические требования к производству пестицидов и агрохимикатов".
2.30. СанПиН 2.1.6.1032-01 "Гигиенические требования к обеспечению качества атмосферного воздуха населенных мест".
2.31. СанПиН 2.2.1/2.1.1.1200-03 "Санитарно-защитные зоны и санитарная классификация предприятий, сооружений и иных объектов. Новая редакция. СанПиН 2.2.1./2.1.1.-2361-08 Санитарно-защитные зоны и санитарная классификация предприятий, сооружений и иных объектов. Изменение N 1 к СанПиН 2.2.1./2.1.1.1200-03 Новая редакция".
2.33. СанПиН 2.1.7.573-96 "Гигиенические требования к использованию сточных вод и их осадков для орошения и удобрения".
2.34. СП 2.1.7.1038-01 "Гигиенические требования к устройству и содержанию полигонов для твердых бытовых отходов".
2.35. Руководство Р 2.2.2006-05 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда".
2.36. Руководство Р 2.2.1766-03 "Руководство по оценке профессионального риска для здоровья работников. Организационно-методические основы, принципы и критерии оценки".
2.37. МУ 1.2.2520-09 "Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов".
2.38. МУ 1.2.2634-10 "Микробиологическая и молекулярно генетическая оценка воздействия наноматериалов на представителей микробиоценоза"
2.39. МУ 1.2. 2635-10 "Медико-биологическая оценка безопасности наноматериалов"
2.40. MP 1.2.2522-09 "Выявление наноматериалов, представляющих потенциальную опасность для здоровья человека".
2.41. MP 1.2.2566-09 "Оценка безопасности наноматериалов in vitro и в модельных системах in vivo".
2.42. MP 1.2.2641-10 "Определение приоритетных видов наноматериалов в объектах окружающей среды, пищевых продуктах и живых организмах".
2.43. MP 1.2.0016-10 "Методика классифицирования нанотехнологий и продукции наноиндустрии по степени их потенциальной опасности".
2.44. ГОСТ Р ИСО 7708-2006 "Качество воздуха. Определение гранулометрического состава частиц при санитарно-гигиеническом контроле".
2.45. ГОСТ Р ИСО 14644-3-2007 "Чистые помещения и связанные с ними контролируемые среды. Часть 3 Методы испытаний".
2.46. ГОСТ 30333-2007 "Паспорт безопасности химической продукции. Общие требования".
2.47. ГОСТ 12.4.034-2001 "Средства индивидуальной защиты органов дыхания. Классификация и маркировка".
2.48. ГОСТ Р ИСО 14001-2007 "Системы экологического менеджмента. Требования и руководство по применению".
2.49. ISO/TR 12885:2008 "Нанотехнологии. Правила техники безопасности, применяемые в профессиональной деятельности".
III. Общие положения
3.1. В химической промышленности создаются и находят применение разнообразные наноматериалы (катализаторы, адсорбенты, нейтрализаторы и другое), ожидаемое влияние которых на человека и среду обитания требует обеспечения мер безопасности путем выполнения санитарных правил, санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий, организации и осуществления контроля за их соблюдением.
3.2. Объектами контроля (надзора) на химических предприятиях являются: сырье, полуфабрикаты, готовая химическая продукция, получаемая с использованием нанотехнологий, технологические процессы, технологическое оборудование, рабочие места, производственные помещения, здания, сооружения и площадки, санитарно-защитные зоны предприятий, зоны санитарной охраны водоемов, транспорт, а также отходы производства.
3.3. Методические рекомендации определяют порядок проведения и объем лабораторных исследований, входящих в комплекс мероприятий по производственному контролю на нанотехнологическом объекте, и рекомендуют перечень мер безопасности.
3.4. Лабораторные исследования в рамках производственного контроля за наноматериалами (далее - лабораторные исследования), применяемыми в химических производствах, проводятся юридическими лицами или индивидуальными предпринимателями. Они разрабатывают программу (план) их проведения до начала осуществления указанного вида деятельности. Дополнения и изменения в программу (план) производственного контроля вносятся при изменении вида деятельности, технологии производства, новых сведений об опасности наноматериалов, введении в действие новых нормативных документов, иных существенных изменениях деятельности юридического лица (индивидуального предпринимателя).
