Приложение. Трудоемкость работ при испытании корма, полученного из генно-инженерно-модифицированных организмов

Приложение
к Методике определения платы за
оказание услуги по испытанию корма,
полученного из генно-инженерно-модернизированных
организмов, на безопасность в целях его
государственной регистрации, предоставляемой
федеральными государственными бюджетными
учреждениями, находящимися в ведении
Федеральной службы по ветеринарному
и фитосанитарному надзору

Трудоемкость работ при испытании корма, полученного из генно-инженерно-модифицированных организмов

Для проведения испытания корма, полученного из генно-инженерно-модифицированных организмов, на безопасность в целях его государственной регистрации необходимо выполнение следующих операций и исследований.

1. Группа экспертов выполняет экспертный анализ и оценку данных, характеризующих заявленные на регистрацию генно-инженерно-модифицированные организмы.

1.1. Оценка композиционной эквивалентности проводится на основании сведений о результатах сравнения химического состава генетически модифицированных организмов (ГМО) с химическим составом его традиционного аналога, представленных заявителем, по следующим параметрам:

содержание белка;

аминокислотный состав;

содержание жира;

жирнокислотный состав;

углеводный состав;

содержание витаминов;

содержание макро- и микроэлементов;

содержание биологически активных веществ;

содержание аллергенов;

содержание антропогенных и природных контаминантов (токсичных элементов, микотоксинов, пестицидов, радионуклидов, вредных примесей и др.);

содержание антинутриентов и других веществ, характерных для растительных организмов данного вида.

Перечень показателей может быть изменен в зависимости от свойств изучаемого растительного организма.

Трудоемкость работ: эксперт - 310 минут.

1.2. Анализ результатов токсикологических исследований проводится на основании сведений, представленных заявителем и включающих:

результаты оценки безопасности одного или нескольких белков, определяющих проявление заданных признаков у ГМО (молекулярная и биохимическая характеристика белка; наличие или отсутствие гомологии с токсинами белковой природы, а также с белками, обладающими фармакологической или иной биологической активностью; изучение стабильности белка при обработке, хранении, технологической переработке; влияние температуры и рН, возможные модификации и/или образование стабильных белковых фрагментов в результате различных воздействий; устойчивость белка к обработке протеолитическими ферментами в эксперименте in vitro; исследования острой пероральной токсичности белка в эксперименте на грызунах; и др.);

результаты оценки безопасности нативного продукта (данные 90-дневных исследований на грызунах, данные исследований на молодых быстро растущих животных (цыплятах-бройлерах, ягнятах и др.), - в случае если такие исследования проводились;

результаты других токсикологических исследований.

Трудоемкость работ: эксперт - 1060 минут.

1.3. Анализ результатов аллергологических исследований проводится на основании сведений, представленных заявителем и включающих:

результаты оценки аллергенных свойств одного или нескольких белков, определяющих проявление заданных признаков у ГМО (сравнение с известными аллергенами с использованием баз данных, содержащих информацию о трехмерной структуре и функции известных аллергенов и родственных им белков); определение потенциальной аллергенности белка в иммунохимических исследованиях; определение устойчивости к воздействию протеолитических ферментов (пепсина);

результаты аллергологических исследований нативного продукта (сравнение набора аллергенов исследуемого ГМО с набором аллергенов его традиционного аналога и др.), - должны быть проведены в случае, если имеются данные об аллергенных свойствах организма-донора.

Трудоемкость работ: эксперт - 1060 минут.

1.4. Анализ результатов пострегистрационного мониторинга в стране-заявителе и других странах, осуществляемого с целью выявления незаданных эффектов генетической модификации, которые не могли быть обнаружены на стадии регистрационных исследований, проводится на основании сведений, представленных заявителем и научных публикаций.

Трудоемкость работ: эксперт- 1580 минут.

2. Эксперты проводят оценку методов идентификации ГМО, направленную на подтверждение их адекватности инструментальной и методической базе, используемой в учреждениях Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору для контроля за обращением продуктов, содержащих ГМО.

