Приложение 2. Материально-техническое обеспечение исследований

Приложение 2
к MP 3.1.0335-23

Материально-техническое обеспечение исследований ²⁴

------------------------------

²⁴Примечание: допускается использование оборудования, реагентов и расходных материалов с аналогичными или лучшими характеристиками. Возможно использование автоматизированного оборудования для выделения нуклеиновых кислот. С целью автоматизации процедуры приготовления реакционных смесей для амплификации допускается использование автоматизированного оборудования для раскапывания реагентов.

------------------------------

1. Цитологический метод:

- ламинарный бокс 2-го класса биологической безопасности;

- микроскоп бинокулярный с осветителем, набором объективов и окуляров;

- центрифуга лабораторная;

- кюветы и штативы-рельсы для фиксации и окрашивания мазков;

- прибор для окраски мазков (автоматический аналог);

- дозаторы переменного объема полуавтоматические (автоматические);

- спиртовка (газовая горелка);

- приборы и программы информационного обеспечения (компьютер, принтер, электронные информационные системы);

- наборы реагентов для окраски микропрепаратов фуксином, катионовым синим, по Романовскому-Гимзе;

- стекла предметные и покровные стандартных размеров для микропрепаратов;

- петля микробиологическая (d = 2 мм);

- наконечники стерильные для дозаторов переменного объема;

- контейнеры и емкости для обеззараживания медицинских отходов;

- емкости для сброса отработанных расходных материалов;

- одноразовые перчатки;

- регламентированные средства дезинфекции (концентрации и время экспозиции указаны в инструкциях по их использованию).

2. Бактериологический метод:

- ламинарный бокс 2-го класса биологической безопасности;

- микроскоп бинокулярный с осветителем, набором объективов и окуляров;

- фазово-контрастный микроскоп;

- термостаты электрические для выращивания бактерий, поддерживающие температуру в камере в пределах от плюс 35 до плюс 45 ( 1) °C;

- гомогенизатор;

- центрифуга лабораторная;

- весы лабораторные общего назначения;

- СО ₂-инкубатор, поддерживающий температуру в камере в пределах плюс 37 ( 1) °C, содержание СО, на уровне 10 %;

- анаэростаты;

- дистиллятор;

- стерилизатор паровой электрический;

- холодильник фармацевтический, поддерживающий температуру от плюс 4 до плюс 8 °C для хранения культур, биологических субстратов и реагентов;

- низкотемпературный лабораторный морозильник (кельвинатор), поддерживающий температуру в пределах минус 70 - 85 °C;

- спектрофотометр;

- спиртовки (газовые горелки);

- прибор для окраски мазков (автоматический аналог);

- дозаторы переменного объема полуавтоматические (автоматические);

- счетчики колоний (автоматический аналог);

- водяная баня (суховоздушный инкубатор);

- ступки;

- эксикаторы;

- предметные стекла, покровные стекла;

- дополнительное оборудование для автоматизации процесса выделения и изучения микроорганизмов (аппараты средоварения, станции первичного посева, времяпролетный масс-спектрометр);

- приборы и программы информационного обеспечения (компьютер, принтер, электронные информационные системы);

- физиологический раствор, 20 % раствор глюкозы;

- транспортные питательные среды с аэропротектором (тиогликолевая среда, среда Кэри-Блэйер);

- питательные среды для культивирования (эритрит агар - универсальные питательная среда для выделения и культивирования бруцелл; бруцелла-агар; кампилобак-агар, шоколадный агар; колумбийский агар (англ. Columbia Agar Base); сердечно-мозговой агар (англ. Brain Heart Infusion Agar); агар Мюллера-Хинтона (англ. Muller-Hinton Agar));

- ростовые добавки (сыворотка лошадиная нормальная для бактериологических питательных сред жидкая; кровь баранья свежевзятая, дефибринированная, фетальная бычья сыворотка);

- селективные добавки для выделения Н. pylori,

- DPBS без ионов магния и хлора;

- глицерин ГОСТ 6259;

- DMSO;

- реагенты для приготовления стандарта мутности по МакФарланду (раствор H ₂SO ₄ в концентрации 0,18 моль/л, раствор BaCl ₂ в концентрации 0,048 моль/л);