3.5. Целью лабораторных исследований является контроль присутствия наночастиц и/или нанопродукции в воздухе рабочей зоны и других контролируемых средах, а также контроль уровня их воздействия на человека и окружающую среду (при наличии гигиенических нормативов) для обоснования мер коллективной и индивидуальной защиты при производстве наноматериалов, хранении, транспортировке и реализации продукции, утилизации промышленных отходов.
3.6. В соответствии с постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 31 октября 2007 N 79, каждый созданный и предназначенный к использованию наноматериал должен пройти полную токсикологическую оценку. До установления степени опасности конкретных наноматериалов их следует рассматривать как новую продукцию и относить к веществам, потенциально опасным для здоровья человека.
3.7. На каждый наноматериал необходимо иметь всю необходимую документацию, оформленную в установленном порядке, включая "Паспорт безопасности" (по ГОСТ 30333-2007), который подлежит централизованному учету, хранению и депонированию в учреждениях, на базе которых организуются специализированные банки с информационными функциями.
3.9. В качестве временной меры при оценке риска наноматериалов можно руководствоваться результатами прогнозно-аналитической оценки (по MP 1.2.2522-09) с отнесением наноматериала к низкому, среднему или высокому уровню потенциальной опасности.
Первоочередного внимания требует организация мер безопасности и их соблюдение при производстве, применении, транспортировке и хранении наноматериалов, особенно отнесенных к высокой степени потенциальной опасности, либо представляющих собою крупнотоннажные химические продукты, так как в этом случае возможно увеличение числа экспонированных лиц.
3.10. При работе с наноматериалами необходимо предусматривать мероприятия (организационно-технологические, гигиенические, санитарно-технические, медико-биологические), направленные на устранение или ослабление действия наночастиц на организм человека и реализацию системы управления профессиональными рисками. При этом рекомендуется использовать прогрессивные технологии, информативные методы контроля, мониторинг условий труда персонала по вредным факторам рабочей среды, эффективные средства коллективной защиты, надежные средства индивидуальной защиты.
3.11. При разработке, организации и внедрении технологических процессов на предприятиях химической промышленности, конструировании производственного оборудования и рабочего инструмента необходимо обеспечить отсутствие наночастиц искусственного происхождения в воздухе рабочих зон, атмосферном воздухе населенных мест и воде или, если это невозможно, то их содержание на уровне, не превышающем установленных для них гигиенических нормативов (при наличии таковых).
3.12. В химических производствах следует предусматривать контроль как самих наноматериалов, так и вредных примесей веществ макроскопической степени дисперсности, содержащихся в наноматериале или загрязняющих его по условиям технологии его получения.
3.13. При внедрении нанотехнологий обеспечивается соблюдение безопасных уровней вредных факторов, причём эти уровни не должны быть выше, чем на аналогичных промышленных объектах (при их наличии), не использующих в технологии производства наночастицы и наноматериалы.
3.14. Согласно международным требованиям (ISO/TR12885:2008(E)), предусмотрены следующие мероприятия, уменьшающие экспозицию наночастицами работников производств и населения:
- выпускать продукцию, содержащую наночастицы, в непылящих формах (пасты, гранулы вместо аэрозолей и порошков) и в герметизированных упаковках;
- заменять наноматериалы с большей потенциальной опасностью менее опасными материалами, где это возможно по условиям технологического процесса;
- использовать везде, где это возможно, допустимое по технологии увлажнение сырья и продукции, особенно при наличии источников пылевыделения;
- осуществлять модификацию поверхности потенциально опасных наночастиц, например покрытие квантовых точек молекулярными слоями инертных малотоксичных неорганических веществ (сульфид цинка, кремнезем) или органическими детергентами;
автоматизировать и механизировать технологию производства, транспортировки и расфасовки сырья, полуфабрикатов и продукции, содержащей наноматериалы, с целью исключения непосредственного контакта работников с вредными и опасными производственными факторами;
- применять в производственном оборудовании конструктивные решения и средства защиты, направленные на уменьшение интенсивности выделения пыли наночастиц и наноматериалов и локализацию вредных производственных факторов;
- проводить установку систем автоматического контроля, сигнализации и управления технологическим процессом, особенно на участках, где возможен внезапный выброс аэрозолей наночастиц;
- обеспечить автоматическую блокировку производственных систем и оборудования на участках, опасных по аварийным ситуациям;
- обеспечить соблюдение требований эргономики и технической эстетики к производственному оборудованию и эргономических требований к организации рабочих мест и трудового процесса;
- предусматривать включение гигиенических требований в нормативно-техническую документацию.
