Методические указания МУ 5835-91 "Методические указания по фотометрическому измерению концентраций кофеина в воздухе рабочей зоны" (утв. заместителем Главного государственного санитарного врача СССР от 10 сентября 1991 г. N 5835-91)

"Структурная формула кофеина"

М.м. 212,21

Кофеин - белые игольчатые кристаллы, слабо горького вкуса, на воздухе выветриваются. Хорошо растворимы в горячей воде и хлороформе, трудно в холодной воде, бензоле, спирте. Очень мало растворимы в эфире. Т. пл. (безв.) 236,5°С. Относится к II классу опасности. Действует возбуждающе на Ц.Н.С., в частности на головной мозг.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

ПДК в воздухе - 0,5 .

Характеристика метода

Метод основан на гидролизе кофеина и колориметрическом определении продукта гидролиза по реакции восстановления реактива Фолина до синего молибденового комплекса.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтры АФА-ВП-10.

Нижний предел измерения кофеина в анализируемом объеме пробы - 5 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе 0.25 (пои отборе 40 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций от 0,25 до 5,0 .Определению не мешает теобромин и теофиллин (в концентрации до 100 мкг).

Суммарная погрешность измерения не превышает .

Время выполнения измерения кофеина 30 мин, включая отбор проб.

Приборы, аппаратура, посуда

Фотоэлектроколориметр.

Аспирационное устройство.

Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 95-743-80.

Весы аналитические.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1:5:10 мл.

Секундомер, ГОСТ 5072-67.

Водяная баня.

Пробирки колориметрические, плоскодонные, высотой 120 мм, внутренним диаметром 15 мм.

Реактивы, растворы

Стандартный раствор кофеина с содержанием 100 мкг в 1 мл раствора дистиллированной воды.

Натрия гидроокись, х.ч., ГОСТ 4328-77.

Уксусная кислота, х.ч., ТУ 6-09-4191-76, водный раствор 1:1.

Тимоловый синий, х.ч., ТУ 6-09-4191-78, 0,1%-ный раствор в этаноле.

Спирт этиловый, ГОСТ 5963-77.

Фосфорно-вольфрамовая кислота, х.ч., ТУ 6-09-3576-78.

Фосфорно-молибденовая кислота, х.ч., ТУ 6-09-3540-78.

Кислота соляная, х.ч., ГОСТ 3118-77, концентрированная.

Кислота ортофосфорная, х.ч., ГОСТ 6552-80, 85%-ный раствор.

Реактив Фалина. Растворяют 10 г фосфорно-вольфрамовой кислоты и 130 г фосфорно-молибденовой кислоты в 400 мл воды, затем добавляют 50 мл концентрированной соляной кислоты и 50 мл 85%-ной ортофосфорной кислоты. Реактив не должен иметь зеленого оттенка, в противном случае необходимо добавить бром и прокипятить. Хранить в темном месте.

Натрий карбонат, х.ч., ГОСТ 83-79,20%-ный раствор.

Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, закрепленный в фильтродержателе. Для определения 1/2 ПДК кофеина следует отобрать 40 л воздуха.

Подготовка к измерению

Градуировочные растворы готовят согласно таблице 28.

Таблица 28

Шкала градуировочных растворов

Номер стандарта	1	2	3	4	5	6	7	8
Стандартный раствор кофеина, мл	0	0.05	0,1	0,2	0,4	0,6	0,8	1,0
Дистиллированная вода, мл	3	2,95	2,9	2,8	2,6	2,4	2,2	2,0
Содержание кофеина, мкг	0	5	10	20	40	60	80	100

В пробирки стандартной шкалы вносят по 0,5 мл раствора гидроокиси натрия, нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин, охлаждают. Добавляют по 1 к. раствора тимолового синего, уксусной кислоты по каплям до желтой окраски исследуемого раствора, затем по 0,5 мл раствора Фолина и по 2 мл карбоната натрия. Измерение оптической плотности проводят в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 800 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащего определяемого вещества (раствор N 1 по таблице). Строят график зависимости оптической плотности градуировочных растворов от содержания вещества (в мкг).

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в стакан, приливают 6 мл дистиллированной воды (дважды порциями по 3 мл). Для анализа отбирают 3 мл в колориметрические пробирки, обрабатывют и измеряют оптическую плотность полученного анализируемого раствора пробы аналогично градуировочным растворам по сравнению с контролем, который готовят одновременно и аналогично пробам.

Расчет кониентраций

Концентрацию кофеина "С" в воздухе (в ) вычисляют по формуле:

где а - концентрация кофеина в анализируемом растворе, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем раствора, взятый для анализа, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. прил. 1).

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

М.И. Наркевич