Экспертная оценка методов обнаружения, идентификации и количественного определения ГМО в кормах и кормовых добавках проводится на основании сведений, представленных заявителем.

Оценке подлежат:

метод идентификации одного или нескольких трансформационных событий;

метод количественного определения одного или нескольких трансформационных событий;

протоколы проведения анализов;

описание праймеров;

стандартные образцы состава и свойств.

Трудоемкость работ: эксперт - 980 минут.

3. Ведущий и старший научные сотрудники, лаборант-исследователь под руководством эксперта проводят генетическую оценку генно-инженерно-модифицированных организмов.

Генетическая оценка ГМО включает проверку присутствия одной или нескольких синтетических генетических конструкций методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Генетические исследования включают:

описание молекулярной структуры одной или нескольких синтетических генетических конструкций (нуклеотидная последовательность);

метод идентификации и количественного определения одного или нескольких трансформационных событий;

описание праймеров;

исследование стандартных образцов состава и свойств.

Трудоемкость работ: эксперт - 130 минут; ведущий научный сотрудник - 550 минут; старший научный сотрудник - 870 минут; лаборант-исследователь - 410 минут.

4. Научный сотрудник и лаборант-исследователь проводят оценку функционально-технологических свойств генно-инженерно-модифицированных организмов. Изучаемые функциональные свойства:

рН водной суспензии;

растворимость;

реологические свойства водных дисперсий;

водоудерживающая и жироудерживающая способность;

критическая концентрация гелеобразования;

эмульсионная стабильность и др.

Трудоемкость работ: научный сотрудник - 360 минут; лаборант-исследователь - 370 минут.

5. Ведущий, старший научные сотрудники, научные сотрудники, лаборант-исследователь и рабочий по уходу за животными под руководством эксперта проводят оценку безопасности генно-инженерно-модифицированных организмов.

Перечень показателей безопасности определяется на основании требований СанПиН 2.3.2.1078-01 "Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов", введенными в действие Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 14 ноября 2001 г. N 36, зарегистрированным Минюстом России 22 сентября 2002 г., регистрационный N 3326*.

Изучаемые показатели:

содержание токсичных элементов;

содержание микотоксинов;

содержание пестицидов;

содержание радионуклидов;

содержание вредных примесей;

микробиологические показатели;

другие показатели (в случае необходимости).

Трудоемкость работ: эксперт - 20 минут; ведущий научный сотрудник - 510 минут; старший научный сотрудник - 870 минут; научный сотрудник - 780 минут; лаборант-исследователь - 440 минут.

6. Токсикологические исследования ГМО проводятся ведущим, старшим научными сотрудниками, научными сотрудниками, лаборантом-исследователем и рабочим по уходу за животными под руководством эксперта в эксперименте на лабораторных животных. Продолжительность эксперимента 180 дней.

Трудоемкость работ эксперта по п. 6 - 240 минут.

Исследуются следующие показатели:

6.1. Интегральные показатели:

общее состояние животных (внешний вид, двигательная активность, состояние шерстного покрова) - каждые 2 дня;

поедаемость корма - ежедневно;

масса тела - каждые 7 дней;

масса внутренних органов (головной мозг, сердце, селезенка, легкие, тимус, гипофиз, печень, почки, надпочечники, семенники) - на 30-й и 180-й дни эксперимента.

Трудоемкость работ: научный сотрудник - 340 минут; лаборант-исследователь - 465 минут.

6.2. Гематологические, биохимические, морфологические исследования проводят на 30-й и 180-й дни эксперимента.

Изучаемые показатели:

концентрация гемоглобина;

гематокрит;

общее количество эритроцитов;

средний объем эритроцита (СОЭ);

среднее содержание гемоглобина в эритроците (ССЭ);

средняя концентрация гемоглобина в эритроците (СКЭ);

общее количество тромбоцитов;

общее количество лейкоцитов;

дифференцированный подсчет лейкоцитов (нейтрофилы, лимфоциты, эозинофилы, моноциты, базофилы).