3.15. При разработке, организации и ведении технологических процессов, связанных с использованием наноматериалов, предусматриваются мероприятия по охране среды обитания в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 14001-2007
3.16. При конструировании оборудования для технологических процессов, связанных с использованием наноматериалов, следует предусматривать максимальную механизацию его монтажа, технического обслуживания, ремонта и демонтажа.
Подлежащее техническому ремонту оборудование перед началом работ очищается от содержащихся наноматериалов с использованием систем пылеулавливания наноразмерных аэрозолей, а при наличии остатков ядовитых веществ макроскопической дисперсности - подвергается дополнительному обеззараживанию методами, рекомендованными для данных загрязнителей. Машины, механизмы и другое технологическое оборудование после модернизации или ремонта проходят проверку на их соответствие действующим нормативным документам.
3.17. При проектировании промышленных зданий, предназначенных для работы с наноматериалами, особое внимание обращают на расположение цехов предприятия, оборудования и установок на открытых площадках, автоматизацию процессов, обустройство рабочих мест. При проектировании важно учитывать розу ветров и разделять рабочие места, контактирующие с различными опасными материалами.
IV. Порядок проведения лабораторных исследований
4.1. Перечень наноматериалов, подлежащих контролю, объем, методы и периодичность лабораторных исследований составляется на основании данных санитарно-эпидемиологической экспертизы объекта, сведений об особенностях технологического процесса, составе и свойствах продукции, возможности экспонирования ими персонала предприятия и населения прилегающих к нему территорий.
4.2. Перечень точек отбора проб для лабораторного исследования должен содержаться в "Программе производственного контроля" в текстовом, либо графическом виде.
4.3. Лабораторные исследования осуществляются юридическим лицом или индивидуальным предпринимателем самостоятельно при наличии лабораторной базы, соответствующей задачам контроля, либо с привлечением лаборатории, аккредитованной в установленном порядке.
4.4. Перечень основных видов наноматериалов, применяемых в химической промышленности и/или производимых химическими способами:
- наночастицы металлов, сплавов и интерметаллических соединений;
- металлооксидные наночастицы;
- силикатные и алюмосиликатные наночастицы и нановолокна;
- магнитные жидкости;
- наночастицы органических полимеров;
- наночастицы углерода (фуллерены, сажи, углеродные нанотрубки);
- наноэмульсии пестицидов.
4.5. Рекомендации по месту проведения отбора проб, объему и периодичности лабораторных исследований.
4.5.1. На этапах технологического процесса, где наноматериалы или содержащие их продукты представлены в виде порошка, суспензии, раствора, либо в твердой физической форме, осуществляют контроль проб с визуализацией и идентификацией наночастиц в составе образцов.
4.5.2. Отбор проб воздуха для контроля наноаэрозолей проводят в зоне дыхания работника (постоянное рабочее место). При непостоянном рабочем месте отбор проб проводится в точках, в которых работник находится в течение смены.
4.5.3. Устройства для отбора проб воздуха могут быть стационарными или персональными (индивидуальными).
4.5.4. При высоко- или низкотемпературных технологических процессах, а также размещении оборудования на открытых промышленных площадках отбор проб воздуха для контроля наноматериалов рекомендуется проводить в теплый и холодный периоды года.