- наборы реагентов для окраски микропрепаратов по Граму;

- наборы реагентов для постановки БУТ;

- СИБ для постановки оксидазного теста;

- перекись водорода ГОСТ 177;

- диагностические наборы реагентов для идентификации Н. pylori по биохимическим свойствам (мультимикротесты для идентификации);

- дрожжевой экстракт ГОСТ 10444.1;

- калий фосфорнокислый однозамещенный ГОСТ 4198;

- натрий фосфорнокислый двузамещенный ГОСТ 4172;

- дистиллированная вода ГОСТ Р 58144;

- мочевина ГОСТ 6691;

- пептон ГОСТ 13805;

- соляная кислота ГОСТ 3118;

- глюкоза ГОСТ 6038;

- натрий хлористый ГОСТ 4233;

- феноловый красный ГОСТ 4599;

- газогенерирующие пакеты;

- контрольные штаммы: Н. pylori АТСС 43504 (NCTC11637), Е. coli АТСС 25922, Р. aeruginosa АТСС 27853, С. albicans АТСС 10231, H. pyogenes АТСС 12344, S. aureus АТСС 29213, Р. mirabilis АТСС 43071;

- одноразовые стерильные контейнеры с устойчивым основанием, пробирки по типу "Эппендорф" для сбора и транспортирования образцов;

- чашки бактериологические (Петри) для выращивания микробиологических культур;

- шпатели, тампоны-зонды для посева, пересева биологических материалов, выросших культур микроорганизмов;

- штативы и поддоны для пробирок и контейнеров, чашек Петри;

- кюветы и штативы-рельсы для фиксации и окрашивания мазков;

- петли бактериологические;

- наконечники стерильные для дозаторов переменного объема;

- посуда мерная лабораторная стеклянная и пластиковая;

- пипетки пластиковые пастеровские градуированные для стандартизации объема и переноса жидкостей;

- контейнеры и емкости для обеззараживания медицинских отходов;

- емкости для сброса отработанных расходных материалов;

- одноразовые перчатки;

- регламентированные средства дезинфекции (концентрации и время экспозиции указаны в инструкциях по их использованию).

3. Определение чувствительности культур Н. pylori к АМП:

- ламинарный бокс 2-го класса биологической безопасности;

- термостаты электрические для выращивания бактерий, поддерживающие температуру в камере в пределах плюс 35 ( 1) °C;

- анаэростат или СО ₂-инкубатор, поддерживающий температуру в камере в пределах плюс 35 ( 1) °C, содержание СО ₂ на уровне 3 - 7 %;

- холодильник фармацевтический, поддерживающий температуру от плюс 4 до плюс 8 °C для хранения культур, биологических субстратов и реагентов;

- спиртовки (газовые горелки);

- аналитические весы;

- дозаторы переменного объема полуавтоматические (автоматические);

- прибор для определения концентрации бактериальных клеток (стандарт мутности по Мак-Фарланду);

- приборы и программы информационного обеспечения (компьютер, принтер, электронные информационные системы);

- питательные среды для определения чувствительности (бульон Мюллера-Хинтона, агар Мюллера-Хинтона);

- кровь баранья свежевзятая, дефибринированная;

- Е-тесты, планшеты, серийные разведения АМП (амоксициллина, левофлоксацина, кларитромицина, тетрациклина, метронидазола и рифампицина);

- контрольные штаммы: Н. pylori АТСС 43504 (NCTC11637), Е. coli АТСС 25922, Р. aeruginosa АТСС 27853;

- чашки бактериологические (Петри) для выращивания микробиологических культур;

- шпатели, тампоны-зонды для посева, пересева биологических материалов, выросших культур микроорганизмов;

- штативы и поддоны для пробирок и контейнеров, чашек Петри;

- петли бактериологические;

- наконечники стерильные для дозаторов переменного объема;

- посуда мерная лабораторная стеклянная и пластиковая;

- газогенераторные пакеты;

- пипетки пластиковые пастеровские градуированные для стандартизации объема и переноса жидкостей;

- контейнеры и емкости для обеззараживания медицинских отходов;

- емкости для сброса отработанных расходных материалов;

- одноразовые перчатки;

- регламентированные средства дезинфекции (концентрации и время экспозиции указаны в инструкциях по их использованию).