Трудоемкость работ: научный сотрудник - 310 минут; лаборант-исследователь - 460 минут.

6.3. Биохимические показатели исследуются на 30-й и 180-й дни эксперимента, в том числе:

6.3.1. Общий биохимический анализ крови. Изучаемые показатели:

аланинаминотрансфераза (АЛТ);

аспартатаминотрансфераза (ACT);

желчные кислоты;

фосфатаза щелочная;

билирубин общий;

билирубин прямой;

белок общий;

альбумин;

глобулин;

креатинин;

глюкоза;

альфа-амилаза;

липаза;

лактатдегидрогеназа;

общие липиды;

триглицериды;

холестерин;

холинэстераза;

мочевина;

хлориды;

натрий;

фосфор;

калий.

Трудоемкость работ: научный сотрудник - 420 минут; лаборант-исследователь - 460 минут.

6.3.2. Общий анализ мочи. Изучаемые показатели:

суточный диурез;

цвет и прозрачность;

относительная плотность;

рН;

белок;

глюкоза;

креатинин.

Трудоемкость работ: научный сотрудник - 210 минут; лаборант-исследователь - 460 минут.

6.3.3. Системные биомаркеры, в том числе:

6.3.3.1. Исследование системы антиоксидантной защиты (активность ферментов антиоксидантной защиты). Изучаемые показатели:

глутатионредуктаза;

глутатионпероксидаза;

супероксиддисмутаза;

каталаза.

Трудоемкость работ: старший научный сотрудник - 270 минут; научный сотрудник - 420 минут.

6.3.3.2. Содержание продуктов перекисного окисления липидов. Изучаемые показатели:

малоновый диальдегид.

Трудоемкость работ: научный сотрудник - 140 минут; лаборант-исследователь - 145 минут.

6.3.3.3. Исследование активности ферментов 1-й и 2-й фазы метаболизма ксенобиотиков. Изучаемые показатели:

общее содержание цитохрома Р-450;

7-этоксирезоруфин-О-деэтилаза;

7-пентоксирезоруфин-О-деэтилаза;

UDP-глюкуронозилтрансфераза;

глутатионтрансфераза.

Трудоемкость работ: ведущий научный сотрудник - 240 минут; старший научный сотрудник - 340 минут; научный сотрудник - 640 минут; лаборант-исследователь - 370 минут.

6.3.3.4. Исследование системы регуляции апоптоза (общая и неседиментируемая активность ферментов лизосом). Изучаемые показатели:

галактозидаза;

глюкуронидаза;

арилсульфатазы А и В.

Трудоемкость работ: старший научный сотрудник - 570 минут; научный сотрудник - 710 минут; лаборант-исследователь - 280 минут.

6.4. Морфологические исследования. Объектом исследования служат:

кожа;

головной мозг;

сердце;

аорта;

селезенка;

легкие;

лимфатические узлы;

тимус;

щитовидная железа;

гипофиз;

ЖКТ (желудок, тонкая и толстая кишки);

печень;

поджелудочная железа;

почки;

семенники.

На 30-й и 180-й дни эксперимента (плановый забор):

макроскопические исследования;

микроскопические исследования - обзорные гистологические исследования;

морфометрический анализ.

Вскрытие погибших в течение эксперимента животных (внеплановый забор):

макроскопические исследования;

Микроскопические исследования (перечень исследуемых органов может быть сокращен до минимально необходимого для установления причины смерти) - обзорные гистологические исследования.

Трудоемкость работ: старший научный сотрудник - 335 минут; научный сотрудник - 810 минут; лаборант-исследователь - 520 минут.

7. Ведущий, старший научные сотрудники, научные сотрудники, лаборант-исследователь и рабочий по уходу за животными под руководством эксперта проводят иммунологические исследования ГМО в эксперименте на мышах, включая изучение его иммуномодулирующих и сенсибилизирующих свойств по четырем тестам:

действие на гуморальное звено иммунитета - в тесте определения уровня гемагглютининов к эритроцитам барана;

действие на клеточное звено иммунитета - в реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) к эритроцитам барана;

действие как сенсибилизирующего агента - в тесте чувствительности к гистамину;

действие на естественную резистентность мышей к Salmonella typhimurium (сальмонеллы мышиного тифа).