4.5.5. В воздухе рабочей зоны контроль наноматериалов рекомендуется осуществлять по максимальной (МК) и/или среднесменной концентрации (ССК), ориентируясь на основной характер биологического действия, как это принято для веществ макроскопической дисперсности. Вредные вещества химической природы с ведущим токсическим механизмом действия контролируются как по МК, так и ССК. Для вредных веществ, опасных для развития острого отравления, и аллергенов, определяющим является контроль МК; канцерогенов - ССК; высоко- и умеренно фиброгенной пыли - как МК, так и ССК; слабо фиброгенной - только ССК (в соответствии с руководством Р 2.2.2006-05 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда").
4.5.6. Периодичность контроля наноматериалов устанавливается аналогично их химическим аналогам в форме макроскопической дисперсности как указано в ГОСТ 12.1.005-88 и руководстве Р 2.2.2006-05 (Приложение 9): для веществ 1 класса опасности - не реже 1 раза в 10 дней; II класса - 1 раз в месяц; III класса - 1 раз в 3 месяца; IV - 1 раз в 6 месяцев. При контроле МК в каждой точке, как правило, следует отобрать не менее трех проб. Проба ССК является средневзвешенной величиной за 8 часовой рабочий день.
4.5.7. Отбор проб атмосферного воздуха, воды, почвы в районе размещения химического предприятия, использующего наноматериалы, следует проводить согласно действующим нормативным документам.
4.6. Методы подготовки проб и идентификации наночастиц в структуре образца, применяемые в ходе контроля наноматериалов.
4.6.1. Твердые и жидкие (конденсированные) фазы, содержащие наноматериалы.
А. Химические средства в порошкообразной и жидкой формах.
Изучаемые образцы наноматериалов суспензируют или растворяют в дистиллированной воде. Последующие этапы исследования отражены в таблице 1.
Таблица 1.
Схема проведения исследований по электронно-микроскопической визуализации и идентификации наночастиц в порошкообразной и жидкой формах.
|
Вид продукта, наноматериала
|
Промышленные товары
|
|
Физическая форма
продукта,
наноматериала
|
Порошок, суспензия, раствор
|
|
Количество материала для выполнения исследований
|
50-100 мг (0,5-1,0 ![]() )
|
|
Приборное обеспечение
|
Просвечивающий электронный микроскоп, анализатор изображений, соединенный с электронным микроскопом или цифровая фотокамера с матрицей не ниже 5 мегапикселей и компьютер.
|
|
Материалы
|
Пинцет для электронно-микроскопических работ, электронно-микроскопические сеточки, пластинка тефлона размером 10x20 см, микропипетка вместимостью 50 ![]() , наконечники к микропипетке, колбы вместимостью 100 ![]() , пробирки вместимостью 20 ![]() , пипетки.
|
|
Химические реактивы
|
Формвар, коллодий, амилацетат, дихлорэтан, уранилацетат, дистиллированная вода
|
|
Препарирование образцов для исследования в электронном микроскопе
|
Этап 1 (подготовка реактивов и материалов к эксперименту):
- приготовление 0,15% раствора формвара на дихлорэтане или 0,5% раствора коллодия на амилацетате;
- покрытие электронно-микроскопических сеточек формваровой (коллодиевой) пленкой;
- приготовление 1,0% раствора уранилацетата.
Этап 2 (препарирование образцов наноматериалов для электронной микроскопии):
- суспензию или раствор наноматериала наносят на электронно-микроскопические сеточки, покрытые формваровой (коллодиевой) пленкой;
- сеточки с наноматериалом контрастируют 1,0% раствором уранилацетата.
|
|
Исследование образцов наноматериалов в просвечивающем электронном микроскопе
|
Основные этапы:
- предварительная оценка качества образца при низких увеличениях;
- исследование и фотографирование структуры образца при низких увеличениях - для визуализации структуры исследуемого образца и при высоких разрешениях - для визуализации наночастиц в структуре образца;
- поиск наночастиц в структуре образца;
- фотографирование 10 полей изображения структуры образца.
|
|
Анализ электронно-микроскопических изображений структуры наноматериала (продукта)
|
Основные этапы:
- визуализация наночастиц в структуре наноматериала или продукта;
- морфометрический анализ наночастиц;
- определение степени полиморфизма наночастиц в материале;
- определение степени агрегированности наночастиц в материале.