4. Молекулярно-биологический метод (ПЦР).

Каждая рабочая зона обеспечивается необходимым количеством спецодежды (халат, шапочка, одноразовые перчатки, сменная обувь). Использование одежды из другой зоны запрещено.

Рабочая зона 1:

- бокс биологической безопасности II класса защиты;

- центрифуга для пробирок объемом 5 - 100 мл до 3 тыс об/мин;

- микроцентрифуга/вортекс;

- настольная центрифуга для микропробирок по типу "Эппендорф" объемом 1,5 - 2 мл до 10000;

- твердотельный термостат для пробирок объемом 1,5 мл с диапазоном рабочих температур 25 - 100 °C;

- термостатируемый шейкер для пробирок;

- отдельный набор автоматических пипеток переменного объема;

- штативы для наконечников, микропробирок объемом 1,5 мл;

- комбинированный холодильник с камерами, поддерживающими температуру от плюс 2 до плюс 8 °C и не выше минус 16 °C (для хранения исследуемого материала). Возможно отдельное использование холодильника с камерой, поддерживающей температуру плюс от 2 до плюс 8 °C, и морозильника с камерой, поддерживающей температуру не выше минус 16 °C;

- морозильная камера на минус 70 °C (при необходимости, в случае длительного хранения материала);

- лизирующий раствор из комплекта реагентов (тест-систем) для выделения нуклеиновых кислот из биопроб;

- одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся или плотно закрывающиеся микропробирки на 1,5 или 2,0 мл;

- одноразовые наконечники для пипеток переменного объема с фильтром до 200 и до 1 000 мкл, свободные от РНК-аз и ДНК-аз;

- контейнеры и емкости для обеззараживания медицинских отходов;

- емкости для сброса отработанных расходных материалов;

- одноразовые перчатки;

- регламентированные средства дезинфекции (концентрации и время экспозиции указаны в инструкциях по их использованию).

Рабочая зона 2:

- бокс биологической безопасности II класса биологической защиты;

- микроцентрифуга/вортекс;

- настольная центрифуга для микропробирок по типу "Эппендорф" объемом 1,5 - 2 мл до 10000;

- твердотельный термостат для пробирок объемом 1,5 мл с диапазоном рабочих температур 25 - 100 °C;

- вакуумный отсасыватель медицинский с колбой-ловушкой;

- отдельный набор автоматических пипеток переменного объема;

- штативы для наконечников, микропробирок на 1,5 мл;

- холодильник с камерами, поддерживающими температуру от плюс 2 до плюс 8 °C и не выше минус 16 °C (для хранения наборов, предназначенных для выделения нуклеиновых кислот). Возможно отдельное использование холодильника с камерой, поддерживающей температуру от плюс 2 до плюс 8 °C, и морозильника с камерой, поддерживающей температуру не выше минус 16 °C;

- холодильник с камерой, поддерживающей температуру от плюс 2 до плюс 8 °C (для хранения препаратов нуклеиновых кислот). Не допускается хранение препаратов нуклеиновых кислот в одном холодильнике с компонентами набора для выделения нуклеиновых кислот;

- диагностические комплекты реагентов (тест-системы) для выделения нуклеиновых кислот из биопроб, зарегистрированные и разрешенные для использования в России в установленном порядке.

- одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся или плотно закрывающиеся пробирки объемом 1,5 или 2,0 мл;

- одноразовые наконечники для пипеток переменного объема с фильтром до 200 и до 1 000 мкл, свободные от РНК-аз и ДНК-аз;

- одноразовые наконечники для пипеток переменного объема до 200 мкл;

- контейнеры и емкости для обеззараживания медицинских отходов;

- емкости для сброса отработанных расходных материалов;

- одноразовые перчатки;

- регламентированные средства дезинфекции (концентрации и время экспозиции указаны в инструкциях по их использованию).

Рабочая зона 3:

- бокс биологической безопасности II класса защиты или настольный бокс с бактерицидной лампой (ПЦР-бокс; УФ-бокс);

- программируемые термоциклеры (персональные, многомодульные, с функцией амплификации в режиме "реального времени") и автоматизированные станции. Выбор термоцик