Исследуемые показатели :

действие ГМО на гуморальное звено иммунитета.

действие ГМО на клеточное звено иммунитета.

действие ГМО как сенсибилизирующего агента к гистамину.

Действие ГМО на естественную резистентность мышей к S. typhimurium.

Трудоемкость работ: эксперт - 215 минут; ведущий научный сотрудник - 610 минут; старший научный сотрудник - 670 минут; научный сотрудник - 720 минут; лаборант-исследователь - 490 минут.

8. Ведущий научный сотрудник, научные сотрудники, лаборант-исследователь и рабочий по уходу за животными под руководством эксперта проводят аллергологические исследования ГМО в течение 35 суток. Исследуемые показатели:

тяжесть протекания системной анафилаксии;

уровень циркулирующих сенсибилизирующих антител (субклассов IgG1 + IgG4) у крыс.

Трудоемкость работ: эксперт - 80 минут; ведущий научный сотрудник - 350 минут; научный сотрудник - 590 минут; лаборант-исследователь - 350 минут.

9. Ведущий, старший научные сотрудники, научные сотрудники, лаборант-исследователь и рабочий по уходу за животными под руководством эксперта проводят генотоксикологические исследования ГМО в эксперименте на лабораторных животных. Исследуемые показатели:

мутагенной активности (регистрация видимых структурных нарушений хромосом в клетках костного мозга на стадии метафазы);

регистрация повреждений ДНК.

Трудоемкость работ: эксперт - 130 минут; ведущий научный сотрудник - 550 минут; старший научный сотрудник - 870 минут; научный сотрудник - 720 минут; лаборант-исследователь - 440 минут.

10. Старший научный сотрудник, научные сотрудники, лаборант-исследователь и рабочий по уходу за животными под руководством эксперта проводят исследования репродуктивной токсичности ГМО в эксперименте на лабораторных животных включая:

изучение влияния на генеративную функцию;

изучение эмбриотоксического и тератогенного действий, регистрируемых в пренатальном и постнатальном периодах развития.

Показатели, характеризующие генеративную функцию:

морфологические исследования семенников (индекс сперматогенеза, среднее количество нормальных сперматогоний в каждом канальце, относительное количество канальцев с 12-й стадией мейоза);

морфологические исследования яичников (примордиальные фолликулы, фолликулы с двумя и более слоями фолликулярных клеток, третичные фолликулы, атретические тела, желтые тела, общее количество генеративных форм).

Показатели, характеризующие перинатальное развитие потомства:

визуальное исследование матки, плаценты, плодов: выявление живых и мертвых плодов, подсчет количества желтых тел, мест имплантации, количество резорбций по правому и левому рогу матки (с последующим вычислением пред- и постимплантационной эмбриональной смертности);

анализ эмбрионального материала (не менее 5-ти плодов от каждой крысы).

Показатели, характеризующие постнатальное развитие потомства:

учет величины помета в день родов, подсчет количества живых и мертвых крысят, подсчет особей разного пола, установление внешних уродств, измерение массы тела, определение краниокаудального размера в 1-й день жизни;

учет показателей физиологического развития крысят: срок отлипания ушных раковин, появление первичного волосяного покрова, прорезывание резцов, открытие глаз, опускание семенников, открытие влагалища; выживаемость потомства в 1-30 дни жизни;

измерение массы тела и роста крысят в 1, 4, 7, 14, 21 и 25 дни жизни.

Трудоемкость работ: эксперт - 20 минут; старший научный сотрудник - 240 минут; научный сотрудник - 390 минут; лаборант-исследователь - 490 минут.

11. Подготовка экспертами отчета по результатам исследований ГМО.

Трудоемкость работ: эксперт - 390 минут.