|
|
Основные параметры и характеристики наноматериала (продукта) для выдачи заключения
|
Структурные и морфометрические характеристики образца наноматериала:
- наличие частиц размерами 1,0-100,0 нм; уровень электронно-оптической плотности наночастиц; форма наночастиц; коэффициент формы наночастиц; степень полиморфизма наночастиц в материале; степень агрегированности наночастиц в образце наноматериала.
|
Результаты и заключение электронно-микроскопической визуализации и идентификации наночастиц в продукции содержат информацию о форме и размерах наночастиц в исследуемом материале, данные о степени агрегированности наночастиц, сведения о характере распределения наночастиц в образцах, электронно-микроскопические изображения частиц и структуры продукта.
Б. Химические средства в твердой форме.
Целью лабораторного контроля является определение наличия наночастиц в продукции и морфометрическая идентификация частиц на ультратонких срезах твёрдых (плотных) образцов.
Схема проведения исследований по электронно-микроскопической визуализации и идентификации наночастиц в средствах в твердой форме представлена в таблице 2.
Таблица 2.
Схема проведения исследований по электронно-микроскопической визуализации и идентификации наночастиц в твердой форме
|
Вид продукта, наноматериала
|
Промышленные товары
|
|
Физическая форма
продукта,
наноматериала
|
Твердая
|
|
Количество материала для исследований
|
50-100 мг
|
|
Приборное обеспечение
|
Ультрамикротом, прибор для изготовления ножей для ультрамикротома, термостат.
Далее - аналогично таблице 1.
|
|
Материалы
|
Аналогично таблице 1 и дополнительно-автоматическая микропипетка на 100 ![]() .
|
|
Химические реактивы
|
Абсолютный этиловый спирт или 100% ацетон, эпоксидные смолы (аралдит или эпон), цитрат свинца. Далее - аналогично таблице 1.
|
|
Препарирование образцов для исследования в электронном микроскопе
|
Этап 1 (подготовка реактивов и материалов к исследованию):
Аналогично таблице 1 и дополнительно:
- приготовление раствора цитрата свинца;
- приготовление эпоксидной смолы.
Этап 2 (препарирование образцов наноматериалов для электронной микроскопии):
- фрагменты образца объемом 1-2 ![]() или порошок наноматериала выдерживают в трех сменах абсолютного этилового спирта или ацетона;
- наноматериал пропитывают в трех сменах абсолютного этилового спирта и аралдита;
- образцы наноматериала заключают в аралдит и полимеризуют в течение 72 час при температуре 60°С;
- на ультрамикротоме стеклянным ножом из образцов наноматериала получают ультратонкие срезы толщиной 30,0-60,0 нм;
- ультратонкие срезы монтируют на электронно-микроскопические сеточки, покрытые формваровой пленкой;
- ультратонкие срезы наноматериала окрашивают цитратом свинца и 1,0% раствором уранилацетата.
|
|
Исследование образцов наноматериалов в просвечивающем электронном микроскопе
|
Основные этапы:
Аналогично таблице 1.
|
|
Анализ электронно-микроскопических изображений структуры наноматериала (продукта)
|
Основные этапы:
- визуализация наночастиц на ультратонких срезах наноматериала или продукта.
Далее - аналогично таблице 1.
|
|
Основные параметры и характеристики наноматериала (продукта)
|
Структурные и морфометрические характеристики
наноматериала:
аналогично таблице 1.
|
Полученные результаты излагаются в заключении.
4.6.2. Аэрозоли с твердой фазой.
Целью лабораторного контроля является определение наличия наночастиц в воздухе рабочей зоны и коммунально-бытовых помещений предприятий.
Схема проведения исследований по электронно-микроскопической визуализации и идентификации наночастиц в составе аэрозолей с твёрдой фазой представлена в таблице 3.
Для идентификации наночастиц в составе аэрозоля с твердой фазой рекомендуется придерживаться отбора проб воздуха с использованием аппарата Кротова (или иных аналогов), на входе которого установлен фильтр для отсечения крупных частиц. Прибор градуируется, регулярно поверяется метрологической службой.
Параллельно готовят контрольные образцы с искомыми наночастицами. Для этого на электронно-микроскопические сеточки наносят водную суспензию одного вида наночастиц или нескольких видов наночастиц, выпускаемых различными подразделениями изучаемого предприятия, либо иными объектами, расположенными в зоне отбора проб воздуха.
Таблица 3.
Схема проведения исследований по электронно-микроскопической визуализации и идентификации наночастиц в различных воздушных системах окружающей среды
|
Объект исследования
|
Воздушная среда предприятий, цехов, коммунально-бытовых помещений
|
|
Физическая форма объекта исследования
|
Газообразная
|
|
Количество материала для выполнения исследований
|
10,0 ![]()
|
|
Приборное обеспечение
|
Аппарат Кротова для отбора проб воздуха, далее - аналогично таблице 2.
|
|
Материалы
|
Пинцет для электронно-микроскопических работ, электронно-микроскопические сеточки, пластинка тефлона размером 10x20 см, чашки Петри, автоматическая микропипетка на 100 ![]() , наконечники к микропипетке, колбы вместимостью 100 ![]() , пробирки вместимостью 20 ![]() , пипетки.
|
|
Химические реактивы
|
Аналогично таблице 2.
|
|
Препарирование образцов для исследования в электронном микроскопе
|
Этап 1 (подготовка реактивов и материалов к эксперименту):
аналогично таблице 2.
Этап 2 (препарирование образцов наноматериалов для электронной микроскопии):
- чашку Петри с дистиллированной водой помещают в аппарат Кротова и выдерживают в потоке воздуха 10 мин;
- на электронно-микроскопические сеточки наносят по одной капле суспензии частиц из воздуха (50-100 ![]() ), через 1 мин удаляют всю жидкость с поверхности сеточки и окрашивают 1,0% водным раствором уранилацетата;
- сеточки с наноматериалом контрастируют 1,0% раствором уранилацетата в течение 1-2 мин.
|
|
Исследование образцов в просвечивающем электронном микроскопе
|
Основные этапы: аналогично таблице 2.
|
|
Анализ электронно-микроскопических изображений структуры твердой фракции проб воздуха
|
Основные этапы:
- визуализация наночастиц в пробах воздуха;
- морфометрический анализ наночастиц;
- определение степени полиморфизма; коэффициента формы; степени агрегированности наночастиц в воздухе; степени загруженности воздуха наночастицами (количество частиц на единицу объема воздуха).
|
|
Основные параметры и характеристики твердой фракции воздуха для выдачи заключения
|
Структурные и морфометрические характеристики наноматериала: наличие частиц размерами 1,0-100,0 нм в пробах воздуха; уровень электронно-оптической плотности частиц; форма частиц; коэффициент формы наночастиц; степень полиморфизма наночастиц в воздухе; степень агрегированности частиц в пробах воздуха.
|
Результаты электронно-микроскопической визуализации и идентификации наночастиц в пробах воздуха отражают в заключении. Рекомендуется обращать внимание на следующее: уровень электронно-оптической плотности частиц - как и в оптическом диапазоне, структурный элемент образца может быть прозрачным, полупрозрачным, непрозрачным, что характеризует элементный состав образца: металлы непрозрачны для электронов и изображения получаются сильно контрастными, легкие металлы почти не рассеивают электроны и выглядят на микрофотографии полупрозрачными.
4.7. Методы контроля наноаэрозолей в воздухе рабочей зоны.
4.7.1. Для контроля наноаэрозолей рекомендуется использовать методы электронно-микроскопической визуализации и идентификации наночастиц при условии предварительного отбора проб воздуха на фильтры, предусмотренные ГОСТ Р ИСО 7708-2006, ГОСТ Р ИСО 14644-3-2007 для мелких частиц.
4.7.2. Для выявления и идентификации отдельных видов наноматериалов (перечень - см. п. 4.4) в отобранных пробах могут быть использованы следующие методы:
- неорганические наноматериалы в виде твердых и