12. Затраты времени рабочего по уходу за животными на содержание животных, находящихся под опытом, определяется общим временем проведения эксперимента - 180 суток. Затраты времени в сутки - 45 минут. В последний день эксперимента рабочий по уходу за животными тратит дополнительно 120 минут на утилизацию трупов животных.

Итого трудоемкость работ по услуге:

эксперт - 6215 минут;

ведущий научный сотрудник - 2810 минут;

старший научный сотрудник - 5035 минут;

научный сотрудник - 7560 минут;

лаборант-исследователь - 6150 минут.

рабочий по уходу за животными - 8220 минут.

______________________________

* В редакции дополнений NN 1, 2, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 21, 22, 23, 24, 25, утвержденных Постановлениями Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 20 августа 2002 г. N 27 (зарегистрировано Минюстом России 05.09.2002, регистрационный N 3775), от 15 апреля 2003 г. N 41 (зарегистрировано Минюстом России 29.05.2003, регистрационный N 4603), от 25 июня 2007 г. N 42 (зарегистрировано Минюстом России 16.07.2007, регистрационный N 9852), от 18 февраля 2008 г. N 13 (зарегистрировано Минюстом России 11.03.2008, регистрационный N 11311), от 5 марта 2008 г. N 17 (зарегистрировано Минюстом России 03.04.2008, регистрационный N 11465), от 21 апреля 2008 г. N 26 (зарегистрировано Минюстом России 23.05.2005, регистрационный N 11741), от 23 мая 2008 г. N 30 (зарегистрировано Минюстом России 06.06.2008, регистрационный N 11805), от 16 июля 2008 г. N 43 (зарегистрировано Минюстом России 31.07.2008, регистрационный N 12059), от 1 октября 2008 г. N 56 (зарегистрировано Минюстом России 02.10.2008, регистрационный N 12391), от 10 октября 2008 г. N 58 (зарегистрировано Минюстом России 27.10.2008, регистрационный N 12530), от 11 декабря 2008 г. N 69 (зарегистрировано Минюстом России 19.12.2008, регистрационный N 12906), от 5 мая 2009 г. N 28 (зарегистрировано Минюстом России 29.06.2009, регистрационный N 14168), от 8 декабря 2009 г. N 73 (зарегистрировано Минюстом России 24.12.2009, регистрационный N 15813), от 27 января 2010 г. N 6 (зарегистрирован Минюстом России 10.03.2010, регистрационный N 16592), от 21 апреля 2010 г. N 27 (в ред. от 5.10.2010) (зарегистрировано Минюстом России 04.05.2010, регистрационный N 17097), от 28 июня 2010 г. N 71 (зарегистрирован Минюстом России 09.08.2010, регистрационный N 18097), от 10 августа 2010 г. N 102 (зарегистрировано Минюстом России 08.09.2010, регистрационный N 18381), от 12 ноября 2010 г. N 145, (зарегистрирован Минюстом России 21.12.2010, регистрационный N 19298), от 27 декабря 2010 N 177 (зарегистрирован Минюстом России 17.02.2011, регистрационный N 19879), от 11 апреля 2011 г. N 30 (зарегистрирован Минюстом России 13.05.2011, регистрационный N 20739), от 1 июня 2011 г. N 79 (зарегистрирован Минюстом России 19.07.2011, регистрационный N 21407), от 6 июля 2011 г. N 90 (зарегистрирован Минюстом России 15.12.2011, регистрационный N 22636); Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 31 мая 2002 г. N 18 (зарегистрировано Минюстом России 04.06.2002, регистрационный N 3499).

Открыть документ в системе ГАРАНТ

Открыть в бесплатной Интернет-версии Открыть в Интернет-версии (только для пользователей системы ГАРАНТ)

<< Приложение N 9. Методика определения размера платы за оказание услуги по испытанию корма, полученного из генно-инженерно-модифицированных...		Приложение >> N 10. Предельный размер платы за оказание услуги по испытанию корма, полученного из генно-инженерно-модифицированных организмов,...
	Содержание Приказ Минсельхоза РФ от 22 марта 2012 г. N 194 "Об утверждении методик определения размеров платы и предельных размеров...